CFSE 是一种可用于细胞追踪、增殖研究和细胞运动研究的试剂。在被动扩散到细胞中后，它被转化为荧光羧基荧光分子，因为它的乙酸酯基团被细胞内酯酶裂解。荧光 CFSE 在细胞内保留很长时间，因为分子与细胞内蛋白质形成稳定的共价交联。在每次细胞分裂时，CFSE 荧光的强度减半。该分子的激发峰为 494 nm，发射峰为 521 nm，可与含有甲醛的标准固定剂和含有皂苷的通透缓冲液一起使用。

用 90 uL 的无水 DMSO 将 CFSE 重组为 10 mM 的库存浓度。复溶后，产品应在-20°C 下干燥，避光保存。应避免冻融循环，试剂应在 6 个月内使用。

方案

1、安排感兴趣的细胞的单细胞悬浮液。

2、在无菌 1 X PBS 溶液中洗涤细胞两次，以去除血清并以 1-10 x 10 ⁶ 个细胞/mL重新悬浮室温 PBS 中的细胞。

3、将 CFSE 溶液添加到所选的最终浓度。如果需要 5 uM 的最终浓度，则每 mL 细胞添加 0.5 uL 的 10 mM 重组溶液。
4、立即混合并在室温下避光孵育 10-20 分钟。

5、要淬灭染色过程，加入 4-5 体积的冷完全培养基并在冰上孵育 5 分钟。

6、通过离心沉淀细胞。弃去上清液。

7、用完整的培养基清洗细胞两次。