实验方案(Protocols)

ELISA 样品采集和储存

腹水

1.通过在2–8°C下10000x g下离心15分钟来去除颗粒,并立即进行测定或等分,并将样品储存在-20°C下。

避免重复冻融循环。


母乳

1.在2–8°C下,在10000x g下离心15分钟。

2.收集含水部分,再离心两次,共3个循环。

3.立即测定或等分并储存在≥ -20°C。

避免重复冻融循环。


支气管肺泡灌洗液

1.通过在2–8°C下10000x g下离心15分钟来去除颗粒,并立即进行测定或等分,并将样品储存在-20°C下。

避免重复冻融循环。


细胞培养上清液

1.通过在1000 x g,2–8°C下离心15分钟来去除颗粒,并立即进行测定或等分,并将样品储存在-20°C或-80°C下。

避免重复冻融循环。


细胞溶解物

1.取出培养基,用冰冷的PBS(pH 7.0-7.4)冲洗细胞一次。

2.刮去平板上的细胞并转移到适当的试管中。

3.用1xPBS(pH 7.0-7.4)稀释细胞悬浮液,直到细胞浓度达到1亿/毫升,然后在-20°C下储存过夜。

4.在两次冻融循环以打破细胞膜后,将细胞裂解物在5000 g、2-8°C下离心5分钟。

5.收集上清液。

6.应立即对细胞裂解物进行分析或等分,并在-20°C下储存。

7.试验前解冻后再次离心样品。

避免重复冻融循环。


脑脊液(CSF)

1.通过在2–8°C下10000x g下离心15分钟来去除颗粒,并立即进行测定或等分,并将样品储存在-20°C下。

避免重复冻融循环。


红细胞裂解液

1.在2–8°C下以2000rpm离心100ul血样5min,以收集红细胞。

2.去除上清液并添加10ml冰冷的PBS(pH 7.0-7.4),然后在-20°C下储存过夜。

3.经过三次冻融循环以打破细胞膜后,将细胞裂解物在10000rpm、2–8°C下离心10分钟。

4.收集上清液。

5.红细胞裂解物应在稀释5000倍后立即进行分析,或等分并储存在-20°C下。

6.试验前解冻后再次离心样品。

避免重复冻融循环。


血浆

1.使用EDTA或肝素作为抗凝剂收集血浆。

2.在收集后30分钟内,在1000 x g,2–8°C的条件下离心15分钟。

3.立即测定或等分并将样品储存在-20°C或-80°C。

4.试验前解冻后再次离心样品。

避免重复冻融循环。


胸腔积液

1.通过在2–8°C下10000x g下离心15分钟来去除颗粒,并立即进行测定或等分,并将样品储存在-20°C下。

避免重复冻融循环。


唾液

1.通过在2–8°C下10000x g下离心15分钟来去除颗粒,并立即进行测定或等分,并将样品储存在-20°C下。

避免重复冻融循环。


血清

1.使用血清分离管(SST),让样本凝结30分钟,然后在1000 x g,2–8°C下离心15分钟。

2.取出血清并立即进行测定,或等分并将样品储存在-20°C或-80°C。

3.试验前解冻后再次离心样品。

避免重复冻融循环。


固体样品(粪便)

1.用样品稀释剂(1:10)配制。这可以通过向1ml样品稀释剂中添加0.1g固体样品来实现。

2.离心并收集上清液进行测定。


组织匀浆

1.用1X PBS冲洗1.100mg组织,在1mL 1X PBS中均质,并在-20°C下储存过夜。

2.在进行两次冻融循环以打破细胞膜后,将匀浆在5000 x g,2-8°C下离心5分钟。

3.对上清液进行分析并立即清除

4.或者,在-20°C或-80°C下等分并储存样品。

5.试验前解冻后再次离心样品。

避免重复冻融循环。


尿

1.使用代谢笼收集尿液。

2.通过在1000x g,2–8°C下离心15分钟来去除任何颗粒,并立即进行测定或等分,并将样品储存在-20°C或-80°C下。

3.化验前再次离心,以去除储存后可能出现的任何额外沉淀物。

避免重复冻融循环。

目录: 实验方案(Protocols)

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《ELISA 样品采集和储存》. 阿拉丁知识库,更新于 2022年7月22日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/elisa-sample-collection-&-storage.html
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