谷草转氨酶 (AST/GOT) 活性检测试剂盒 (二硝基苯肼, 微量法)

货号: A1524829
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级别和纯度: BioReagent ? 生物试剂级(BioReagent)—— 经测试适用于生命科学和分子生物学。适用于需要生物相容性的细胞培养、检测和生化工作。 适用于分析 ? 适用于分析 —— 纯度满足一般分析程序。作为常规方法中可靠的分析试剂使用。 比色法 ? 比色级 —— 适用于显色定量检测的纯度。当试剂纯度影响显色强度和准确度时使用。 标曲法 ?
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50T
A1524829-50T
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为什么选择此级别

BioReagent,标曲法,比色法,适用于分析 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

2-8°C储存。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

花青素是广泛存在于自然界的植物水溶性天然色素,天然状态下极少游离,大多与各类单糖结合生成糖苷,即为花色苷。花色苷常见于陆生植物的根、茎、叶、花和果实,具备抗氧化活性,可清除自由基。

本试剂盒检测原理如下:花色苷的分子结构与颜色随 pH 发生改变,而样品中干扰杂质的光谱特征不随 pH 变化。pH 1.0 条件下,花色苷主要以红色的黄烊盐阳离子形式存在;pH 4.5 条件下,花色苷转变为无色的甲醇假碱。选取 pH 1.0 与 pH 4.5 这一组对花色苷吸光度差异大、且结构相对稳定的 pH 条件,测定校正浊度后的吸光度差值,该差值与花色苷含量成正比,即可计算样品中花色苷的总量(以矢车菊素-3-葡萄糖苷计)。

产品组分

A152489

组分名称

物理外观

50T

储存

单次测试使用量

A1524829A

提取液

液体

50 mL

2-8℃

按需

A1524829B

试剂一

液体

50 mL

2-8℃

900 μL

A1524829C

试剂二

液体

50 mL

2-8℃

900 μL

使用方法

1. 样本处理

称取约0.1g 样品(可根据样本类型适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献),加入1mL 提取液,充分研磨匀浆后转移至EP管中,提取液定容至1mL,盖紧后60℃ 浸提30min,期间可振荡数次,室温12000rpm, 离心10 min, 取上清液待测。

2. 样本测定

按照下表进行样本测定。

 

测定管1

测定管2

待测样本(μL)

100

100

试剂一(μL)

900

-

试剂二(μL)

-

900

混匀,静置5min,转移至1mL比色皿中,使用分光光度计分别测定530nm和700nm处OD值,其中测定管1在530nm和700nm处OD值记为A1、A1’,测定管2在530nm和700nm处OD值记为A2、A2’,计算ΔA=(A1-A1’) - (A2-A2’)。

3. 结果计算

(1) 使用96 孔板测定的计算公式如下

花色苷含量(μg/g 质量)=[ΔA×V÷(ε×d)×M×F×106]÷W=33.4×ΔA×F÷W

V:提取液体积,0.001L;

ε:花色苷的摩尔消光系数,26900 L/mol/cm;

d:96 孔板光径,0.5 cm;

M:花色苷的相对分子质量:449.2 g/mol;

F:稀释倍数,此反应体系下为10;

106:单位换算系数,1g=106 μg

W:样本质量:g

(2)使用微量玻璃比色皿测定的计算公式

将上述计算公式中光径d: 0.5 cm 调整为d: 1 cm 进行计算即可。

注意事项

1. 试剂二有轻微刺激性气味,建议在使用过程中做好个人防护。

2. 如果A1大于1,可适当加大稀释倍数,保证总体积1 mL 不变,如50 μL 上清液和950 μL 试剂一(相当于稀释20倍);如果A1小于0.1,可以适当缩小稀释倍数,保证总体积1 mL 不变,如500 μL 上清液和500 μL 试剂一(相当于稀释2倍),使A1保持在0.1-1范围内,可提高检测灵敏度;注意应同样调整上清液和试剂二体积比例,计算时以实际稀释倍数代入计算公式中。

3. 正式检测前,建议选择 2-3 个预期差异较大的样本进行预实验。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Anthocyanidins are water-soluble natural pigments widely distributed in plants. In nature, they rarely exist in free form; most are glycosides conjugated with various monosaccharides, namely anthocyanins. Anthocyanins are commonly found in the roots, stems, leaves, flowers and fruits of terrestrial plants and exhibit antioxidant activity to scavenge free radicals.

The detection principle of this assay kit is described below: the molecular structure and color of anthocyanins change with pH, whereas the spectral characteristics of interfering impurities in samples remain pH-independent. At pH 1.0, anthocyanins predominantly exist as red flavylium cations. At pH 4.5, anthocyanins convert into colorless carbinol pseudobases. A pair of pH conditions (pH 1.0 and pH 4.5) are selected, at which anthocyanins show a large absorbance difference and relatively stable structure. The absorbance difference, corrected for turbidity, is measured. This difference is proportional to anthocyanin concentration, enabling quantification of total anthocyanin content in samples (expressed as cyanidin-3-glucoside equivalents).

Kit Contents

A1524829

Component Name

Appearance

50T

Storage

Quantity Per Test

A1524829A

Extraction Solution

Liquid

50 mL

2-8℃

As needed

A1524829B

Reagent 1

Liquid

50 mL

2-8℃

900 μL

A1524829C

Reagent 2

Liquid

50 mL

2-8℃

900 μL

Instructions for Use

1. Sample Preparation  

Weigh approximately 0.1 g of sample (sample mass may be adjusted according to sample type; refer to literature for appropriate ratios). Add 1 mL of Extraction Solution, grind and homogenize thoroughly, then transfer the mixture to an Eppendorf tube. Make up to 1 mL with Extraction Solution, cap tightly, and incubate at 60 °C for 30 min with occasional shaking. Centrifuge at 12000 rpm for 10 min at room temperature and retain the supernatant for assay.

2. Sample Measurement

Perform sample measurement according to the table below.

Reagent name  (μL)

Assay Tube 1

Assay Tube 2

Sample

20

20

Reagent 1

180

—

Reagent 2

—

180

3. Calculation of Results

(1) Formula for 96-well microplate assay

Total anthocyanin content (μg/g sample) = [ΔA × V ÷ (ε × d) × M × F × 10⁶] ÷ W = 33.4 × ΔA × F ÷ W

V: Volume of extraction solution, 0.001 L

ε: Molar extinction coefficient of anthocyanin, 26900 L/mol/cm

d: Optical path length of 96-well plate, 0.5 cm

M: Molecular weight of anthocyanin, 449.2 g/mol

F: Dilution factor; equals 10 in this reaction system

10⁶: Unit conversion factor (1 g = 10⁶ μg)

W: Weight of sample, g

(2) Formula for micro glass cuvette assay

Use the same formula above, with optical path length d changed from 0.5 cm to 1 cm.

 

Precautions

1. Reagent 2 has a slight pungent odor. Wear appropriate personal protective equipment during operation.

2. If A1 > 1, increase the dilution factor while maintaining a total volume of 200 μL. For example, mix 10 μL supernatant with 190 μL Reagent 1 (20-fold dilution). If A1 < 0.1, reduce the dilution factor while keeping the total volume at 200 μL. For example, mix 100 μL supernatant with 100 μL Reagent 1 (2-fold dilution). Keep A1 in the range of 0.1–1 to optimize detection sensitivity. Adjust the volume ratio of supernatant and Reagent 2 accordingly, and substitute the actual dilution factor into the calculation formula.

3. Before the formal test, it is recommended to select 2-3 samples with significant expected differences for a preliminary experiment.

4. For your safety and health, please wear a lab coat and disposable gloves during the operation.

规格

规格或纯度
BioReagent, 适用于分析, 标曲法, 比色法
英文名称
Anthocyanin (Total Anthocyanins) Content Assay Kit (pH Differential, Colorimetric Method)
应用
细胞代谢
检测范围
分光光度法 0-20 nmol
检测方法
分光光度法
定量&半定量
定量
检测仪器
酶标仪
检测波长
510 nm
敏感性
Light-sensitive
检测时长
50 min
样本体积
5 μL
储存与运输
储存条件
2-8°C储存
运输条件
低温运输
稳定性与储存
各组分在相应的储存条件下保质期1年。

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

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✅ 分析证书 (COA)

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📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

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🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

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高级数据

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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