计算溶液所需的质量、体积或浓度。
BioReagent,用于化学发光 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
避光,-20°C储存。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
本产品是一种检测海洋动物海肾(Renilla reniformis) 萤光素酶的快速灵敏的方法。此系统是除萤火虫(Photinus pyralis)报告基因系统以外的另一选择。本试剂盒使用灵活便捷、检测灵敏度高、测定样品的线性范围宽,性能优于国内外主要同类产品,非常适合于某些微量表达海肾荧光素酶的实验体系。 反应原理如下:

组分表
| S1375702 | Component | 100T | 1000T | Storage |
| S1375702A | 萤光素酶报告基因细胞裂解液 (5×) | 10 mL | 30 mL | -20℃. Store in the dark. |
| S1375702B | 海肾萤光素酶检测缓冲液 | 10 mL | 100 mL | -20℃. Store in the dark. |
| S1375702C | 海肾萤光素酶检测底物 (100×) | 100 μL | 1 mL | -20℃. Store in the dark. |
产品优势
1、本产品发光强度高:本产品的检测灵敏度显著优于国内外同类产品,特别适合海肾萤光素酶表达量低的样品。
2、本产品稳定性强:本产品37℃保存1天,室温保存7天,检测效果下降不超过10%。
海肾萤光素酶报告基因产品对比
阿拉丁的三款海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒的主要特点和差异如下。
如果对发光信号要求非常高,可以立即进行检测,推荐使用Renilla萤光素酶报告基因检测试剂盒(闪光型)(货号S1375702);
如果对发光信号和稳定性都有要求,需要批量或连续操作,推荐使用Renilla萤光素酶报告基因检测试剂盒(标准型)(货号R1375759);
如果对发光信号有一定要求,推荐使用Renilla萤光素酶报告基因检测试剂盒(辉光高亮型)(货号R1375756)。
| 产品货号 | 产品名称 | 发光类型 | 信号强度 | 灵敏度 | 半衰期 | 包装 | 批量样品检测 | 是否可以搭配Firefly作为内参使用 | 是否为一步法可直接用于细胞检测 |
| R1375759 | Renilla萤光素酶报告基因检测试剂盒(标准型) | 辉光型 | 高 | 灵敏 | 1h | 一瓶溶剂 一管底物 | 非常适合 | 是 | 是 |
| S1375702 | Renilla萤光素酶报告基因检测试剂盒(闪光型) | 闪光型 | 非常高 | 非常灵敏 | 3-5min | 一瓶裂解液 一瓶溶剂 一管底物 | 不适合 | 是 | 否 |
| R1375756 | Renilla萤光素酶报告基因检测试剂盒(辉光高亮型) | 辉光型 | 很高 | 很灵敏 | 15-20min | 一瓶裂解液 一瓶溶剂 一管底物 | 非常适合 | 否 | 是 |
使用说明:
一、自备材料
PBS;多道排枪;白色或黑色不透光细胞培养板;化学发光仪或酶标仪。
二、检测前准备
1、海肾萤光素酶检测底物(100×),每次开盖前需进行短暂低速离心。
2、海肾萤光素酶检测工作液配制:根据实际使用量,以100:1的比例将适量的海肾萤光素酶检测缓冲液与海肾萤光素酶检测底物(100×)混匀,室温避光备用。例如,将1mL海肾萤光素酶检测底物加入100mL海肾萤光素酶检测缓冲液并充分混匀,即可制得101mL海肾萤光素酶检测工作液。
注:建议现配现用,剩余的检测反应液当次实验结束后,直接舍弃,不要留存。
三、操作方法
1、裂解细胞
(1) 贴壁细胞:吸去细胞培养基,用PBS缓慢轻柔地洗涤一次,洗去残留的培养基,然后将液体全部吸弃。
悬浮细胞:离心去上清后,用PBS清洗细胞一次,再次离心收集细胞沉淀。
(2) 配制1×细胞裂解工作液。
每次使用前以 1:4 比例将萤光素酶报告基因细胞裂解液(5×)与 ddH2O 充分混合(例如将1mL萤光素酶报告基因细胞裂解液(5×)加入4mLddH2O充分混合),置于冰上备用。
(3) 按照下表推荐加入适量的1×细胞裂解工作液(萤光素酶报告基因细胞裂解液 (通用型),货号F900604),室温下静置或振动摇晃裂解15min,吹打并吸取全部细胞裂解产物至1.5mL离心管中,12000g离心5-10min,取上清用于后续检测。
| Cell Culture Plate | 6-well | 12-well | 24-well | 48-well | 96-well |
| 1×Cell Lysis Buffer | 500μL | 200μL | 100μL | 50μL | 20μL |
注:若萤光素酶的表达水平过低,可适当减少细胞裂解液用量以提高蛋白浓度,但需保证裂解液体积可以覆盖细胞孔板底面,否则会影响裂解效果。
2、Renilla Luciferase 反应检测
(1) 小心吸取20μL细胞裂解上清依次加入至检测管或酶标板中,再加入100μL平衡至室温的含有底物的海肾萤光素酶检测工作液。
(2) 立即放于化学发光仪或多功能酶标仪中检测Renilla Luciferase报告基因活性。
注意事项:
1、检测仪器选择:能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测,但是针对相同的样品,不同检测器本底信号值和测量值均可能不同;且对于同一样本检测,不同仪器的数值不可横向比较。为防止孔间干 扰,推荐使用不透明白色或黑色细胞培养板。
2、由于发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响,所以应确保同组内不同样本检测条件一致。
3、酶促反应对温度较为敏感,加样检测前务必将检测试剂以及细胞培养板平衡至室温。
4、如需同时检测多个细胞培养板,请尽量确保每个细胞板加入检测溶液后孵育时间一致,再进行数据读取,以此获得最佳的检测结果。 5、海肾萤光素酶检测底物(100×)配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发,有时会在初次使用时发现体积明显小于包装规格的情况,此时用无水乙醇把体积补足至包装规格,混匀后即可使用。
6、海肾萤光素酶催化的生物发光的最强波长为480nm。
通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA,每批产品都进行了严格的验证,您可放心使用!
| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | S1375702 |