FnCas12a (Cpf1)

货号: F746075
有货
级别和纯度: 无动物源 ? 无动物源(Animal Free)—— 不含动物源成分生产,降低污染风险。适用于避免动物源材料的生物制造和培养。 无载体 ? 无载体(Carrier Free)—— 不含添加的载体蛋白/稳定剂。当载体(如 BSA)会干扰偶联或敏感检测时使用。 生物活性 ? 生物活性级(Bioactive)—— 经验证在功能检测中保持生物活性。当分子须具有功能活性而不仅是纯度时使用。 ActiBioPure™ ? ActiBioPure™ —— 阿拉丁面向生物活性和重组产品的优质系列。当同时需要高纯度和保持生物活性时使用。 EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。 无RNA酶 ? 无 RNase —— 经验证无 RNase 活性,保护易损 RNA。适用于 RNA 提取、RT-PCR 及任何对 RNA 敏感的流程。 无菌 ? 无菌级 —— 经处理并验证无活微生物。可直接用于无菌操作和细胞培养,无需再灭菌。 1μM (153.7ng/μL )
Accession #
A0Q7Q2.1
表达系统
E. coli
★
规格
库存
价格
数量
100pmol
F746075-100pmol
现货 Stock Image
¥409.90
5×100pmol
F746075-5×100pmol
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¥1,119.90
20×100pmol
F746075-20×100pmol
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¥2,399.90
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为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,无RNA酶,无动物源,无菌,无载体,生物活性 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

  阿拉丁生产的 FnCas12a (Cpf1),也称为 Cpf1,是本公司自主研发的技术平台表达、纯化获得的一种由 RNA 引导的可编辑 DNA 的重组核酸内切 酶,具有基因编辑效率高,脱靶效率低的优点。FnCas12a 来源于 Francisella novicida U112, 分子量大约为 154kDa。FnCas12a 识别含有 TTN 的 PAM 序列,并且 FnCas12a 的切割位点相对远离其识别位点为多次编辑提供了可能性,这些特点使 Cas12a 与 Cas9 可以互为补充。只需简单将 guide RNA (gRNA)与 Cas12a 蛋白相结合,由于该 gRNA 仅含有 crRNA,无需 trans-activating crRNA (tracrRNA)即可实现基因编辑的目的。 FnCas12a 包含约 1300 个氨基酸,含有 RuvC-like 结构域,同时具有 DNA 和 RNA 内切酶的活性。研究表明,FnCas12a 与 Cas9 由于两者结构的 不同导致了其分子机制有所差异。CRISPR-Cas12a 系统是由 Cas12a 和 gRNA (crRNA,仅需约 40-44 个碱基)组成。FnCas12a 由 gRNA 引导 至互补链,识别互补链上 5'端短的富含 T 碱基(5'-TTN-3')的 PAM (Protospacer adjacent motif)序列,然后 FnCas12a 中的 RuvC 核酸内切酶结构 域逐个切割互补链和靶链,以产生交错的 DNA 双链断裂,断裂发生在 PAM 序列 3'端的约第 18 个碱基处,切割产物为 5'端突出 4 或 5 个碱基的粘 性末端。而 CRISPR-Cas9 系统是由 Cas9 和 gRNA (crRNA 和 tracrRNA 两个 RNA 分子融合而成)组成,Cas9 在 gRNA 的引导下,识别 3'端富含 G 碱基(5'-NGG-3')的 PAM 序列,并且 Cas9 需要使用 HNH 和 RuvC 两个核酸酶结构域协同切割 DNA,断裂通常发生在 PAM 序列 5'端的第 3 个碱基 处,最终产生平末端。

纯度(Purity):不含 DNA 内切酶和外切酶,不含 RNA 酶。  

失活或抑制(Inactivation or inhibition):65℃加热 10 分钟失活。

组分和说明

F746075Component100pmol5*100pmol20*100pmolStorage
F746075AFnCas12a (1μM) 100µl5*100µl20*100µl-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
F746075B10X Reaction Buffer 0.5ml5*0.5ml20*0.5ml-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

产品应用 

可用于基因编辑和基因检测等。线粒体或质粒 DNA 等双链环形 DNA 的线性化。 

产品优势 

FnCas12a (Cpf1)酶的 C 端融合了核定位信号(Nuclear localization signal, NLS),NLS 有助于 FnCas12a 进入细胞后定位至细胞核,从而提高基 因编辑的效率。

使用说明 

FnCas12a (Cpf1)体外消化靶 DNA 

1.溶解并混匀体外消化反应所需的各种溶液。将 F Cas12a、gRNA、底物 DNA 置于冰浴上,使用无核酸酶水稀释 gRNA 至 300nM,底物 DNA 至 30nM。 

2.按照下表配制反应体系(以 30μl 体系为例):

Reagent Volume
Nuclease-free water 20µl
10X Reaction Buffer 3µl
gRNA (300nM) 3µl
FnCas12a (1μM)1µl
Total Reaction Volume 27µl

3.用移液器轻轻吹打混匀或轻微 Vortex 混匀,室温离心数秒,使液体积聚于管底。25℃预孵育 10min。 

4.加入 3μl 30nM 底物靶 DNA (30μl 最终体积),轻轻混匀(用移液器轻轻吹打混匀或用涡旋混合器在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀 液体,37℃孵育 10min。 

5.向每个样品中加入 1μl 蛋白酶 K ,轻轻混匀, 室温孵育 10min。 

6.向反应体系中加入 6μl DNA 上样缓冲液(6X) ,然后使用 1%琼脂糖凝胶进行电泳分析。 

保存条件: -20℃保存,≤0℃运输 

注意事项: 

(1)本产品使用过程中需要确保 Nuclease-free,操作时应特别小心,避免被污染。所有操作都需要按照 RNase-free 的要求进行。 

(2)对于操作环境中核酸酶的去除,推荐使用阿拉丁生产的 RNase and DNase Away (R749971) 以去除实验桌面上或其它接触面上的核酸酶。反应体系中 推荐加入 RNase Inhibitor 以保护 RNA 不被降解。 

(3)本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 

(4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


规格

产品名称
FnCas12a (Cpf1)
英文别名
cas12a | Cpf1
规格或纯度
无动物源, 无载体, 生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™, 无RNA酶, 无菌, 1μM (153.7ng/μL )
表达系统
E. coli
种属
土拉弗朗西斯菌亚种.诺维奇达(U112菌株)(Francisella tularensis subsp. novicida (strain U112))
无载体
Yes
无动物源
Yes
来源
重组表达
预测分子量
154 kDa
SDS-PAGE
154 kDa
分子类型
酶
产品线
生物产品
储存与运输
物理形态
液体
储存缓冲液
500mM NaCl, 20mM Sodium acetate, 0.1mM EDTA, 0.1mM TCEP, 50% (v/v) Glycerol, pH6.0
浓度
1μM (153.7ng/μL )
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
长期储存-20℃(24个月);避免反复冻融。

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

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✅ 分析证书 (COA)

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📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

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🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

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高级数据

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ25F0723737 分析证书 F746075
ZJ25F0723738 分析证书 F746075
ZJ25F0723736 分析证书 F746075
技术文档和文章
溶液计算器

常见问题

什么是「无动物源」?
「无动物源」表示该物料经过加工和检测,适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如,电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率,或对水分敏感工艺的水分含量。
什么是「无载体」?
「无载体」表示该物料经过加工和检测,适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如,电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率,或对水分敏感工艺的水分含量。
本产品应如何储存?
请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。
本产品如何运输?
本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
如何获取批次专用COA?
每个订单都会随附分析证书(COA),您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA,请联系您的客户代表,或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。