ELISA 样品采集和储存
ELISA 样品采集和储存
腹水
1.通过在2–8°C下10000x g下离心15分钟来去除颗粒,并立即进行测定或等分,并将样品储存在-20°C下。
避免重复冻融循环。
母乳
1.在2–8°C下,在10000x g下离心15分钟。
2.收集含水部分,再离心两次,共3个循环。
3.立即测定或等分并储存在≥ -20°C。
避免重复冻融循环。
支气管肺泡灌洗液
1.通过在2–8°C下10000x g下离心15分钟来去除颗粒,并立即进行测定或等分,并将样品储存在-20°C下。
避免重复冻融循环。
细胞培养上清液
1.通过在1000 x g,2–8°C下离心15分钟来去除颗粒,并立即进行测定或等分,并将样品储存在-20°C或-80°C下。
避免重复冻融循环。
细胞溶解物
1.取出培养基,用冰冷的PBS(pH 7.0-7.4)冲洗细胞一次。
2.刮去平板上的细胞并转移到适当的试管中。
3.用1xPBS(pH 7.0-7.4)稀释细胞悬浮液,直到细胞浓度达到1亿/毫升,然后在-20°C下储存过夜。
4.在两次冻融循环以打破细胞膜后,将细胞裂解物在5000 g、2-8°C下离心5分钟。
5.收集上清液。
6.应立即对细胞裂解物进行分析或等分,并在-20°C下储存。
7.试验前解冻后再次离心样品。
避免重复冻融循环。
脑脊液(CSF)
1.通过在2–8°C下10000x g下离心15分钟来去除颗粒,并立即进行测定或等分,并将样品储存在-20°C下。
避免重复冻融循环。
红细胞裂解液
1.在2–8°C下以2000rpm离心100ul血样5min,以收集红细胞。
2.去除上清液并添加10ml冰冷的PBS(pH 7.0-7.4),然后在-20°C下储存过夜。
3.经过三次冻融循环以打破细胞膜后,将细胞裂解物在10000rpm、2–8°C下离心10分钟。
4.收集上清液。
5.红细胞裂解物应在稀释5000倍后立即进行分析,或等分并储存在-20°C下。
6.试验前解冻后再次离心样品。
避免重复冻融循环。
血浆
1.使用EDTA或肝素作为抗凝剂收集血浆。
2.在收集后30分钟内,在1000 x g,2–8°C的条件下离心15分钟。
3.立即测定或等分并将样品储存在-20°C或-80°C。
4.试验前解冻后再次离心样品。
避免重复冻融循环。
胸腔积液
1.通过在2–8°C下10000x g下离心15分钟来去除颗粒,并立即进行测定或等分,并将样品储存在-20°C下。
避免重复冻融循环。
唾液
1.通过在2–8°C下10000x g下离心15分钟来去除颗粒,并立即进行测定或等分,并将样品储存在-20°C下。
避免重复冻融循环。
血清
1.使用血清分离管(SST),让样本凝结30分钟,然后在1000 x g,2–8°C下离心15分钟。
2.取出血清并立即进行测定,或等分并将样品储存在-20°C或-80°C。
3.试验前解冻后再次离心样品。
避免重复冻融循环。
固体样品(粪便)
1.用样品稀释剂(1:10)配制。这可以通过向1ml样品稀释剂中添加0.1g固体样品来实现。
2.离心并收集上清液进行测定。
组织匀浆
1.用1X PBS冲洗1.100mg组织,在1mL 1X PBS中均质,并在-20°C下储存过夜。
2.在进行两次冻融循环以打破细胞膜后,将匀浆在5000 x g,2-8°C下离心5分钟。
3.对上清液进行分析并立即清除
4.或者,在-20°C或-80°C下等分并储存样品。
5.试验前解冻后再次离心样品。
避免重复冻融循环。
尿
1.使用代谢笼收集尿液。
2.通过在1000x g,2–8°C下离心15分钟来去除任何颗粒,并立即进行测定或等分,并将样品储存在-20°C或-80°C下。
3.化验前再次离心,以去除储存后可能出现的任何额外沉淀物。
避免重复冻融循环。
危险品化学品经营许可证(带存储)