计算溶液所需的质量、体积或浓度。
为什么选择此级别
，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
胆固醇脱氢酶是一种利用重组细菌生产的胆固醇脱氢酶制剂。
催化反应
胆固醇 + 辅酶 Ⅰ（NAD）⇌胆甾 - 4 - 烯 - 3 - 酮 + 还原型辅酶 Ⅰ（NADH） + 氢离子（H⁺）
规格与制备
活性：胆固醇脱氢酶活性≥18 U/mg
污染物：还原型辅酶 Ⅰ 氧化酶活性 ≤5×10⁻²%；
葡萄糖脱氢酶活性 ≤5×10⁻²%
外观：白色至棕色冻干粉末
添加剂：未添加
特性
分子量：37,000（SDS - PAGE）
等电点：4.5
米氏常数（Km）：1.5×10⁻⁴M（胆固醇）；2.3×10⁻⁴M（辅酶 Ⅰ，NAD⁺ ）
最适 pH：10.0
pH 稳定性：pH 7.0（37℃，15 分钟 ）
最适温度：30℃
热稳定性：最高 35℃（pH 7.0，15 分钟 ）
激活剂：曲拉通 X - 100（Triton X - 100 ）
抑制剂：银离子（Ag⁺ ）
应用：在临床诊断中，通过与胆固醇酯酶偶联，用于血清中胆固醇的酶法测定
注意事项：产品可能含有 0.006 - 0.6% 的乙氧基化 4 - (1,1,3,3 - 四甲基丁基) 苯基
安全操作
请勿吸入。
若直接接触皮肤或眼睛，立即用大量水冲洗。
更多详情请参考安全技术说明书（SDS）。
底物特异性
|
各类化学物质的影响
|
胆固醇脱氢酶活性测定方法
原理
通过分光光度法在 340 nm 处测定还原型辅酶 Ⅰ（NADH）的生成量。
单位定义
在以下条件下，每分钟产生 1 微摩尔还原型辅酶 Ⅰ（NADH）所需的酶量定义为 1 个单位。
试剂
A：50 mg/ml 曲拉通 X - 100 溶液（溶于去离子水 ）
B：20 mg/ml 曲拉通 X - 100 溶液（溶于去离子水 ）
C：0.3M 三羟甲基氨基甲烷 - 盐酸缓冲液（Tris - HCl buffer，pH 8.5 ）
D：0.02M 磷酸盐缓冲液（KH₂PO₄ - Na₂HPO₄，pH 7.0 ）
E：辅酶 Ⅰ（NAD）溶液：称取 75 mg β - 辅酶 Ⅰ（β - NAD⁺ ），溶于 0.3M 三羟甲基氨基甲烷 - 盐酸缓冲液（C）中，并用 0.3M 三羟甲基氨基甲烷 - 盐酸缓冲液（C）定容至 25 ml。（冷藏条件下可使用 5 天 ）
F：底物溶液：量取 40 ml 20 mg/ml 曲拉通 X - 100 溶液（B）置于 50 ml 烧杯中，75 - 80℃搅拌孵育。称取 50 mg 胆固醇，加入 4 ml 2 - 丙醇，75 - 80℃溶解。将该溶液加入烧杯中的 20 mg/ml 曲拉通 X - 100 溶液（B）中，然后将混合物在 75 - 80℃水浴中保持 30 分钟。用流动的自来水冷却后，用 20 mg/ml 曲拉通 X - 100 溶液（B）定容至 50 ml。（冷藏条件下可使用 10 天 ）
G：稀释液：将 0.02M 磷酸盐缓冲液（D）与 5 ml 50 mg/ml 曲拉通 X - 100 溶液（A）混合，然后用 0.02M 磷酸盐缓冲液（D）定容至 500 ml。
H：酶溶液：称取胆固醇脱氢酶，溶于冷藏的稀释液（G）中。酶溶液应制备成每分钟吸光度变化（ΔOD/minute）在 0.020 ± 0.005 范围内。
操作步骤
分别移取 2.0 ml 底物溶液（F）和 1.0 ml 辅酶 Ⅰ（NAD）溶液（E）至石英比色皿（光径 d = 10 mm）中，在 25 ± 0.5℃下放置 5 分钟。然后移取 0.10 ml 酶溶液（H）至石英比色皿中，立即充分混合。将反应混合物保持在 25 ± 0.5℃。在加入酶溶液（H）后恰好 1 分钟和 3 分钟时，在 340 nm 处测定反应混合物的吸光度（A1 和 A3）。作为空白对照，用稀释液（G）代替酶溶液（H）加入另一个石英比色皿（光径 d = 10 mm）中，并按照上述相同步骤操作（Ab1 和 Ab3）。
计算
2：反应时间
6.22：还原型辅酶 Ⅰ（NADH）的毫摩尔吸光系数
3.1：反应混合物体积
0.1：酶溶液体积
n：酶溶液的稀释倍数
规格
产品名称
胆固醇脱氢酶
英文别名
Cholesterol : NAD+oxidoreductase | CHDH-5
规格或纯度
≥18 U/mg powder
生物活性
≥18 U/mg powder
来源
重组表达
预测分子量
37 kDa
CAS编号和信息
67775-34-2
分子类型
酶
产品线
生物产品
储存与运输
物理形态
冻干(Lyophilized)
浓度
≥18 U/mg powder
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
长期储存-20℃（36个月）；复溶后建议分装，避免反复冻融。
单位定义
One unit is defined as the enzyme quantity which producesoneμmole of NADH per minute under the conditions described below.
技术文档
高级数据
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
 ZJ25F0927137 |
分析证书 | C1456325 |
溶液计算器
常见问题
本产品应如何储存？
请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。
本产品如何运输？
本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。
本产品的 CAS 号、分子式和分子量是多少？
本产品的 CAS 号为 67775-34-2。
如何获取批次专用COA？
每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。
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