计算溶液所需的质量、体积或浓度。
BioReagent,生物染色剂,用于显微镜 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
2-8°C储存,避光。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 9 篇同行评审文献引用。
吖啶橙(Acridine Orange)属于三环杂芳香燃料,简称 AO,属于异染性荧光染料。该染料能透过细胞膜,使核 DNA 和 RNA 染色。因此 AO 常用于细胞内 DNA 和 RNA 进行检测。AO 与核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO 嵌入核酸双链的碱基对之间,这种结合方式主要为 AO 与 DNA 的结合,其荧光发射峰为 530nm,激发后呈绿色荧光;2、静电吸引,带正电荷的 AO 与单链核酸的磷酸根 (带负电荷) 产生静电间的吸引结合,这种结合方式主要为 AO 与 RNA 的结合,其荧光发射峰为 640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。因此,吖啶橙嵌合到双链 DNA 分子中显绿色,与 DNA 单链或RNA 结合时发桔黄色或橙红色荧光。
AO 染色液(1mg/mL)为储存液,使用时应稀释到合适浓度后使用。AO 染色常与 EB 染色合用双染,因 EB 只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
使用说明:
1、收集细胞(采用流式细胞仪检测时,应先固定细胞),用 PBS 清洗细胞 1 次,计数并调节细胞浓度至 10⁶/mL。
2、取适量的细胞悬液,加入 AO 染色液(1mg/mL),使 AO 终浓度为 8.5~17μg/mL,轻轻混匀。
3、室温避光染色 15~20min,滴加于载玻片上并加盖玻片或上流式细胞仪分析。
4、荧光显微镜下观察(激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm),计数并拍照。
注意事项:
1、AO 染色液 (1mg/mL) 不含破膜剂,较少单独使用。
2、AO 染色常与 EB 染色合用,可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
3、如有低温离心机进行离心效果更佳。
4、操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套。
染色结果:
| 正常细胞 | 细胞被均匀染成黄绿色荧光 |
| 凋亡细胞 | 染色质浓缩,细胞核碎裂成点状,被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒 |
Acridine Orange (AO), a tricyclic heteroaromatic dye, is a metachromatic fluorescent dye. Capable of penetrating cell membranes, it stains nuclear DNA and RNA, and is therefore widely used for intracellular DNA and RNA detection.
AO binds to nucleic acids in two major modes:
1. Intercalative binding: AO intercalates between base pairs of double‑stranded nucleic acids. This mode mainly occurs with DNA, giving green fluorescence with an emission peak at 530 nm upon excitation.
2. Electrostatic attraction: Positively‑charged AO binds electrostatically to negatively‑charged phosphate groups of single‑stranded nucleic acids. This mode predominates for RNA binding, producing red fluorescence with an emission peak at 640 nm; weak binding yields orange‑yellow or orange‑red fluorescence.
Accordingly, AO exhibits green fluorescence when intercalated into double‑stranded DNA, and orange‑yellow or orange‑red fluorescence when bound to single‑stranded DNA or RNA.
Acridine Orange Staining Solution (1 mg/mL) is a stock solution and shall be diluted to an appropriate working concentration before use. AO is frequently applied in double staining together with EB. Since EB only labels dead cells with orange‑yellow fluorescence, normal cells, apoptotic cells and necrotic cells can be distinguished.
Instructions for Use
1. Harvest cells. Fix cells in advance for flow cytometry analysis. Wash cells once with PBS, count and adjust cell density to 10⁶ cells/mL.
2. Add adequate AO staining solution (1 mg/mL) into cell suspension to reach a final AO concentration of 8.5‑17 μg/mL, mix gently.
3. Incubate for 15‑20 min at room temperature in the dark. Mount aliquots onto glass slides with coverslips or proceed to flow cytometric analysis.
4. Observe under a fluorescence microscope (excitation filter: 488 nm; barrier filter: 515 nm), perform counting and image acquisition.
Precautions
1. AO staining solution (1 mg/mL) contains no permeabilizing agent and is seldom used alone.
2. AO‑EB double staining enables differentiation of normal, apoptotic and necrotic cells.
3. Better results can be obtained using a refrigerated centrifuge.
4. Minimize reagent exposure to intense light during manipulation.
5. Wear laboratory coat and disposable gloves for personal safety.
Staining Results
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分类树(Taxonomy Tree)
| 界(kingdom) | 有机化合物 |
|---|---|
| 超类(Superclass) | 有机杂环化合物 |
| 类(Class) | 喹啉及其衍生物 |
| 亚类(Subclass) | 苯并喹啉 |
| 中间层级节点(Intermediate Tree Nodes) | 暂无 |
| 直接上位类(Direct Parent) | 吖啶类 |
| 其他上位类(Alternative Parents) | 氨基喹啉及其衍生物 二烷基芳胺 吡啶及其衍生物 苯类化合物 杂芳族化合物 氮杂环化合物 有机光子化合物 碳氢化合物衍生物 |
| 分子骨架(Molecular Framework) | 芳香族杂多环化合物 |
| 取代基(Substituents) | 萘醌 - 氨基酸 - 氨基吡啶 - 芳香族杂多环化合物 - 氮杂环 - 苯基化合物 - 二烷基芳基胺 - 杂芳香族化合物 - 烃衍生物 - 有机硝基化合物 - 有机氮化合物 - 有机氮化合物 - 吡啶 - 三级脂肪族/芳香族胺 - 三芳基胺 |
| 描述(Description) | 该化合物属于有机化合物中的萘啶类。这类化合物含有萘啶结构单元——一种由两个苯环经吡啶环连接而成的线性三环杂环。 |
| 外部描述符(External Descriptors) | aminoacridines - tertiary amino compound - aromatic amine |
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | A774792 |
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