β-磷酸葡萄糖变位酶 (βPGM-EP)

CAS: 68651-99-0 货号: B1374176 EC号: 963-430-6
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级别和纯度: 生物活性 ? 生物活性级(Bioactive)—— 经验证在功能检测中保持生物活性。当分子须具有功能活性而不仅是纯度时使用。 重组 ? 重组(Recombinant)—— 通过重组表达生产,序列确定、批次稳定。适用于来源明确、无动物源的可重现蛋白。 ActiBioPure™ ? ActiBioPure™ —— 阿拉丁面向生物活性和重组产品的优质系列。当同时需要高纯度和保持生物活性时使用。 EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。 expressed in E.coli,≥30 U/mg powder
Accession #
O06995
表达系统
E. coli
生物活性
≥30 U/mg powder
★
规格
库存
价格
数量
250U
B1374176-250U
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1KU
B1374176-1KU
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为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,生物活性,重组 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述


The enzyme is useful for the determination of α-amylase and inorganic phosphate in clinical analysis.
PROPERTIES
Molecular weight: ca. 34 kDa (gel filtration)

Structure: monomer of ca. 25 kDa (SDS-PAGE)

Michaelis constant: 2.3×10^−4 M (β-d-glucose-1-phosphate)

pH Optimum: ca. 7.0                                                                                    (Fig. 1)

pH Stability: 5.0–9.5                                                                                     (Fig. 2)

Optimum temperature: 40°C                                                                        (Fig. 3)

Thermal stability: below 45°C                                                                       (Fig. 4)

Stability (liquid form): stable at 37°C for at least one week                           (Fig. 5)

Stability (powder form): stable at 30°C for at lest one month                       (Fig. 6)

Activators: Mg2+, Mn2+, Co2+, Ni2+

Inhibitors: Hg2+, Zn2+, Cu2+, Cd2+
STABILIZERS: lactose, EDTA
ASSAY PROCEDURE  

Principle

The appearance of NADPH is measured spectrophotometrically at 340 nm.
Reagents
A. HEPES–NaOH buffer, 0.3 M; pH 7.0, containing 40 mM KCl, 4 mM MgCl2 and 1.6% (w/v) Triton X-100: dissolve 7.15 g of HEPES, 298 mg of KCl, 81.3 mg of MgCl2·6H2O and 1.6 g of Triton X-100 in 75 ml of distilled water, adjust to pH 7.0 with 4 N NaOH and dilute with distilled water to 100 ml.

B. d-Glucose-1,6-bisphosphate (G-1,6-P2) solution, 3.0 mM : 60.7 mg of G-1,6-P2 cyclohexylammonium·4H2O/ 25 ml of distilled water.

C. NADP+ solution, 12 mM: 230 mg of NADP+·Na/25 ml of distilled water.

D. β-d-Glucose-1-phosphate (β-G-1-P) solution, 22 mM:167 mg of β-G-1-P disodium salt/25 ml of distilled water.

E. Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH) solution: 1750 U/ml.

F. Enzyme dilution buffer: mix 10 mM KH2PO4 solution and 10 mM K2HPO4 solution to make a pH 7.0 solution.

Sample: dissolve the lyophilized enzyme to a volume activity of 1.0–3.0 U/ml with ice-cold enzyme dilution buffer (Reagent F) immediately before measurement. 
Procedure

1. Pipette the following reagents into a cuvette (light path: 1 cm).
1.5 ml    HEPES–NaOH buffer    (Reagent A)

0.3 ml    G-1,6-P2 solution          (Reagent B)

0.3 ml    NADP+ solution            (Reagent C)

0.3 ml    β-G-1-P solution           (Reagent D) 

0.02 ml  G6PDH solution            (Reagent E)

0.6 ml    Distilled water

2. Equilibrate at 37°C for about 5 min.

3. Add 0.03 ml of sample and mix.

4. Record the increase of absorbance at 340 nm in a spectrophotometer thermostated at 37°C, and calculate the ∆Aper min using the linear portion of the curve (∆AS).

The blank solution is prepared by adding enzyme dilution buffer (Reagent F) instead of sample (∆A0).

Calculation

Activity can be calculated by using the following formula:


6.2: Millimolar extinction coefficient of NADPH at 340 nm (cm2/μmol)

df: Dilution factor

C: Content of β-phosphoglucomutase preparation in sample (mg/ml)
APPLICATIONS
The enzyme is useful for the determination of α-amylase and inorganic phosphate in clinical analysis.



EXPERIMENTAL DATA

  


规格

产品名称
β-磷酸葡萄糖变位酶 (βPGM-EP)
别名
β-磷酸葡糖变位酶
英文别名
Beta-Phosphoglucomutase | β-D-Glucose 1 | 6-phosphomutase | yvdM
规格或纯度
生物活性, 重组, ActiBioPure™, EnzymoPure™, expressed in E.coli,≥30 U/mg powder
生化机理
Catalyzes the interconversion of D-glucose 1-phosphate (G1P) and D-glucose 6-phosphate (G6P), forming beta-D-glucose 1,6-(bis)phosphate (beta-G16P) as an intermediate.
生物活性
≥30 U/mg powder
表达系统
E. coli
来源
重组表达
预测分子量
34 kDa
CAS编号和信息
68651-99-0
酶学委员会编号
EC 5.4.2.6
分子类型
酶
产品线
生物产品
储存与运输
物理形态
冻干(Lyophilized)
浓度
expressed in E.coli,≥30 U/mg powder
复溶
Reconstitute in a mixed solution (pH 7.0) of 10mM KH2PO4 and 10mM K2HPO4 to a volume activity of 1.0–3.0 U/mL.
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
长期储存-20℃(2年);避免反复冻融。
单位定义
One unit (U) is defined as the amount of enzyme which converts 1 μmol of β-d-glucose-1-phosphate to β-d-glucose-6-phosphate per min at 37°C and pH 7.0 under the conditions described below.

技术文档

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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ25F0926775 分析证书 B1374176
ZJ25F0926774 分析证书 B1374176
技术文档和文章
溶液计算器

常见问题

本产品应如何储存?
请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。
本产品如何运输?
本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
本产品的 CAS 号、分子式和分子量是多少?
本产品的 CAS 号为 68651-99-0。
什么是「生物活性」?
「生物活性」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
什么是「重组」?
「重组」是一个明确定义的分析纯度级别,适用于需要特定验证属性的工作流程。它规定了最低含量百分比、对常见杂质(水分、重金属、灼烧残渣)的受控限值,以及批间一致性。「重组」是几个纯度级别之一——请根据方法的灵敏度和监管要求进行选择。
如何获取批次专用COA?
每个订单都会随附分析证书(COA),您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA,请联系您的客户代表,或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。