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化学法热启动DNA 聚合酶
库存信息
货号 (SKU) | 包装规格 | 是否现货 | 价格 | 数量 |
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T295115-1kit |
1kit |
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货号 (SKU) | 包装规格 | 是否现货 | 价格 | 数量 |
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T295115-1kit |
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产品名称 | 化学法热启动DNA 聚合酶 | ||||||||||
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规格或纯度 | EnzymoPure™ | ||||||||||
产品介绍 |
产品简介 本品是 94 kDa 的耐热性 DNA 聚合酶, 通过将 Thermus aquaticus DNA Polymerase 的基因经克隆转化到大肠杆菌中进行表达后,分离提取而得到的,与天然 Taq DNA 聚合酶具有相同的功能。具有 5'→ 3' 聚合酶活性和 5'→ 3' 外切酶活性,但无 3'→ 5' 外 切酶活性。PCR 产物的 3' 端带 A,可克隆至 T 载体。Taq-HS DNA polymerase 是基于 Taq DNA polymerase 升级改造的化学法修饰热启动产品,适用于探针法荧光定量 PCR。 产品组成
使用方法 1. 探针法荧光定量 PCR 反应体系 a. 引物推荐终浓度为 0.2 μM,效果不佳时可以在 0.1~1 μM 进行调 整;引物长度请设定 18~25 bp,GC 含量为 40%~60%。最佳效率 的扩增目标片段一般为 80~200 bp,设计时应尽量避免发夹结构、二 聚体等复杂结构,并尽可能横跨内含子区域。 b. 探针终浓度推荐为 0.25 μM,效果不佳时可以在 0.1~1 μM 进行调 整。 c. 模板添加量不应超过总反应体系的 10%,推荐加样量为 1~2 μl。不同种类DNA模板中含有的靶基因拷贝数目不同,必要时可进行梯度稀释,以确定最佳的DNA 模板添加量。 2. 探针法荧光定量 PCR 反应程序 质量控制 a.核酸内切酶残留检测:将酶液与超螺旋质粒 DNA 在 37 ℃ 温育 4 h,通过 DNA 电泳检测质粒无变化。 b.核酸外切酶残留检测:将酶液与双链 DNA 底物在 37 ℃ 温育 16 h,通过 DNA 电泳检测双链 DNA 底物无变化。 c.宿主残留检测:将酶液中残留的核酸经 E.coli 16S rDNA 特异性的 TaqMan qPCR 检测,E.coli 基因组残留低于 10 拷贝。 d.功能检测:能有效扩增多种基因组中的单拷贝基因。 |
储存温度 | -20°C储存 |
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运输条件 | 超低温冰袋运输 |