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细胞凋亡阳性对照试剂盒
有货
为什么选择此级别
BioReagent,比色法,适用于分析 级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
-20°C储存。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
细胞凋亡阳性对照试剂盒( A1524530) 包含三种通过不同分子机制诱导细胞凋亡的试剂：放线菌素D (Actinomycin D)、喜树碱 (Camptothecin) 和星形孢菌素 (Staurosporine)。三种试剂互为补充，可诱导多种常见细胞系（如HeLa、HEK293、CHO、COS、Jurkat等）发生凋亡，适用于细胞凋亡研究的阳性对照建立、药物筛选及机制探索等实验场景。
由于细胞凋亡的诱导具有细胞特异性，不同细胞系对同一诱导剂的敏感性可能存在显著差异，本试剂盒提供三种作用机制各异的诱导剂，可有效提高对多种细胞系的适用性
- 放线菌素D (Actinomycin D)：经典抗肿瘤抗生素，是RNA合成的DNA依赖性抑制剂。通过嵌入DNA双链抑制转录，可通过某些特异性刺激（如TRAIL和Fas/CD95）促进凋亡的诱导。
- 喜树碱 (Camptothecin)：强效抗肿瘤剂，是DNA拓扑异构酶I的特异性抑制剂。该药物激活p53，导致TRAIL-R2 (DR5)和Bak的表达上调。喜树碱诱导的凋亡可通过TNF等细胞因子进一步增强。
- 星形孢菌素 (Staurosporine)：广谱蛋白激酶抑制剂，是一种强效且快速的凋亡诱导剂。1 μM浓度处理Jurkat细胞2-3小时即可诱导DNA断裂和凋亡。
各组分应用场景与使用方法
1. 放线菌素D (Actinomycin D)
核心机制：抗肿瘤抗生素，通过插入DNA双链抑制RNA合成（转录抑制剂）。
典型应用场景：
mRNA稳定性分析（转录阻滞实验）：加入放线菌素D终止新RNA合成后，检测特定mRNA随时间衰减情况，计算其半衰期。
转录调控研究：研究特定基因表达是否依赖于持续转录活性。
细胞凋亡模型建立：作为转录依赖性凋亡的诱导剂。
使用方法：
按1:1000稀释至培养基中（如1 μL储存液加入1 mL培养基），初始工作浓度为10 μM。
处理时间通常为6-24小时，具体需根据细胞类型优化。
参考浓度：文献报道放线菌素D诱导Vero细胞凋亡的浓度为0.25-4.0 mg/L，处理12-60小时。
2. 喜树碱 (Camptothecin)
核心机制：DNA拓扑异构酶I抑制剂，通过抑制Topo I活性导致DNA损伤，激活p53并上调TRAIL-R2（DR5）和Bak表达。
典型应用场景：
凋亡实验阳性对照：作为诱导细胞凋亡的通用方法，为各类细胞死亡检测实验（如Annexin V染色、TUNEL染色、Caspase活性检测等）提供可靠的阳性对照。
DNA损伤与修复研究：作为特异性Topo I抑制剂，用于研究DNA损伤响应及修复机制。
细胞周期与凋亡研究：喜树碱主要作用于S期细胞，常用于研究细胞周期检查点激活和凋亡通路。
抗癌药物机制研究：喜树碱及其衍生物（伊立替康、拓扑替康）是临床抗癌药物，用于抗癌机制或药物联用研究。
使用方法：
按1:1000稀释至培养基中，初始工作浓度为2 μM。
建议进行时间梯度实验以确定最佳处理时间，推荐 2-12 小时 孵育（37°C）。
参考浓度：文献报道50 nmol/L喜树碱处理U937细胞24小时即可诱导明显凋亡；100 nmol/L~10 μmol/L处理HeLa细胞24小时可见促凋亡效果。
3. 星形孢菌素（Staurosporine）
核心机制：从链霉菌（Streptomyces staurosporeus）中分离得到的天然产物生物碱，是一种广谱蛋白激酶抑制剂。通过靶向多种激酶（包括PKC、PKA等）上的ATP结合位点，抑制激酶活性，进而诱导细胞凋亡。星形孢菌素在2-3小时内以1 μM浓度即可诱导DNA断裂和凋亡。
典型应用场景：
凋亡实验阳性对照：星形孢菌素是最常用的凋亡阳性诱导剂之一，适用于Annexin V染色、TUNEL染色、Caspase活性检测等多种细胞凋亡检测方法。
蛋白激酶信号通路研究：作为广谱激酶抑制剂，用于研究激酶介导的信号转导通路。
细胞凋亡机制研究：快速诱导凋亡的特性使其成为研究凋亡信号通路的理想工具。
使用方法：
按1:1000稀释至培养基中（如1 μL储存液加入1 mL培养基），初始工作浓度为5 μM。
对于敏感细胞系（如Jurkat、HL-60），常用起始浓度为1 μM，孵育3-6小时即可有效诱导凋亡。
建议进行时间梯度实验以确定最佳处理时间。
参考浓度：文献报道星形孢菌素的常用诱导浓度为500 nM；对Jurkat细胞推荐1 μM处理4小时；对HL-60和Jurkat细胞，1 μM处理4-5小时非常有效；在HT-1080细胞中2 μM可有效诱导凋亡。对于敏感细胞系（如小鼠皮层神经元），浓度低至30-100 nM即可诱导凋亡。
总结：如何选择用哪种诱导剂？
本试剂盒中的三种诱导剂通过不同机制诱导凋亡，分别适用于不同的研究场景。请务必根据您的实验目的选择合适的诱导剂，切勿随意混合或替换使用。
研究转录或mRNA稳定性 → 放线菌素D
研究DNA损伤修复或作为凋亡阳性对照 → 喜树碱
快速诱导凋亡或研究激酶信号通路 → 星形孢菌素
重要提示：三种诱导剂的作用靶点和机制完全不同。如果不清楚实验目的而随意选用，可能无法获得预期的凋亡效果，甚至得出错误结论。若确实需要联合使用多种诱导剂，请务必先进行预实验，优化各组分浓度和处理时间，并设置完善的单药对照组。
产品组分
警告：试剂盒含有高毒性试剂；仅限专业用户；在操作浓缩溶液和稀释溶液时，请佩戴手套和其他防护设备以及遵循良好的实验室规范。 |
使用方法
1、推荐起始浓度：建议使用所提供贮备液的1000倍稀释液作为诱导许多细胞培养系统中凋亡活性的起点（例如，在1 mL培养基中加入1 μL储备液）。最佳剂量可能因不同的细胞和培养条件而异。
2、小体积添加技巧：当需要将抑制剂添加到小于1 mL的体系中时，为避免加样误差，可以先将储备液用新鲜的DMSO进行1:10稀释，然后再用培养基或PBS进行1:100的稀释。
3、剂量优化：最佳诱导剂量会因细胞类型和培养条件的不同而异，建议根据实验体系进行优化。
4、孵育：于37°C、5% CO₂培养箱中孵育4、8、12、16或24小时后观察细胞凋亡情况。通常16或24小时后，在光学显微镜下可以看到明显的细胞形态变化，此时应可检测到非常明显的细胞凋亡。
5、 体内应用：如需在体内诱导细胞凋亡，请自行探索最佳条件。
注意事项
1、对于不同的细胞系，需要摸索细胞凋亡诱导试剂的最佳浓度和诱导时间。
2、本产品仅限于专业人员的科学研究使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
4、试剂为DMSO溶液，使用时请确保充分混匀。
5、建议分装保存，避免反复冻融。
常见问题
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This Apoptosis Inducers Kit (A1524530) contains three reagents that induce apoptosis through distinct molecular mechanisms: Actinomycin D, Camptothecin, and Staurosporine. These three inducers complement each other and can induce apoptosis in a wide range of common cell lines (e.g., HeLa, HEK293, CHO, COS, Jurkat, etc.), making them suitable for establishing positive controls in apoptosis research, drug screening, and mechanistic studies.
As apoptosis induction exhibits cell-type specificity and different cell lines may show varying sensitivities to the same inducer, this kit provides three inducers with distinct mechanisms of action to effectively enhance applicability across diverse cell types.
- Actinomycin D: A classic antitumor antibiotic and a DNA-dependent inhibitor of RNA synthesis. It inhibits transcription by intercalating into DNA and promotes apoptosis induction through specific stimuli such as TRAIL and Fas (CD95).
- Camptothecin: A potent antitumor agent and a specific inhibitor of DNA topoisomerase I. This drug activates p53, leading to upregulation of TRAIL-R2 (DR5) and Bak expression. Camptothecin-induced apoptosis can be further enhanced by cytokines such as TNF.
- Staurosporine: A broad-spectrum protein kinase inhibitor and a potent, rapid apoptosis inducer. Treatment of Jurkat cells at 1 μM for 2-3 hours induces DNA fragmentation and apoptosis.
Application Scenarios and Usage for Each Component
1. Actinomycin D
Mechanism: Antitumor antibiotic that intercalates into DNA and inhibits RNA synthesis (transcription inhibitor).
Typical Applications:
mRNA stability assay (transcriptional arrest): After adding Actinomycin D to block new RNA synthesis, measure the decay of a specific mRNA over time to calculate its half‑life.
Transcriptional regulation studies: Investigate whether gene expression depends on ongoing transcription.
Apoptosis model: Induce transcription‑dependent apoptosis.
Usage:
Dilute 1:1000 into culture medium (e.g., 1 μL stock into 1 mL medium). Initial working concentration = 10 μM.
Treatment time: typically 6-24 hours, but optimize according to cell type.
Reference range in literature: 0.25-4.0 mg/L for Vero cells, 12-60 hours.
2. Camptothecin
Mechanism: DNA topoisomerase I inhibitor. By inhibiting Topo I activity, it causes DNA damage, activates p53, and upregulates TRAIL‑R2 (DR5) and Bak expression.
Typical Applications:
Positive control for apoptosis assays: As a general method for inducing apoptosis, it provides a reliable positive control for various cell death detection assays (e.g., Annexin V staining, TUNEL staining, Caspase activity assays).
DNA damage and repair studies: As a specific Topo I inhibitor, it is used to study DNA damage response and repair mechanisms.
Cell cycle and apoptosis studies: Camptothecin primarily acts on S‑phase cells and is commonly used to investigate cell cycle checkpoint activation and apoptotic pathways.
Anticancer drug mechanism studies: Camptothecin and its derivatives (irinotecan, topotecan) are clinical anticancer agents; useful for studying anticancer mechanisms or drug combination effects.
Usage:
Dilute 1:1000 into culture medium. Initial working concentration = 2 μM.
Treatment time: typically 12-48 hours.
Reference range in literature: 50 nmol/L induces apoptosis in U937 cells at 24 h; 100 nmol/L-10 μmol/L effective in HeLa cells at 24 h.
3. Staurosporine
Mechanism: A natural product alkaloid isolated from Streptomyces staurosporeus and a broad-spectrum protein kinase inhibitor. It targets the ATP-binding sites of multiple kinases (including PKC, PKA, etc.), inhibiting their activity and inducing apoptosis. Staurosporine induces DNA fragmentation and apoptosis within 2-3 hours at 1 μM.
Typical Applications:
Positive control for apoptosis assays: Staurosporine is one of the most commonly used positive inducers of apoptosis, suitable for Annexin V staining, TUNEL staining, Caspase activity assays, and other apoptosis detection methods.
Protein kinase signaling pathway studies: As a broad-spectrum kinase inhibitor, it is used to study kinase-mediated signal transduction pathways.
Apoptosis mechanism studies: Its rapid induction of apoptosis makes it an ideal tool for studying apoptotic signaling pathways.
Usage:
Dilute 1:1000 into culture medium (e.g., 1 μL stock solution into 1 mL medium). Initial working concentration is 5 μM.
For sensitive cell lines (e.g., Jurkat, HL-60), a common starting concentration is 1 μM with 3-6 hours incubation to effectively induce apoptosis.
A time-course experiment is recommended to determine the optimal treatment time.
Reference concentration: Literature reports a common induction concentration of 500 nM; for Jurkat cells, 1 μM for 4 hours is recommended; 1 μM for 4-5 hours is very effective in HL-60 and Jurkat cells; 2 μM effectively induces apoptosis in HT-1080 cells. For sensitive cell lines (e.g., murine cortical neurons), concentrations as low as 30-100 nM can induce apoptosis.
Summary: How to Choose Which Inducer to Use?
The three inducers in this kit induce apoptosis through distinct mechanisms and are suitable for different research scenarios. Please select the appropriate inducer according to your experimental objectives – do not mix or substitute them arbitrarily.
Transcription or mRNA stability studies → Actinomycin D
DNA damage and repair studies, or as a positive control for apoptosis → Camptothecin
- Rapid apoptosis induction / kinase signaling studies → Staurosporine
Important Note: These three inducers have completely different targets and mechanisms. Using an incorrect inducer without a clear purpose may fail to achieve the expected apoptotic effect or may lead to misleading results. If combination treatment with multiple inducers is required, please perform pilot experiments to optimize concentrations and treatment times, and include appropriate single-agent controls.
Components
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Usage Protocol
1. Recommended Starting Concentration: A 1000-fold dilution of the provided stock solutions is recommended as a starting point for inducing apoptotic activity in many cell culture systems (e.g., add 1 μL to 1 mL of medium). Optimal dosages may vary depending on cell type and culture conditions.
2. Small Volume Addition Tip: For additions to volumes less than 1 mL, dilute the stock solution 1:10 in fresh DMSO, then further dilute 1:100 in medium or PBS to facilitate accurate addition.
3. Dose Optimization: The optimal inducing dose varies by cell type and culture conditions; optimization according to the experimental system is recommended.
4. Incubation: Incubate at 37°C in a 5% CO₂ incubator for 4, 8, 12, 16, or 24 hours, then observe apoptosis. Typically, obvious morphological changes can be observed under a light microscope after 16 or 24 hours, at which point significant apoptosis should be detectable.
5. In Vivo Applications: For in vivo apoptosis induction, please determine the optimal conditions empirically.
Precautions
1. Optimal concentration and induction time should be determined empirically for each cell line.
2. For research use only. Not for clinical diagnosis or treatment, not for food or drug use, and not for storage in ordinary residences.
3. For your safety and health, please wear lab coats and disposable gloves during operation.
4. Reagents are supplied in DMSO. Ensure thorough mixing before use.
5. Aliquot to avoid repeated freeze-thaw cycles.
Troubleshooting
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规格
别名
细胞凋亡诱导剂套装
英文别名
Apoptosis Inducers Kit | 3 Apotosis Inducers
规格或纯度
BioReagent, 比色法, 适用于分析
英文名称
Apoptosis Inducers Kit
应用
喜树碱, 放线菌素D, 星形孢菌素, 细胞凋亡, 细胞凋亡诱导剂
检测仪器
流式细胞仪,荧光显微镜,荧光酶标仪
敏感性
Light-sensitive
储存与运输
储存条件
-20°C储存
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
各组分在相应的储存条件下保质期1年。
组分与储存
| A1524530 | 组件 | 物理外观 | 200 T | 储存 | 单次测试使用量 |
| A1524530A | 放线菌素D (10 mM) | 液体 | 200 μL | -20℃，避光 | 建议1/1000稀释 |
| A1524530B | 喜树碱 (2 mM) | 液体 | 200 μL | -20℃，避光 | 建议1/1000稀释 |
| A1524530C | 星形孢菌素 (5 mM) | 液体 | 200 μL | -20℃，避光 | 建议1/1000稀释 |
技术文档
高级数据
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
输入批号以搜索分析图谱:
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
 ZJ26F0838521 |
分析证书 | A1524530 |
溶液计算器
常见问题
什么是「适用于分析」？
「适用于分析」是一个明确定义的分析纯度级别，适用于定量分析方法。它规定了最低含量百分比、对常见杂质（水分、重金属、灼烧残渣）的受控限值，以及批间一致性。「适用于分析」是几个纯度级别之一——请根据方法的灵敏度和监管要求进行选择。
什么是「BioReagent」？
「BioReagent」表示该产品经过加工和检测，适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性，以及在相关情况下的生物活性验证。
本产品应如何储存？
请于?20 °C条件下保存。需冷冻保存以维持规定的有效期。
本产品如何运输？
本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。
如何获取批次专用COA？
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