S 滤芯
S 滤芯
S滤芯规格
应用:用于从各种复杂混合物中纯化聚糖,包括标记后清除荧光团标记的聚糖。
说明:药筒含有聚糖结合膜。这与含有高浓度的某些有机溶剂(如乙腈)的溶液中的聚糖结合。大多数疏水性非聚糖污染物(如芳香染料和洗涤剂)要么简单地通过滤筒,要么结合得很轻,可以从膜上洗掉。聚糖用水从膜上洗脱。
结合能力:每个药筒最多可结合20µg聚糖,体积不超过15µL。
样品数量:S型滤芯仅设计用于一次性使用。
合适的样品:可以纯化多种聚糖。这些包括N-连接和O-连接型寡糖、三糖和更大的结构。用100%乙腈代替96%乙腈进行O-聚糖清除方法。
储存:在室温下黑暗中储存。避免热源、光源和湿气。滤芯在供应时至少稳定两年。
装运:产品可在环境温度下装运。
处理:确保使用的玻璃、塑料制品或溶剂不含糖苷酶和环境碳水化合物。在所有样品处理程序中使用无粉末手套,避免污染环境碳水化合物。
安全:请阅读所有使用化学品的材料安全数据表(MSDS)。
所有涉及危险试剂的过程都应使用适当的个人安全防护措施-眼镜、耐化学手套(如丁腈橡胶)等-并在适当的情况下在实验室通风柜中进行。
仅供研究使用。不用于人类或药物
所需的其他试剂和设备
纯水,HPLC级(每个样品约3 ml)
乙腈,HPLC级(每个样品约3 ml)
96%乙腈*/4%水(v/v)(每个样品约6 ml)100%乙腈用于O-聚糖清除。
30%乙酸/70%水(v/v)(每个样品约6 ml)
介绍
S滤芯设计用于聚糖荧光标记后,从过量的2AB/2AA染料中纯化荧光团标记的聚糖。
清理时间线
S聚糖清理程序通常需要80-100分钟:
程序 | 时间 | 已用时间(分钟) |
清洗和灌注滤筒 | 20分钟 | 20 |
应用示例 | 20分钟 | 40 |
洗掉非聚糖污染物 | 20分钟 | 60 |
洗脱聚糖 | 20分钟 | 80 |
使用说明
1) 准备聚糖样品
待清洗的样品的体积必须小于等于15µl。如果您的样品体积较大,则使用离心蒸发器将其干燥,并在不超过15µl的水中重新配制。
2)给S滤芯注水
用以下方法清洗S滤芯(每个样品一个):
第一次洗涤-1 ml水。
第二次洗涤-5 ml 30%乙酸(aq)。
第三次洗涤-1 ml乙腈。
在加入下一次洗涤液之前,让每次洗涤液完全排干。如果流量受到限制,例如气隙,则向滤筒顶部施加轻微压力,以恢复正常流量。
3) 将样品点到筒膜上
将每个样本点在刚清洗过的盒式磁盘上,确保磁盘仍被乙腈润湿。
如有可能,将斑点散布在整个制动盘表面,这样有助于清理。
4) 让样品吸附在膜上
吸附15分钟。
5) 从样品瓶中添加残留样品
用100µl乙腈冲洗每个样品瓶,并将其涂抹到相应的药筒圆盘上。
6) 清洗膜上的非聚糖污染物
用1 ml乙腈清洗每个圆盘,然后用5 x 1 ml 96%乙腈*/4%水清洗。
*(对于用普鲁卡因酰胺标记的O-聚糖或N-和O-聚糖的清除,用100%替代乙腈)
7) 用2 x 0.5 ml水洗脱,将膜上的聚糖洗脱到合适的容器中
在用下一份之前,让每0.5 ml等分试样排干。
8) 干燥洗脱的聚糖(可选)
如果合适,将含聚糖的部分蒸发至干,然后溶解在所需体积的水或溶剂用于进一步分析。
9) 方案完成
你的聚糖现在可以分析了。
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