CD21 小鼠单克隆抗体:科研用途常见问题解答
CD21 小鼠单克隆抗体:科研用途常见问题解答
CD21 Mouse mAb是一种靶向CD21抗原(补体受体2,CR2)的鼠源单克隆抗体,广泛应用于免疫学研究中B淋巴细胞群体的鉴定、表征及补体介导免疫应答的研究。
- 产品名称
- CD21鼠单克隆抗体
- 货号
- Ab348616
- 宿主种属
- 小鼠
- 抗体类型
- 单克隆抗体(mAb)
- 靶抗原
- CD21(补体受体2,CR2)
- 参考克隆
- absea#KC-2416
CD21是什么,为何重要?
CD21,又称补体受体2(CR2),由CR2基因编码,是一种主要表达于成熟B淋巴细胞、滤泡树突状细胞及部分T淋巴细胞表面的糖蛋白。它能与补体片段iC3b、C3d和C3dg结合,也可与EB病毒(EBV)糖蛋白gp350结合,因此在固有免疫和适应性免疫中均发挥关键作用。
在B细胞中,CD21与CD19和CD81(TAPA-1)共同构成B细胞共受体复合物。CD21与B细胞受体(BCR)的协同连接可将B细胞活化阈值降低数个数量级,从而放大体液免疫应答。因此,CD21是鉴定淋巴组织中成熟初始B细胞、生发中心B细胞及边缘区B细胞的重要标志物。
CD21鼠单克隆抗体的典型应用
CD21鼠单克隆抗体(Ab348616)适用于多种标准免疫学及细胞生物学技术,常见应用包括:
- 流式细胞术(FC):对外周血、脾脏、淋巴结和骨髓中B淋巴细胞亚群进行免疫表型分析。CD21表达水平有助于区分滤泡B细胞(CD21int)、边缘区B细胞(CD21hi)和过渡型B细胞(CD21lo)。
- 免疫组织化学(IHC):检测淋巴器官福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织切片中CD21阳性B细胞及滤泡树突状细胞网络。
- 免疫荧光(IF):可视化细胞表面及组织切片中CD21的分布。
- 蛋白质印迹(WB):在变性条件下检测CD21蛋白,具体效果取决于抗体克隆在还原条件下的表现。
使用前请查阅Ab348616的具体产品说明书,以确认已验证的应用信息及推荐稀释比例。
储存、处理与稳定性
单克隆抗体的正确储存与处理对于长期维持其活性和特异性至关重要。CD21鼠单克隆抗体的一般最佳操作指南如下:
- 短期储存(不超过1个月):在4°C避光保存。
- 长期储存:分装成单次使用量,于−20°C或−80°C保存,避免反复冻融,以防抗体性能下降。
- 缓冲液:抗体通常以含载体蛋白(如BSA或甘油)和防腐剂(如叠氮化钠)的PBS配制。含叠氮化钠的制剂不得用于细胞培养或与HRP标记的二抗联用。
- 操作:实验过程中置于冰上;开封前短暂离心以汇集内容物。
请参阅Ab348616的质量检验报告(CoA)和产品说明书,以获取适用于您所在批次的确切配方、浓度和有效期信息。
常见问题排查
若使用CD21鼠单克隆抗体时结果不理想,请参考以下排查步骤:
- 背景过高:加强封闭(例如使用5%二抗宿主种属来源的正常血清);优化抗体稀释比例;确保充分洗涤。
- 无信号或信号弱:确认目标细胞类型或组织是否表达CD21;检查抗体批次活性,避免使用经历冻融降解的抗体;确认二抗适用于鼠源一抗;IHC时验证抗原修复方法(热诱导法与酶消化法)。
- WB非特异性条带:CD21是一种大分子糖蛋白,由于糖基化修饰,实际分子量可能高于预测值;使用适当的阳性对照(如Raji或Ramos B细胞裂解液)。
- 流式细胞术中的细胞聚集:上机前用35–40 µm细胞滤网过滤样品;加入活性染料以仅圈门活细胞。
如问题持续存在,请联系Aladdin Scientific技术支持团队获取针对具体应用的指导。
订购与法规信息
CD21鼠单克隆抗体可通过Aladdin Scientific购买,货号为Ab348616。本产品仅供科学研究使用(RUO),未经批准用于人体或动物的诊断或治疗。
如需订购,请访问Aladdin Scientific官网,通过货号Ab348616搜索,或联系您所在地区的销售代表。如需大批量采购或定制偶联服务,请联系我们的销售团队。使用前请阅读安全数据表(SDS),并确保符合贵机构关于动物源性生物试剂使用的生物安全法规要求。
常见问题
CD21鼠单克隆抗体(Ab348616)与哪些种属发生反应?
Ab348616的种属反应性需以官方产品说明书为准,具体取决于所用克隆(absea#KC-2416)。靶向CD21的鼠单克隆抗体通常对人CD21具有反应性,但与小鼠、大鼠或其他种属的交叉反应性需按批次验证。请从Aladdin Scientific产品页面下载最新说明书以获取已确认的反应性数据。
CD21鼠单克隆抗体用于流式细胞术的推荐稀释比例是多少?
最佳稀释比例因应用、仪器和样品类型而异,需通过实验摸索确定。流式细胞术的一般起始参考值为每100 µL反应体系中每10⁶个细胞使用1–5 µg抗体;但Ab348616的具体推荐稀释比例请以产品说明书为准。建议进行抗体滴度实验,以确定适合您实验条件的最佳浓度。
CD21鼠单克隆抗体能否用于FFPE组织切片的免疫组织化学检测?
CD21抗体常用于IHC,对淋巴组织FFPE切片中的B细胞滤泡及滤泡树突状细胞网络进行染色。通常需要进行抗原修复;热诱导表位修复(HIER)常采用柠檬酸缓冲液(pH 6.0)或EDTA缓冲液(pH 9.0)。请查阅Ab348616说明书确认IHC是否为已验证应用,并进行优化实验以确定适合您组织类型的最佳修复方法和抗体稀释比例。
如何储存CD21鼠单克隆抗体以最大程度延长其有效期?
为最大程度延长有效期,收到抗体后应立即分装为单次使用量,避免反复冻融,并于−20°C长期保存。短期储存(不超过一个月)可在4°C避光保存。避免光照和温度波动。请务必参照Ab348616产品标签和说明书上的具体储存说明,因配方差异可能影响推荐储存条件。
CD21鼠单克隆抗体(Ab348616)是否适用于临床诊断,还是仅限科学研究?
Ab348616严格限于科学研究用途(RUO),未经体外诊断(IVD)验证、审批或批准,不可用于任何临床应用。未经相应监管机构授权,不得在临床实验室用于诊断目的。研究人员应确保符合所有相关机构及国家关于生物试剂使用的法规要求。
参考文献
- Fearon DT, Carroll MC. Regulation of B lymphocyte responses to foreign and self-antigens by the CD19/CD21 complex. Annual Review of Immunology. 2000;18:393–422.
- Tedder TF, Inaoki M, Sato S. The CD19-CD21 complex regulates signal transduction thresholds governing humoral immunity and autoimmunity. Immunity. 1997;6(2):107–118.
- Aladdin Scientific. Ab348616 – CD21 Mouse mAb product datasheet. Accessed via Aladdin Scientific official website.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)