5-溴-6-氯-3-吲哚乙酸酯:性质与实验室用途
5-溴-6-氯-3-吲哚乙酸酯:性质与实验室用途
5-Bromo-6-Chloro-3-Indolyl Acetate是一种显色底物,用于组织化学和生化检测中,通过酶促水解产生可见有色沉淀,从而检测和定位酯酶活性。
- 化学名称
- 5-溴-6-氯-3-吲哚乙酸酯
- 产品编号
- B132186
- 底物类别
- 显色吲哚酯类底物
- 检测原理
- 乙酸酯键的酶促水解释放出吲哚氧基中间体,氧化后形成有色染料沉淀
- 主要应用
- 酯酶活性的组织化学定位及生化定量检测
- 供应商
- Aladdin Scientific
什么是5-溴-6-氯-3-吲哚乙酸酯?
5-溴-6-氯-3-吲哚乙酸酯(产品编号B132186)属于卤代吲哚酯类显色底物。这类化合物在酶学和组织化学领域被广泛应用,因为其酶促水解产物可迅速发生氧化偶联,生成颜色深、水不溶性的染料沉淀,且沉淀保留在酶活性位点处。
该分子以吲哚为核心骨架,在5位连接溴原子,在6位连接氯原子,在3位连接乙酸酯基团。两种卤素的组合使所生成染料的最大吸收波长相对于较简单的吲哚底物(如X-乙酸酯,即5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸酯)发生偏移,从而使研究人员能够调节显色输出,并优化多重染色方案中的色彩对比度。
显色检测机制
当5-溴-6-氯-3-吲哚乙酸酯暴露于酯酶活性时,C-3位的乙酸酯键发生水解断裂,释放出5-溴-6-氯吲哚氧基中间体(无色还原型)。该中间体在有氧条件下本质上不稳定,在大气氧或外加氧化剂的存在下迅速发生氧化二聚,在酶活性的精确位置形成颜色深、不溶性的双吲哚染料沉淀。
由于沉淀不溶于水,不会从反应位点扩散,因此该底物在高分辨率组织化学定位研究中具有特殊价值。吲哚环上的卤素取代模式影响最终沉淀的颜色及其溶解度特性,研究人员在设计共染色实验或同时区分多种酶活性时可加以利用。
主要研究应用
酯酶的组织化学定位:该底物应用于冷冻切片或石蜡切片,以揭示非特异性酯酶、乙酰胆碱酯酶相关活性或其他丝氨酸水解酶在组织中的空间分布。不溶性有色产物以高空间保真度标记富含酶的区域。
微生物学和细胞生物学筛选:利用吲哚酯类底物进行菌落印迹或凝胶内检测,可快速鉴定产酯酶微生物或表达重组酯酶的转染细胞系。阳性菌落周围的显色晕环提供直观的视觉读数。
多重酶检测:由于5-溴-6-氯-3-吲哚乙酸酯产生的染料颜色与其他卤代吲哚底物(如具有不同卤素取代模式的X-底物)不同,因此可与互补底物联合使用,在同一切片或孔中同时可视化两种或多种酶活性。
酶制剂质量控制:使用该底物进行溶液相比色法检测,可定量纯化酶制剂、细胞裂解液或血清样品中的酯酶活性,提供简便的分光光度法终点读数。
操作、储存和安全注意事项
与所有精细研究化学品一样,5-溴-6-氯-3-吲哚乙酸酯的操作应遵循标准实验室安全规程。研究人员在使用前应查阅Aladdin Scientific提供的产品安全数据表(SDS)。
储存:将该化合物储存于阴凉、干燥、避光的环境中,密封保存以防止潮气侵入和光降解。具体的温度和湿度建议详见产品SDS和分析证书。
溶解度和储备液配制:吲哚酯类底物通常溶于有机溶剂(如二甲基亚砜DMSO或二甲基甲酰胺DMF)中配制浓缩储备液,临用前立即稀释至水性检测缓冲液中,以尽量减少预水解。工作液应现配现用。
废物处置:按照当地机构和政府关于卤代有机化合物的法规处置化学废物。
订购信息
5-溴-6-氯-3-吲哚乙酸酯可通过Aladdin Scientific以产品编号B132186订购。如需了解价格、现有包装规格、当前库存状态及批量折扣信息,请联系您的Aladdin Scientific代表或访问Aladdin Scientific官网产品页面。
高通量筛选项目或OEM供应的大批量需求可按需洽谈。分析证书(CoA)和安全数据表(SDS)文件可直接从产品页面下载,或向技术支持申请获取。
常见问题
5-溴-6-氯-3-吲哚乙酸酯水解后产生什么颜色的沉淀?
酶促水解后,释放的吲哚氧基中间体经氧化和二聚形成不溶性有色染料沉淀。确切的色调取决于吲哚环上的卤素取代模式;然而,该特定5-溴-6-氯异构体的精确颜色特征应从产品数据表或一次文献中确认,Aladdin Scientific建议对照随附的CoA核实光谱数据。
如何为组织化学染色配制5-溴-6-氯-3-吲哚乙酸酯的工作液?
将该化合物溶于无水有机溶剂(如DMSO或DMF)中配制浓缩储备液,临用前立即稀释至适当的水性染色缓冲液中。避免在检测前长时间暴露于水性条件下,以防止自发水解。最佳储备液浓度和稀释倍数应针对每种组织和酶体系通过实验确定。
5-溴-6-氯-3-吲哚乙酸酯能否与其他显色底物联合使用?
可以。卤代吲哚底物的一大优势在于,不同的卤素取代模式产生颜色和溶解度特性各异的染料,从而能够在单一样品中实现两种或多种酶活性的多重检测。研究人员在设计双重染色实验时,应通过实验验证颜色兼容性和交叉反应性。
5-溴-6-氯-3-吲哚乙酸酯可检测哪些酶?
该底物主要用于广泛检测酯酶活性,包括能裂解乙酸酯键的非特异性酯酶及相关丝氨酸水解酶。特定酶的选择性取决于检测条件、缓冲液组成和pH值。针对特定酯酶亚型的研究人员应相应优化实验条件并查阅相关一次文献。
参考文献
- Aladdin Scientific product page: 5-Bromo-6-Chloro-3-Indolyl Acetate, SKU B132186. Aladdin Scientific.
- Pearse A.G.E. Histochemistry: Theoretical and Applied. 4th ed. Churchill Livingstone; 1980. (General reference for chromogenic indolyl substrate methodology.)
- Holt S.J., Withers R.F.J. Studies in enzyme cytochemistry. V. An appraisal of indigogenic reactions for esterase localization. Proceedings of the Royal Society of London. Series B. 1958;142:160-169.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)