化学法热启动DNA 聚合酶

货号: T295115
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级别和纯度: EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。
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为什么选择此级别

EnzymoPure™ 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

产品简介

本品是 94 kDa 的耐热性 DNA 聚合酶, 通过将 Thermus aquaticus DNA Polymerase 的基因经克隆转化到大肠杆菌中进行表达后,分离提取而得到的,与天然 Taq DNA 聚合酶具有相同的功能。具有 5'→ 3' 聚合酶活性和 5'→ 3' 外切酶活性,但无 3'→ 5' 外 切酶活性。PCR 产物的 3' 端带 A,可克隆至 T 载体。Taq-HS DNA polymerase 是基于 Taq DNA polymerase 升级改造的化学法修饰热启动产品,适用于探针法荧光定量 PCR。


产品组成

货号组分规格
T295115A-200μlTaq-HS DNA Polymerase (5 U/μl)200μl
T295115B-5×1ml10×Taq Reaction Buffer5×1ml

使用方法

1. 探针法荧光定量 PCR 反应体系


a. 引物推荐终浓度为 0.2 μM,效果不佳时可以在 0.1~1 μM 进行调 整;引物长度请设定 18~25 bp,GC 含量为 40%~60%。最佳效率 的扩增目标片段一般为 80~200 bp,设计时应尽量避免发夹结构、二 聚体等复杂结构,并尽可能横跨内含子区域。

b. 探针终浓度推荐为 0.25 μM,效果不佳时可以在 0.1~1 μM 进行调 整。

c. 模板添加量不应超过总反应体系的 10%,推荐加样量为 1~2 μl。不同种类DNA模板中含有的靶基因拷贝数目不同,必要时可进行梯度稀释,以确定最佳的DNA 模板添加量。


2. 探针法荧光定量 PCR 反应程序



质量控制

a.核酸内切酶残留检测:将酶液与超螺旋质粒 DNA 在 37 ℃ 温育 4 h,通过 DNA 电泳检测质粒无变化。

b.核酸外切酶残留检测:将酶液与双链 DNA 底物在 37 ℃ 温育 16 h,通过 DNA 电泳检测双链 DNA 底物无变化。

c.宿主残留检测:将酶液中残留的核酸经 E.coli 16S rDNA 特异性的 TaqMan qPCR 检测,E.coli 基因组残留低于 10 拷贝。

d.功能检测:能有效扩增多种基因组中的单拷贝基因。


规格

产品名称
化学法热启动DNA 聚合酶
规格或纯度
EnzymoPure™
分子类型
酶
储存与运输
储存条件
-20°C储存
运输条件
超低温运输

技术文档

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