计算溶液所需的质量、体积或浓度。
考马斯亮蓝 (Bradford) 检测试剂 (蛋白测定用)
有货
为什么选择此级别
BioReagent,无菌 级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
2-8°C储存。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
本产品是一种即用型、高灵敏度的蛋白质快速染色液，其核心成分为考马斯亮蓝G250。它专为蛋白质（抗体）纯化工艺中的洗脱组分收集步骤而优化设计。通过使溶液中的抗体蛋白瞬间显色，确定蛋白、抗体洗脱的起始点和终点，指导分部收集。快速筛选含有目标蛋白、抗体的收集管，用于后续合并与浓缩。为操作人员提供直观的视觉判断依据，从而精准、高效地确定目标抗体的洗脱窗口，避免宝贵样品的损失。
本产品是一种即用型、高灵敏度的蛋白质快速染色液，其核心成分为考马斯亮蓝G250。它专为蛋白质（抗体）纯化工艺中的洗脱组分收集步骤而优化设计。通过使溶液中的抗体蛋白瞬间显色，确定蛋白、抗体洗脱的起始点和终点，指导分部收集。快速筛选含有目标蛋白、抗体的收集管，用于后续合并与浓缩。为操作人员提供直观的视觉判断依据，从而精准、高效地确定目标抗体的洗脱窗口，避免宝贵样品的损失。
使用方法
具体使用方法可根据不同纯化工具进行使用。
1 样品制备
在使用Protein A/G纯化柱之前，必须通过离心或0.45 μm过滤器过滤来澄清血清或腹水样品。如果杂交瘤培养上清液肉眼观察清澈，则可以直接使用，否则需通过离心或过滤进行澄清。
2 样品纯化
注意：纯化柱设计为上样、洗涤和洗脱操作期间在垂直位置使用。应注意避免将气泡引入纯化柱。气泡会降低分离效率并增加产生足够流速所需的压力。可以通过轻轻敲击去除纯化柱中的气泡。
(1) 纯化柱准备
①将2-8℃保存的纯化柱取出，将柱内用于保存缓冲液倒尽。
②取1×结合缓冲液(Protein A/G结合缓冲液10×稀释，P1492570)倒满纯化柱(约15个柱体积)用于平衡，以大约1 mL/min的流速使洗脱缓冲液通过纯化柱来洗涤纯化柱。
(2) 上样
用样品填充10 mL注射器。以大约0.5 mL/min的流速使样品-结合缓冲液混合物通过 Protein A/G纯化柱来上样。
(3) 平衡
取1×结合缓冲液(Protein A/G结合缓冲液10×稀释，P1492570)倒满纯化柱(约15个柱体积)用于平衡，以大约1 mL/min的流速用于平衡。
(4) 洗脱
①取1×洗脱缓冲液(Protein A/G 琼脂糖填料蛋白洗脱缓冲液(5×)，pH 2.8稀释， P1492569)，每个纯化柱加3mL(3个柱体积)。通过重力收集洗脱液。事先准备数个1.5mL离心管，每个离心管内加入10μL 中和缓冲液(N485258)进行洗脱中和。
②收集洗脱液时，每个1.5mL离心管内滴8滴洗脱液，以此类推。混匀，用本品考马斯亮蓝(Bradford)检测试剂(蛋白测定用)观察蛋白浓度变化，考马斯亮蓝检测试剂与蛋白抗体结合后，构象发生改变，变成深蓝色，且蛋白浓度越高，颜色越深。
(5) 平衡
取1×结合缓冲液(Protein A/G结合缓冲液10×稀释，P1492570)倒满洗脱后的纯化柱(约15个柱体积)以大约1 mL/min的流速用于平衡。
(6) 纯化柱储存
①抗体洗脱完成的纯化柱，继续加入10mL 1×洗脱液(Protein A/G琼脂糖填料蛋白洗脱缓冲液(5×)，pH 2.8稀释，P1492569)进行洗涤，以免抗体残留。
②加入 20 mL的1×结合缓冲液洗涤，平衡填料。
③加入15mL 20%乙醇洗涤后，加入5mL 20%乙醇冲液，将纯化柱保存在2-8℃保存 。
(7) 再生
①加入20mL Protein A/G再生缓冲液(P1492573)洗涤。
②加入30mL ddH2O清洗柱子，将再生缓冲液彻底冲洗掉。
③加入20mL 结合缓冲液洗涤，平衡填料。
④加入15mL 20%乙醇洗涤后，加入5mL 20%乙醇保存，将纯化柱保存在2-8℃保存。
This product is a ready-to-use, highly sensitive, rapid protein staining solution with Coomassie Brilliant Blue G-250 as its core component. Specifically optimized for the elution fraction collection step in protein (antibody) purification processes, it enables instant color development to identify the start and end points of protein/antibody elution, thereby guiding fraction collection. This allows for rapid screening of collection tubes containing target proteins/antibodies for subsequent pooling and concentration. The solution provides operators with a clear visual reference to accurately and efficiently determine the target antibody's elution window, preventing the loss of valuable samples.
Instructions for Use
The specific method of use may vary depending on the purification tool employed.
1 Sample Preparation
Before using the Protein A/G purification column, serum or ascites samples must be clarified by centrifugation or filtration through a 0.45 μm filter. If hybridoma culture supernatant appears clear to the naked eye, it can be used directly; otherwise, it should be clarified by centrifugation or filtration.
2 Sample Purification
Note: The purification column is designed to be used in a vertical position during loading, washing, and elution steps. Care should be taken to avoid introducing air bubbles into the column, as they can reduce separation efficiency and increase the pressure required to achieve adequate flow rates. Bubbles can be removed by gently tapping the column.
(1) Column Preparation
①Remove the column stored at 2-8℃ and drain the 20% Ethanol from the column.
②Fill the column with 1× Binding Buffer (diluted from Protein A/G Binding Buffer 10×, P1492570) to equilibrate it (approximately 15 column volumes). Wash the column by allowing the buffer to flow through at a rate of approximately 1 mL/min.
(2) Loading
Fill a 10 mL syringe with the sample. Load the sample onto the Protein A/G column by allowing the sample-binding buffer mixture to flow through the column at a rate of approximately 0.5 mL/min.
(3) Equilibration
Fill the column with 1× Binding Buffer (diluted from Protein A/G Binding Buffer 10×, P1492570) for equilibration (approximately 15 column volumes). Equilibrate at a flow rate of approximately 1 mL/min.
(4) Elution
①Add 3 mL (3 column volumes) of 1× Elution Buffer (diluted from Elution Buffer (pH 2.8) for Protein A/G Agarose Resin 5×, P1492569) per column. Collect the eluate by gravity. Prepare several 1.5 mL centrifuge tubes in advance, each containing 10 μL of Neutralizing Buffer (N485258) for neutralizing the eluate.
②When collecting the eluate, add 8 drops of eluate into each 1.5 mL centrifuge tube, and repeat accordingly for the rest. Mix thoroughly, then use Coomassie (Bradford) Staining Solution (for Protein Determination) to monitor changes in protein concentration. Upon binding to proteins, the Coomassie Brilliant Blue reagent undergoes a conformational change and turns dark blue-the higher the protein concentration, the deeper the color.
(5) Equilibration
Fill the column post-elution with 1× Binding Buffer (diluted from Protein A/G Binding Buffer 10×, P1492570) for equili-bration (approximately 15 column volumes). Equilibrate at a flow rate of approximately 1 mL/min.
(6) Column Storage
①After antibody elution is complete, continue by washing the column with 10 mL of Elution Buffer (diluted from Elution Buffer (pH 2.8) for Protein A/G Agarose Resin 5×,P1492569) to avoid antibody residue.
②Wash the column with 20 mL of Binding Buffer to wash and equilibrate the resin.
③Wash the column with 15 mL of 20% Ethanol, then add 5 mL oμlf 20% Ethanol and store the column at 2-8℃.
(7) Regeneration
①Wash the column with 20 mL of Protein A/G Agarose Regeneration Buffer (P1492573).
②Rinse the column with 30 mL of ddH₂O to thoroughly remove the regeneration buffer.
③Wash the column with 20 mL of Binding Buffer to wash and equilibrate the resin.
④Wash the column with 15 mL of 20% Ethanol, then add 5 mL of 20% Ethanol and store the column at 2-8℃.
规格
规格或纯度
BioReagent, 无菌
稳定性与储存
Store at 2-8°C for 12 months. Do not freeze.
英文名称
Coomassie (Bradford) Staining Solution (for Protein Determination)
储存条件
2-8°C储存
运输条件
低温运输
产品线
生物产品
名称和识别符
分子类型
生物试剂/缓冲液
技术文档
高级数据
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
 ZJ26F0434515 |
分析证书 | C1492574 |
技术文档和文章
溶液计算器
常见问题
什么是「无菌」？
「无菌」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。
什么是「BioReagent」？
「BioReagent」表示该产品经过加工和检测，适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性，以及在相关情况下的生物活性验证。
本产品应如何储存？
请于2–8 °C条件下保存。需冷藏保存以维持规定的有效期。
本产品如何运输？
本产品采用湿冰冷藏运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。
如何获取批次专用COA？
每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。
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