靶点生物学背景：AREL1简介

AREL1（抗凋亡E3泛素蛋白连接酶1）是一种含HECT结构域的E3泛素连接酶，在调控程序性细胞死亡中发挥核心作用。AREL1通过对促凋亡底物——包括SMAC/DIABLO、HtrA2/OMI及ARTS——进行泛素化修饰并靶向其蛋白酶体降解，从而促进细胞存活、抑制凋亡信号。

AREL1在多种人体组织中均有表达，并与肿瘤细胞的存活密切相关，其高表达可能赋予细胞对凋亡诱导疗法的抵抗性。因此，AREL1的研究对肿瘤学、细胞死亡通路及潜在治疗靶点的鉴定具有重要意义。

产品规格参数

AREL1鼠单克隆抗体（Ab351155）由小鼠产生，以仅含PBS的缓冲液形式提供，不含额外的稳定剂或防腐剂。主要规格参数如下：

• 货号：Ab351155
• 宿主：小鼠
• 抗体类型：单克隆抗体（mAb）
• 靶点：人源AREL1
• 制剂：仅PBS缓冲液
• 参考编号：absea#KC-2345

研究人员应按照单克隆抗体的标准冷链规范储存本品。建议长期储存时分装后置于−20°C或−80°C冻存，以避免反复冻融。由于制剂仅含PBS，若短期内不使用，建议添加BSA等载体蛋白或甘油以提高长期稳定性。

推荐应用与使用指南

AREL1鼠单克隆抗体适用于标准免疫检测应用。该类单克隆抗体的典型用途包括：

• 蛋白质印迹（WB）：检测细胞或组织裂解液中内源性或过表达的AREL1蛋白。建议通过预实验优化一抗浓度。
• 免疫共沉淀（IP）：下拉AREL1及其相关蛋白复合物以进行后续分析。
• 免疫荧光（IF）：在固定细胞中研究AREL1的亚细胞定位。
• 免疫组织化学（IHC）：检测福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织切片中AREL1的表达。

注意：现有资料中未详细列出具体经验证的应用及工作稀释比例，用户应进行滴定实验并参阅产品说明书获取经验证的应用数据。

AREL1鼠单克隆抗体蛋白质印迹通用实验方案

以下为使用AREL1鼠单克隆抗体进行蛋白质印迹实验的通用操作指南，请根据具体细胞/组织体系优化实验条件。

1. 样品制备：使用添加蛋白酶抑制剂混合物的RIPA裂解液裂解细胞或匀浆组织。通过BCA法或Bradford法测定蛋白浓度，每泳道上样20–50 µg总蛋白。
2. SDS-PAGE：在还原条件下将蛋白于8–12%聚丙烯酰胺凝胶上分离，随后转印至PVDF或硝酸纤维素膜。
3. 封闭：用TBST配制的5%脱脂奶粉或5% BSA在室温下封闭膜1小时。
4. 一抗孵育：将AREL1鼠单克隆抗体以经验确定的稀释比（建议起始范围1:500–1:2000）在4°C下温和振荡孵育过夜。
5. 洗涤：用TBST洗涤3次，每次10分钟。
6. 二抗孵育：使用HRP标记的抗鼠IgG二抗（1:5000–1:10000）在室温下孵育1小时。
7. 检测：用TBST洗涤3次，每次10分钟，然后用ECL底物显色，于胶片或数字成像仪上成像。

AREL1预期条带大小：约100 kDa（请以产品说明书为准，确切分子量有待确认）。