计算溶液所需的质量、体积或浓度。
细胞刺激混合物（加蛋白转运抑制剂）(500×)
有货
为什么选择此级别
BioReagent,无菌过滤 级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
避光,-20°C储存。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
储存缓冲液：Ethanol
产品介绍
本产品是一款功能完整的“刺激-阻断”一步法混合试剂，为500×浓缩液。除包含经典刺激剂PMA（佛波酯）和Ionomycin（离子霉素 ）外，特别添加了高效蛋白转运抑制剂布雷非德菌素A和莫能霉素钠。本品能在强烈激活T细胞、NK细胞等免疫细胞并诱导细胞因子合成的同时，有效阻断高尔基体介导的蛋白转运，使细胞因子（如IFN-γ、TNF-α、IL-2等）在细胞内高效累积，是专为流式细胞术胞内细胞因子染色（ICS） 而优化的即用型解决方案。
主要组分：
- 无水乙醇
- PMA 25μg/mL， 离子霉素 500μg/mL，brefeldin A 1.5mg/mL，莫能霉素钠 0.7mg/mL
主要应用
- 流式细胞术胞内细胞因子染色（ICS） 的标准化刺激与阻断步骤。
- 单细胞水平检测免疫细胞（如抗原特异性T细胞）的细胞因子产生能力。
- 同时分析免疫细胞的表面标志物与胞内功能性分子。
- 不适用于需要收集细胞培养上清进行ELISA、ELISpot或多重因子检测的实验（请选用不含蛋白转运抑制剂的产品，货号: C1508365）。
使用方法
标准刺激流程（用于ICS）
- 准备细胞： 将待测细胞（如人PBMC、小鼠脾细胞）用完全培养基重悬，调整至适当密度（推荐1-2×10^6 cells/mL），分装至培养板或流式管中。
- 添加刺激物： 按 1:500 的比例将本品加入细胞悬液。例如，每1 mL细胞悬液加入 2 µL 本500X浓缩液。轻轻混匀。
- 刺激与阻断孵育： 将细胞置于37°C，5% CO₂培养箱中孵育。关键孵育时间： 4至6小时。此时间段既能保证充分的细胞因子诱导表达，又能通过抑制剂实现高效胞内累积，是ICS的最佳窗口期。
- 细胞处理： 刺激结束后，直接进行细胞表面染色，随后固定、破膜，进行胞内细胞因子染色。
重要注意事项
本品已包含最佳浓度的刺激剂与抑制剂，无需也请勿额外添加其他蛋白转运抑制剂。
刺激时间至关重要，推荐4-6小时。过短可能导致细胞因子产量不足，过长（>6小时）可能因抑制剂毒性影响细胞活力与染色背景。
由于抑制剂完全阻断分泌，不能使用本产品刺激后的细胞上清进行可溶性细胞因子的检测。
This product is a complete “stimulate-and-block” cocktail provided as a 500× concentrate. In addition to the classic stimulators PMA (Phorbol ester) and Ionomycin, it contains highly effective protein transport inhibitors Brefeldin A and Monensin Sodium. This formulation not only robustly activates immune cells (e.g., T cells, NK cells) to induce cytokine synthesis but also efficiently blocks Golgi-mediated transport, leading to the potent intracellular accumulation of cytokines (e.g., IFN-γ, TNF-α, IL-2). It is a ready-to-use solution optimized specifically for Intracellular Cytokine Staining (ICS) analyzed by flow cytometry.
Key Components:
- Ethonal
- PMA 25μg/mL， lonomycin 500μg/mL，brefeldin A 1.5mg/mL，Monensin sodium salt 0.7mg/mL
Applications
- Standardized stimulation and blockade for Intracellular Cytokine Staining (ICS) and flow cytometry.
- Detection of cytokine-producing capacity in immune cells (e.g., antigen-specific T cells) at the single-cell level.
- Simultaneous analysis of cell surface markers and intracellular functional molecules.
- NOT suitable for experiments requiring supernatant collection for ELISA, ELISpot, or multiplex assays (please use the version without protein transport inhibitors, Cat# C1508365 ).
Instructions for Use
Standard Stimulation Protocol (For ICS)
- Cell Preparation: Suspend target cells (e.g., human PBMCs, mouse splenocytes) in complete medium at an appropriate density (recommended 1-2×10^6 cells/mL) and aliquot into culture plates or FACS tubes.
- Stimulation: Add this cocktail to the cell suspension at a 1:500 ratio. For example, add 2 µL of the 500X concentrate to 1 mL of cell suspension. Mix gently.
- Incubation (Stimulation & Blockade): Incubate cells in a 37°C, 5% CO₂ incubator. Critical Incubation Time: 4 to 6 hours. This duration ensures sufficient cytokine induction and optimal intracellular accumulation with minimal impact on cell viability, representing the ideal window for ICS.
- Cell Processing: After stimulation, proceed directly to surface staining, followed by fixation, permeabilization, and intracellular staining.
Key Precautions
This cocktail contains optimal concentrations of both stimulators and inhibitors. Do NOT add any other protein transport inhibitors.
Stimulation time is critical. 4-6 hours is recommended. Shorter times may yield insufficient cytokine, while longer times (>6 hours) may increase cytotoxicity and background.
Because secretion is completely blocked, the supernatant from cells stimulated with this product CANNOT be used for soluble cytokine detection (e.g., ELISA).
- Aliquot upon receipt to minimize freeze-thaw cycles.
规格
别名
细胞刺激混合物 (500×)
英文别名
Cell Stimulation Cocktail (Protein Transport Inhibitors Plus, 500×) | Cell Stimulation Cocktail (with Protein Transport Inhibitors) (500X) | Cell Activation Cocktail (with Brefeldin A) | Cell Stimulation Cocktail (plus protein transport inhibitors) (500X)
规格或纯度
无菌过滤,BioReagent,500×
稳定性与储存
Aliquot upon receipt and store frozen at -20°C(12 months). Protect from light. Avoid repeated freeze-thaw cycles
英文名称
Cell stimulation mixture (with protein transport inhibitor) (500X)
储存条件
避光,-20°C储存
运输条件
超低温运输
产品线
生物产品
名称和识别符
分子类型
生物试剂/缓冲液
技术文档
高级数据
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
输入批号以搜索分析图谱:
通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA，每批产品都进行了严格的验证，您可放心使用！
| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
 ZJ26F0434041 |
分析证书 | C1508366 |
溶液计算器
产品仅提供给经过验证的企业、机构和合格的专业人员用于研发。不适用于人类、动物、诊断或治疗。
Copyright © 2023至今 上海阿拉丁生化科技股份有限公司 保留所有权利。
危险品化学品经营许可证（带存储）