17α-羟基孕酮:性质、用途与实验室使用指南
17α-羟基孕酮:性质、用途与实验室使用指南
17α-羟基孕酮是一种天然存在的C21类固醇激素,也是肾上腺和性腺中皮质醇及性类固醇生物合成的关键中间体,在内分泌学研究中被广泛用作参考标准品和生化探针。
- 化学名称
- 17α-羟基孕烯-4-烯-3,20-二酮
- 分子式
- C₂₁H₃₀O₃
- 分子量
- 330.46 g/mol
- CAS号
- 68-96-2
- 生物合成作用
- 通过CYP17A1羟化酶催化,作为孕酮与皮质醇/雄激素之间的生物合成中间体
- 主要研究用途
- 用于免疫测定、LC-MS/MS及类固醇生成途径研究的参考标准品
- 推荐储存条件
- -20°C,避光防潮保存
生化背景与生物合成途径
17α-羟基孕酮(17α-OHP)是一种C21类固醇,由孕酮在肾上腺皮质和性腺中表达的细胞色素P450酶——CYP17A1(17α-羟化酶)的催化下,在17α位发生羟化反应生成。该反应是类固醇生成的关键分支点:17α-OHP可经CYP21A2(21-羟化酶)进一步转化为11-脱氧皮质醇(最终生成皮质醇),也可经CYP17A1的C17–20裂解酶活性生成雄烯二酮,后者是睾酮和雌激素的前体。
因此,循环中17α-OHP的水平可反映多种类固醇生成酶的活性,使其成为肾上腺类固醇生成障碍的敏感标志物。在由21-羟化酶缺乏症引起的经典先天性肾上腺皮质增生症(CAH)中,17α-OHP会显著蓄积,这奠定了其作为新生儿筛查分析物和诊断生物标志物的临床价值。
理化性质与配制方法
17α-OHP为白色至类白色晶体粉末,分子量为330.46 g/mol(CAS号68-96-2),分子式为C₂₁H₃₀O₃。该化合物微溶于水,但可溶于乙醇、甲醇、二甲基亚砜(DMSO)和氯仿等有机溶剂。在配制用于细胞或生化实验的储备液时,建议先溶于乙醇或DMSO,再用水性缓冲液或培养基稀释,终有机溶剂浓度应≤0.1%(v/v),以最大限度降低细胞毒性。
对结构类似类固醇的稳定性研究表明,该化合物易受氧化和光降解影响。因此,储备液应新鲜配制,分装成小份以避免反复冻融,储存于-20°C棕色瓶中,并在建议有效期内使用。在关键实验前,应通过紫外吸收(Δ4-3-酮色基团特征吸收峰λmax约240 nm)或经验证的LC-MS/MS方法核实浓度。
研究与分析应用
免疫测定校准与验证:研究级17α-OHP常被用作放射免疫测定(RIA)、酶联免疫吸附测定(ELISA)和化学发光免疫测定(CLIA)平台的校准品或质控品,用于定量血清、血浆、唾液及干血斑中内源性类固醇浓度。
LC-MS/MS参考标准品:基于质谱的类固醇谱分析已成为临床和研究领域类固醇定量的金标准。同位素标记或未标记的17α-OHP可用于构建校准曲线,并在多分析物类固醇检测方法中评估方法准确性和精密度。
体外类固醇生成研究:17α-OHP可作为底物或产物标志物,用于肾上腺皮质细胞系(如H295R)、原代肾上腺细胞培养物及重组酶体系中,表征CYP17A1、CYP21A2及相关酶的动力学参数、筛选抑制剂,或评估与CAH及多囊卵巢综合征(PCOS)相关遗传变异的功能影响。
药理学研究:作为孕酮的结构类似物,17α-OHP及其酯化衍生物(尤其是17α-羟基孕酮己酸酯)已被研究用于孕激素活性和子宫效应研究,使得游离形式的化合物在受体结合和竞争性测定中具有重要价值。
操作、储存与安全指南
个人防护装备(PPE):按照生物活性类固醇的良好实验室规范操作17α-OHP。佩戴丁腈手套、实验室白大衣和安全眼镜。称量粉末时,请在通风橱或生物安全柜中操作,以防止吸入细小颗粒。
储存:将纯品化合物和储备液储存于-20°C密封容器中,避光防潮。在此条件下,自生产之日起至少24个月内,材料预期保持稳定;但请务必以随附的质量检验报告(CoA)上的产品专属有效期为准。
废弃处置:按照机构规定及适用的当地法规,将含17α-OHP的废弃物作为具有生物活性的化学废弃物妥善处置。请勿将有机溶剂溶液直接倒入下水道。
急救措施:如发生皮肤或眼睛接触,立即用大量清水冲洗至少15分钟,并寻求医疗建议。详细危害信息请参阅每批货物随附的安全数据表(SDS)。
质量规格与订购信息
阿拉丁科学提供研究级17α-羟基孕酮(货号:H137675)。每批产品均附有质量检验报告(CoA),记录了身份确认(通常采用NMR或IR)、纯度评估(HPLC纯度≥98%,以CoA标注为准)及外观描述。在用于定量或法规环境研究前,应始终查阅批次专属数据。
如需采购咨询、批量定价或定制包装,请联系阿拉丁科学客户服务团队。大批量供货可能需要一定备货时间;当前库存状态和价格请查阅产品页面或咨询您所在地区的销售代表。
常见问题
溶解17α-羟基孕酮推荐使用哪些溶剂?
17α-OHP可溶于乙醇、甲醇、DMSO和氯仿。对于细胞实验,建议先在乙醇或DMSO中配制高浓度储备液,再稀释至水性培养基中,确保终有机溶剂含量≤0.1%(v/v),以避免细胞毒性干扰。
如何储存17α-羟基孕酮以确保长期稳定性?
将纯品粉末和储备液储存于-20°C密封棕色容器中,避免受潮和光照。将储备液分装成小份,以减少反复冻融。请务必通过随附的质量检验报告确认批次专属有效期。
在研究模型中,17α-OHP水平升高有何意义?
17α-OHP水平升高是21-羟化酶缺乏症的典型特征,该缺陷是先天性肾上腺皮质增生症(CAH)最常见的病因。在研究模型中,17α-OHP的蓄积表明通过CYP21A2的代谢通量受损,类固醇生成向雄激素前体方向转移。因此,它被用作酶抑制研究和遗传变异表征中的功能性读出指标。
17α-羟基孕酮可作为LC-MS/MS类固醇检测方法的校准品吗?
可以。纯度经认证(HPLC纯度≥98%)的研究级17α-OHP适用于LC-MS/MS类固醇谱分析方法中校准曲线的构建。对于临床研究应用中要求最高计量溯源性的场景,建议配合氘代或¹³C标记的内标使用;具体供货情况请咨询阿拉丁科学。
17α-羟基孕酮与己酸羟孕酮是同一种物质吗?
不是。17α-羟基孕酮(17α-OHP)是游离的类固醇醇,而己酸羟孕酮(17-OHPC)是17α-OHP的己酸酯,具有临床应用。两者的理化性质和代谢途径不同,在研究测定中不可互换使用。
参考文献
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- Kushnir MM, Rockwood AL, Bergquist J. Liquid chromatography-tandem mass spectrometry applications in endocrinology. Mass Spectrometry Reviews. 2010;29(3):480–502. doi:10.1002/mas.20264
- Aladdin Scientific. Product Certificate of Analysis: 17α-Hydroxy Progesterone, SKU H137675. Aladdin Scientific (internal document).
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