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Bio-Nano & Firefly 双萤光素酶报告基因检测试剂盒
有货
为什么选择此级别
BioReagent,用于化学发光 级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
“双报告基因”检测系统通常被用来提高实验精确度，即在一个系统中同时表达和测量两个独立的报告基因。一般来说，实验组报告基因与具体实验条件的影响是相关的，而共同转染的内对照组报告基因则是用来充当校正参数，作为内参提供反应基线。将实验组的结果与内对照组的结果进行约化处理，可降低由细胞存活率或转染效率的差异而导致的结果波动，同时还可消除仪器测定引起的实验误差。因此，双报告基因检测可以通过减少外部影响来获得更可靠的实验数据。
Bio-Nano&Firefly双萤光素酶报告基因检测试剂盒是一种辉光型定量检测试剂盒，具有高灵敏度和发光信号稳定的特点，符合高通量检测的需求。该检测试剂盒在同一个样品中先以一种新型萤光素为底物来检测萤火虫萤光素酶（Firefly luciferase），后以新型底物来检测Bio-Nano萤光素酶，同时淬灭Firefly luciferase的萤光信号，实现双萤光素酶报告基因检测。
本品Bio-Nano&Firefly双萤光素酶报告基因检测试剂盒具有以下优点：
1、采用了全新的萤光素酶检测新型底物和Bio-Nano萤光素酶，具有更高的发光强度，该辉光型试剂盒近乎达到了闪光型双萤光素酶报告基因检测试剂盒（货号D829607）的灵敏度；
2、具有更好的发光信号的稳定性，近乎2小时的信号半衰期为实验设计提供了更大的灵活性；高通量检测无需依赖自动进样器，并且无需弃培养液、离心等步骤，简化了实验流程，满足绝大多数高通量实验需求；
3、本试剂盒组分做了大量优化，与传统闪光型产品相比，无明显刺激性气味；
4、可用于多种常用细胞培养液：RPMI1640、DMEM、α-MEM、F-12、DMEM/F-12等。
本试剂盒中Bio-Nano萤光素酶使用一种新型底物，可产生高强度、辉光型发光，底物自主开发，国内使用无专利风险。本品遵守严格的生产及质控程序，更加符合生物药研发企业使用。
反应原理如下：
| D828158 | Component | 10 mL | 100 mL | Storage |
| D828158A | Dual-Firefly Luciferase Reaction Buffer | 10 mL | 100 mL | -20℃ |
| D828158B | Dual-Firefly Luciferase Substrate | 1 vial | 1 vial | -20℃. Store in the dark. |
| D828158C | Stop & Bio-Nano Luciferase Reaction Buffer | 10 mL | 100 mL | -20℃ |
| D828158D | Stop & Bio-Nano Luciferase Substrate (100x) | 100 μL | 1 mL | -20℃. Store in the dark. |
使用说明：
（一）自备材料
PBS；多道排枪；白色或黑色不透光细胞培养板；化学发光仪或带发光检测功能的酶标仪。 （二）检测前准备
1、Firefly Luciferase 检测工作液的配制：首次使用时将 Dual-Firefly Luciferase Reaction Buffer 一次性全部倒入 Dual-Firefly Luciferase Substrate 瓶中，充分混匀直至所 有底物溶解。按使用需求进行分装，建议-70℃长期保存或者短期存放于-20℃不超过一个月， 并尽快使用。
2、取出Stop&Bio-Nano Luciferase Substrate (100x)，每次开盖前需进行短暂低速离心。
3、Bio-Nano Luciferase 检测工作液的配制：根据实际使用量，以100:1的比例将适量的Stop&Bio-Nano Luciferase Reaction Buffer 与 Stop&Bio-Nano Luciferase Substrate (100x)混匀，室温避光备用。例如：如果需要100ml检测工作液，则需要加入1ml的检测 底物。
注：
①、建议检测工作液每孔的加样体积与细胞培养液体积相同。
②、建议现用现配，剩余的检测工作液在当次实验结束后，直接舍弃，不要留存。
（三）检测方法
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1、从细胞培养箱中取出已接种好待检细胞的细胞培养板，放置5-15min，恢复至室温。
注：使用白色或黑色不透光的细胞培养板，减少孔间的信号干扰。
2、Firefly Luciferase 反应检测
①、使用多道排枪向每个细胞孔中加入平衡至室温的Firefly Luciferase检测工作液， 加样体积与细胞培养液体积相同并混匀。由于需要分别加入两种检测溶液，为防止孔板液体溢出，96孔板建议加入80μl培养液，相应加入80μl检测溶液。
②、室温下孵育5-10min。为了使细胞裂解充分，也可将细胞培养板放在振荡混匀仪或附带振板功能的仪器上，室温条件下，采用中高速振板5-10min。
注：孵育时间，可根据细胞量进行适当调整，确保细胞充分裂解，得到稳定的发光检测结果。
③、孵育后于化学发光仪或带发光检测功能的酶标仪中检测FireflyLuciferase活性。
注：发光信号会逐渐衰减，为得到最佳检测结果，请在加入检测工作液后2小时内完 成检测。
3、Bio-Nano Luciferase 反应检测
①、使用多道排枪向每个细胞孔中加入平衡至室温的Bio-Nano Luciferase检测工作液，加样体积与初始细胞培养液体积相同并充分混匀。例如，96孔板建议加入80μl培养液， 相应加入80μl检测溶液。
②、将细胞培养板放在振荡混匀仪或附带振板功能的仪器上，室温条件下，采用中高速振板至少3min。使溶液充分混匀，得到最佳淬灭效果。
③、孵育至少10min后（包括前面振板3min）于化学发光仪或带发光检测功能的酶标仪中检测Bio-Nano Luciferase 活性。
注：发光信号会逐渐衰减，为得到最佳检测结果，请在加入检测工作液后2小时内完成检测。
注意事项：
1、检测仪器选择：能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测，但是针对相同的样品， 不同检测器本底信号值和测量值均可能不同；且对于同一样本检测，不同仪器的数值不可横向比较。为防止孔间干扰，推荐使用不透明白色或黑色细胞培养板。
2、由于发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响，所以应确保同组内不同样本 检测条件一致。
3、酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将检测工作液以及细胞培养板平衡至室温。
4、为取得最佳检测结果，加入Bio-Nano Luciferase检测工作液后，需要孵育至少10min 才可以检测Bio-Nano Luciferase 报告基因活性，其中包括振动混匀至少3min。
5、Bio-Nano 萤光素酶具有超强信号稳定性，半衰期可达2小时。但是当酶表达量过高时， 信号半衰期会缩短，建议优化实验设计方案（如减少质粒转染量），避免萤光素酶表达量过高。
6、Stop&Bio-Nano Luciferase Substrate (100x) 配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发，有时会在初次使用时发现体积明显小于包装规格的情况，此时用无水乙醇把体积补足至包装规格，并混匀后即可使用。
7、萤火虫萤光素酶催化的生物发光的最强波长为560nm，Bio-Nano萤光素酶催化的生物 发光的最强波长为460nm。
物理外观：Liquid
是否无菌：否
规格
英文别名
Bio-Nano&Firefly Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
规格或纯度
BioReagent, 用于化学发光
英文名称
Bio-Nano & Firefly Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
应用
报告基因检测, 生物发光
敏感性
Light sensitive
储存与运输
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
Store at -20°C long term (12 months). Store in the dark. After reconstitution, the Dual-Firefly Luciferase Substrate can be stored at -70℃ for 12 months, or at -20℃ for up to 1 month. Store in the dark.
技术文档
高级数据
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
 ZJ25F0622613 |
分析证书 | D828158 |
技术文档和文章
溶液计算器
常见问题
本产品如何运输？
本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。
什么是「用于化学发光」？
「用于化学发光」表示该化学品经过纯化和检测，专用于专项分析技术。关键规格通常包括：常用检测波长处的受控紫外吸收、低不挥发残渣、受控的水分含量以及经验证的批间一致性。「用于化学发光」用于此工作流程中的流动相、样品制备和分析标准品。
什么是「BioReagent」？
「BioReagent」表示该产品经过加工和检测，适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性，以及在相关情况下的生物活性验证。
本产品应如何储存？
请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。
如何获取批次专用COA？
每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。
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