外泌体提取试剂 (细胞上清)

货号: E1528129
有货
级别和纯度: BioReagent ? 生物试剂级(BioReagent)—— 经测试适用于生命科学和分子生物学。适用于需要生物相容性的细胞培养、检测和生化工作。 用于细胞培养 ? 细胞培养级 —— 内毒素和污染物低,支持细胞存活生长。适用于哺乳动物/其他细胞培养基和添加剂。 无菌 ? 无菌级 —— 经处理并验证无活微生物。可直接用于无菌操作和细胞培养,无需再灭菌。 无核酸酶
别名
细胞上清外泌体抽提试剂,细胞培养液外泌体纯化试剂
储存条件
室温
运输条件
常规运输
应用
Exosome Isolation and Purification
★
规格
库存
价格
数量
10ml
E1528129-10ml
期货 Stock Image
¥669.90
50ml
E1528129-50ml
期货 Stock Image
¥2,299.90
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为什么选择此级别

BioReagent,无菌,用于细胞培养 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

是否无菌:是
外泌体是由细胞分泌的包含 RNA 和蛋白质的小囊泡(30-150 nm),在血液、唾液、尿液及乳汁等体液中大量存在。外泌体被认为具有细胞间信使的功能,在特定细胞之间传递它们的效应物或信号分子;然而其构造、效应物组成以及所参与的生物学通路目前尚不明晰。
外泌体的生物学功能研究中需要分离完整的外泌体颗粒,而传统超速离心方法步骤繁琐、硬件要求高、操作难度大。该外泌体快速提取试剂,组分经过优化处理,适用于细胞培养上清液中的外泌体提取,可快速高效地获得外泌体颗粒,可用于电镜分析、NTA 粒径分析、核酸分析、蛋白分析、细胞学实验和动物实验等。
自备材料:
高速离心机,涡旋振荡器,50 mL 离心管,1.5 mL 离心管,1×PBS 缓冲液(无菌)。
操作规程:
一、 样品预处理
1、 取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于 25℃水浴中进行解冻,将完全融化后的样品置于冰上,如果是新鲜样品,收集样品后置于冰上;
2、 样品初始用量:单次提取时的样品量建议细胞培养上清液不低于 20 mL;
3、 离心去细胞碎片:将样品转移至离心管中,于 4℃以3,000 ×g(~5,200 rpm**)离心 10 min,去除样品中的细胞碎片(注:若沉淀较多,可 3,000 ×g,10 min离心多次至无明显沉淀,每次取离心上清液);
**为约10 cm有效离心半径的大离心机换算(≥15 mL离心管),下同。
4、 离心去杂质碎片:将离心上清液转移至新的离心管中,于 4℃以 10,000 ×g(~9,500 rpm**)离心 10 min,去除样品中的杂质碎片;
5、 上清液转移:去除杂质碎片的上清液转移到新离心管中。
二、 提取外泌体
1、 上清液预处理:在去除杂质的离心上清液中加入外泌体提取试剂 (细胞上清),具体的加入剂量为20 mL样品量加入5 mL 外泌体提取试剂 (细胞上清);其他剂量请根据该用量等比例换算。
2、 溶液混合:加入外泌体提取试剂 (细胞上清) 后将离心管盖紧,通过涡旋振荡器混匀 1 min,再放置于 4℃静置8 h 以上;
       注:增加静置时间可提高外泌体得率,但不可超过 24 h。
3、 沉淀外泌体:取出装有混合液的离心管于 4℃以 10,000 ×g(~9,500 rpm**)离心 60 min,弃上清,沉淀中富含外泌体颗粒(注:尽可能吸尽上清液);
4、 再次离心:将含有沉淀的离心管再次于 4℃以 10,000 ×g(~9,500 rpm**)离心 2 min,弃上清(注:尽可能吸尽上清液);
5、 外泌体重悬:取合适量的 1×PBS 均匀吹打离心沉淀物,待其溶解后,将重悬液转移至新的 1.5 mL 离心管中(建议每 20 mL 细胞培养上清用 200 μL 左右 1×PBS 重悬);
6、 收获外泌体颗粒:将含有重悬液的1.5 mL 离心管于4℃以 12,000 ×g(~12,400 rpm*)离心 2 min,保留上清液,其中富含外泌体颗粒(注:若沉淀较多,可 12,000×g,2min 离心多次至无明显沉淀,每次取上清液)。
*为约 7 cm 有效离心半径的小离心机换算(≤2 mL 离心管)。
7、 外泌体的保存:纯化后的外泌体以合适体积进行分装冻存于-80℃低温冰箱中,以备后续实验使用。
注意:
本产品仅用于生命科学研究,不得用于医学诊断及其他用途。
Is it sterile: Yes

规格

别名
细胞上清外泌体抽提试剂,细胞培养液外泌体纯化试剂
英文别名
Exosome Isolation Reagent (for Tissue Culture Supernatant)
规格或纯度
BioReagent, 用于细胞培养, 无菌, 无核酸酶
稳定性与储存
Store at room temperature long term (24 months).
英文名称
Exosome Isolation Reagent (from cell culture media)
储存条件
室温
运输条件
常规运输
产品线
生物产品
名称和识别符
分子类型
生物试剂/缓冲液

技术文档

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