大肠杆菌聚合酶 I 大片段

Name: 大肠杆菌聚合酶 I 大片段
SKU: rp221816
Availability: InStock

货号: rp221816

COA

有货

级别和纯度: 无动物源 ? 无载体 ? 生物活性 ? ActiBioPure™ ? EnzymoPure™ ? 无菌 ? 5 U/μL

Accession #

2KFZ_A,P00582

表达系统

E. coli

生物活性

One unit is the amount of enzyme required to catalyze the incorporation of 10nmol of deoxyribonucleotides (dNTPs) into a polynucleotide within 30 minutes at 37℃.

规格

库存

价格

数量

200U

rp221816-200U

现货

¥199.90

1KU

rp221816-1KU

现货

¥759.90

5×1KU

rp221816-5×1KU

现货

¥2,909.90

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概述规格储存与运输技术文档高级数据质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱) 技术文档和文章溶液计算器常见问题

🧪

为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,无动物源,无菌,无载体,生物活性级，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

🌡

储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输。请查阅批次 COA 获取详细规格。

📋

质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

📚

文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

本公司生产的大肠杆菌聚合酶 I 大片段即 Klenow Fragment，又称 Klenow 片段，Klenow Fragment 保留了 DNA 聚合酶 I 的 5'→3'聚合酶活性和 3'→5'外切酶活性，但缺少完整的 Klenow 酶的 5'→3'外切酶活性。Klenow Fragment 的 3'→5'外切酶活性保证了其合成 DNA 时的准确性 (proofreading)。

组分和说明

rp221816	Component	200U	1KU	5*1KU	Storage
rp221816A	Klenow Fragment (5U/µl)	40μl	200μl	5*200μl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
rp221816B	Reaction Buffer(10X)	200μl	1ml	5*1ml	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

产品应用

双链 DNA 5'突出(5' overhang)末端的补平(fill-in)；双链 DNA 3'突出(3' overhang)末端的打平(也称削平)；5'突出末端的标记；随机引物法进行 DNA 标记；Sanger 双脱氧法进行 DNA 测序；cDNA 第二链的合成或定点突变反应第二链的合成。

产品优势

对于 5'突出或 3'突出的粘末端都可以催化产生平末端，用于后续的平端连接。

使用说明

1.双链 DNA 5'突出末端的补平：

a.对于双链 DNA 5'突出末端的补平，参考下表在冰浴中配制如下反应体系。

Reagent	Volume	Final Concentration
Nuclease-Free Water	(16.6-x)µl	-
dsDNA with 5’ Overhang	xµl	~0.5µM or 5-200ng/µl
Reaction Buffer (10X)	2µl	1X
dNTP Mix (2.5mM each)	0.4µl	50µM
Klenow Fragment (5U/µl)	1µl	0.25U/µl
Total Volume	20µl	-

注 1：按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex 在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体；如果同时进行多个反应，可以把上表中除 dsDNA with 5’ overhang 之外的所有溶液和酶提前混合，分装到各反应管，最后再加入 dsDNA with 5’ overhang。

注2：dsDNA with 5’ Overhang如果是寡核苷酸，最终浓度可以约为0.5µM，如果是消化后的DNA质粒等最终浓度可以约为 5-200ng/µl。

b.反应条件：37℃孵育 10 分钟。

c.终止反应：75℃孵育 10 分钟以终止反应。

2.双链 DNA 3'突出末端的打平：

a.具有 3'突出末端的杂交双链 DNA 的退火。将单链 DNA 1 和 DNA 2 等摩尔数混合，推荐的终浓度为 10µM，95℃孵育 2min，然后通过梯度降温至 25℃退火形成具有 3'突出末端的杂交双链 DNA。并按照该产品使用说明进行退火反应(退火后的双链 DNA 推荐在-20℃保存)。

b.对于双链 DNA 3'突出末端的打平，参考下表在冰浴中配制如下反应体系。

Reagent	Volume	Final Concentration
Nuclease-Free Water	(17-x)µl	-
dsDNA with 3’ Overhang	xµl	~0.5µM or 5-200ng/µl
Reaction Buffer (10X)	2µl	1X
Klenow Fragment (5U/µl)	1µl	0.25U/µl
Total Volume	20µl	-

注 1：按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex 在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体；如果同时进行多个反应，可以把上表中除 dsDNA with 3’ overhang 之外的所有溶液和酶提前混合，分装到各反应管，最后再加入 dsDNA with 5’ overhang。

注2：dsDNA with 3’ Overhang如果是寡核苷酸，最终浓度可以约为0.5µM，如果是消化后的DNA质粒等最终浓度可以约为 5-200ng/µl。

c.37℃孵育 10 分钟。

d.75℃孵育 10 分钟以终止反应。

3.双链 DNA 5'突出(5'overhang)末端的标记：

a.参考如下表格设置反应体系：

Reagent	Volume
dsDNA with 5’ Overhang	10~15µl (0.1~4µg)
Reaction Buffer (10X)	2µl
[α-32P]-dNTP, ~15-30 TBq/mmol(400-800Ci/mmol)	0.74 MBq (20µCi)
或 [α-32P]-dNTP, ~110 TBq/mmol(3000Ci/mmol)	2.96 MBq (80µCi)
3 dNTP Mixture (2.5mM each , without the labeled dNTP)	2µl
Klenow Fragment	0.2µl (1U)
补充无核酸酶的去离子水	至 20µl

b.按上述体系配好之后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex 在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。

c.30℃孵育 15 分钟。 d.75℃孵育 10 分钟终止反应。

保存条件： -20℃保存，≤0℃运输

注意事项：

（1）酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

（2）本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

（3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

规格

产品名称

大肠杆菌聚合酶 I 大片段

别名

克列诺片段 | DNA聚合酶I片段 | DNA 聚合酶 I，大片段

英文别名

DNA polymerase I Fragment | E.coli. DNA polymerase I | DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment

规格或纯度

无载体, 无动物源, EnzymoPure™, 无菌, ActiBioPure™, 生物活性, 5 U/μL

生物活性

One unit is the amount of enzyme required to catalyze the incorporation of 10nmol of deoxyribonucleotides (dNTPs) into a polynucleotide within 30 minutes at 37℃.

表达系统

E. coli

种属

大肠杆菌(E.coli)

无载体

Yes

无动物源

Yes

来源

重组表达

预测分子量

68 kDa (monomer)

SDS-PAGE

68 kDa (monomer)

分子类型

酶

产品线

biological_products

储存与运输

物理形态

液体

储存缓冲液

25mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50% (v/v) Glycerol, pH 7.5

浓度

5 U/μL

储存条件

-20°C储存,避免反复冻融

运输条件

超低温运输

稳定性与储存

长期储存-20℃（24个月）；避免反复冻融。

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

下载 SDS →

✅ 分析证书 (COA)

批次质量数据。输入批号以获取对应 COA。

查询 COA →

📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

查看数据表 →

🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

查看规格说明 →

高级数据

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

输入批号以搜索分析图谱:

通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA，每批产品都进行了严格的验证，您可放心使用！

找到2个结果

批号(Lot Number)	证书类型	货号
ZJ25F0826186	分析证书	rp221816
ZJ25F0826185	分析证书	rp221816

技术文档和文章

rp221816_大肠杆菌聚合酶 i 大片段产品说明书.pdf

分子生物学实验中常用聚合酶的类型、特性与应用

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PCR DNA聚合酶等温扩增 qPCR RNA聚合酶聚合酶反转录酶高保真扩增体外转录

Types, Properties, and Applications of Commonly Used Polymerases in Molecular Biology Experiments

目录：技术文章

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PCR qPCR

溶液计算器

摩尔浓度计算器

计算溶液所需的质量、体积或浓度。

质量

浓度

体积

分子量

g/mol

稀释计算器

计算配制储备溶液所需的稀释度。

浓度1（C1）

体积 1 (V1)

浓度 2 (C2)

体积 2 (V2)

复溶计算器

复溶计算器允许您快速计算试剂的体积，以复溶小瓶。只需输入试剂的质量和目标浓度，计算器将确定其余部分。

体积（添加到小瓶中）

质量（小瓶）

所需的复溶浓度

常见问题

什么是「无动物源」？

「无动物源」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。

什么是「无载体」？

「无载体」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。

本产品应如何储存？

请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。

本产品如何运输？

本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。

如何获取批次专用COA？

每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。

需要帮助选择级别？

我们的级别选择指南涵盖了目录中所有的变体的纯度、稳定剂状态和应用适用性。

查看 Animal Free 级别指南 → 查看 Carrier Free 级别指南 → 查看 Bioactive 级别指南 → 查看 ActiBioPure™ 级别指南 → 查看 EnzymoPure™ 级别指南 → 查看 Sterile 级别指南 →

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