实验方案(Protocols)

人体异种移植性肿瘤动物模型

简介

异种动物移植由于免疫排斥反应,常导致移植失败,其难度大。故选择合适的移植宿主是移植成功的关键。将体外培养的人癌细胞系成功移植于裸鼠,其体内的人体肿瘤在裸鼠体内仍保持其原有的组织学形态、特有的染色体组型及对化学放射治疗的原有特性。根据移植部位分为皮下移植瘤和原位移植瘤。

操作方法

人体异种移植性肿瘤动物模型的建立

材料与仪器

动物模型:
裸鼠
器材:
人肿瘤细胞或组织块等

步骤

人体异种移植性肿瘤动物模型根据移植位置分为皮下移植瘤和颅内原位移植两类,具体步骤如下:


(一)皮下移植瘤:

A、在超净工作台内,将对数生长期细胞用 0.25% 胰蛋白酶消化脱壁。


B、用 PBS 以 1000 r/min 离心 10 分钟,洗涤 2 次。


C、台盼蓝染色计数活细胞数,用 PBS 制成一定浓度的细胞悬液。


D、用 1 mL 注射器接种 0.2 mL 瘤细胞液 (含 1×105-1×107 个细胞) 于裸小鼠右 (左) 侧服窝皮下。


E、接种后于 SPF 级环境中饲养定期观察裸鼠精神、饮食排便情况及肿瘤结节大小。


(二)颅内原位移植瘤:

A、以 1% 戊巴比妥钠腹腔麻醉动物,在层流超净台内用鼠脑立体定位仪头架固定裸鼠头部,校正定位仅坐标"0"点。


B、在内毗连线与头矢状中线交汇处行纵向切口约 1 cm,分离暴露颅骨。


C、根据文献报道确定钻孔位置,于冠状缝后 1 mm、矢状线右 2.5 mm 以牙科钻小心钻穿颅骨,深度以达硬膜而不刺破硬膜为准。


D、将吸有 5 μl 瘤细胞悬液的微量进样器固定于立体定向仪横杆上,经钻孔垂直进入脑实质中,进针深度为距颅骨表面 3.5 mm 左右,注射前略微退回 0.5~ 1 mm,将瘤细胞悬液缓慢、匀速注人裸鼠右脑尾状核,除针前停留 2 分钟,缓慢拔针。


E、术后骨蜡封闭骨孔,缝合切口,剩余细胞进行回培养以检测细胞活力及污染与否。


F、接种后动物全部饲养于 SPF 级环境中,接种后 14-20 天或裸鼠出现明显运动失调、弓背、激惹. 偏瘫等神经症状时终止观察。

注意事项

裸小鼠费用昂贵饲养条件和实验条件要求高,使用的笼具、饮水、饲料均需高压灭菌消毒,全部实验过程应达到 SPF 级。


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探索主题: 实验动物

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《人体异种移植性肿瘤动物模型》. 阿拉丁知识库,更新于 2024年12月23日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/animal-models-of-human-xenograft-tumors.html
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