通过比色法测定水杨酸的半衰期，水杨酸根与铁离子起反应，形成一种紫色络合物，根据紫色络合物的颜色进行比色得光密度，将光密度代入公式计算得半衰期。本实验目的是掌握药物血浆半衰期（t1/2）的测定方法及计算血浆半衰期（t1/2）

操作方法

比色法

原理

水杨酸根与铁离子起反应，形成一种紫色络合物，根据紫色络合物的颜色进行比色得光密度，将光密度代入公式计算得半衰期。

材料与仪器

家兔
水杨酸钠溶液 三氯醋酸溶液 三氯化铁溶液 肝素溶液
试管 离心管 刻度吸管 注射器 721 型分光光度计 离心机 吸管架 酒精棉球 干棉花 竹签

步骤

1.  取兔一只，称体重，用经0.5%肝素湿润过的注射器从兔心取血2 ml（作对照血样），然后从耳静脉注入10%水杨酸纳溶液1.5 m/kg(150 mg/kg)。

2.  注射药后５分钟和35 分钟再从心脏取血２ml，将上述三次抽的血分别放入三支预先装有7ml 三氯醋酸的离心管搅拌离心（1500 转/分）5 分钟，使血浆蛋白沉淀。

3.  准确吸取上清液各6 ml 分别置入试管内，每管加三氯化铁溶液0.6 ml（或12 滴）摇匀后即可显色。

4.  以药前管为对照，在分光光度计上，用波长510 nm,1 cm 光径比色皿进行比色，读给药后两管上清液的光密度（x1、x2）。

5.  根据下列公式求半衰期t =1/2 (x1、x2为药后两次血浓度的光密度，t为两次取血间隔时间)

注意事项

⒈  心脏取血：将兔仰卧，以左手拇指在胸骨一侧，食指及中指于胸骨另侧固定心脏，在心尖搏动最明显处将针与胸壁垂直刺入胸腔，当持针手感到心脏搏动时，再稍刺入心脏，然后抽出血液。取血时，宜用7—8 号针头，针头直出直入，勿在胸腔内左右探索。⒉  为防止凝血，心脏取血时，注射器内先用0.5%肝素溶液湿润。

常见问题

一、测定药物的半衰期有何临床意义？

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