Q:每只小鼠应给予多少荧光素？

         根据我们的《体内荧光素手册》，推荐剂量为每克体重 10 µl 的 15 mg/ml 荧光素储备液（10 µl/g）。例如，一只 20 g 的小鼠（成年小鼠平均体重范围 17–25 g）通常会接受约 200 µl，对应标准的 150 mg/kg 注射剂量。

Q:一支分装好的荧光素试管可以给多少只小鼠用？

         这取决于荧光素的分装方式。如上所述，一只小鼠的常用体积约为 200 µl 储备液。你可以将荧光素分装为单只动物使用的 200 µl 小管，或分装为 1–2 ml 的大管以供多只动物使用。

Q:一批荧光素储备液可以处理多少只动物？

         按照我们的配制指南，15 mg/ml 的储备液是通过将 1 g 荧光素溶解在 66.6 ml DPBS 中制得的。最终体积接近 66.6 ml，因此可按以下计算：

• 对于 20 g 小鼠，每只注射 200 µl 储备液；
• 66.6 ml = 66,600 µl 总体积；
• 66,600 µl ÷ 200 µl ≈ 333 只小鼠。

Q:体内应用的注射途径有哪些？

         主要有三种方法：

• 腹腔注射（IP）：注射到腹腔内；
• 静脉注射（IV）：直接注射到尾静脉；
• 皮下注射（SQ）：注射到皮下组织（位于真皮和表皮之下）。

         我们的《体内荧光素手册》详细介绍了每种方法，包括操作步骤及各注射途径后的推荐成像时间。

Q:如果这是我第一次做体内实验，应订购多少荧光素？

         如果你是首次在体内实验中使用荧光素，建议从最小包装规格（100 mg）开始。这可以让你评估产品质量并进行小规模的预实验。你还可以根据实验计划和预期研究周期来计算所需量。

         在决定订购量时，请注意：

• 储存与稳定性：D-荧光素钾盐和钠盐粉末可在 –20 °C（避光）下保存至少一年，干燥条件下可进一步延长保质期。配制好的储备液在至少 5 次冻融循环内保持稳定。
• 单只动物用量与动物数量：请参考问题1单鼠用量和问题3的每克荧光素可供实验动物数量的计算。

Q:成像需要多长时间？

         应按阶段来考虑，而不是单一总时间：

         1. 现配制新鲜储备液或解冻分装管；

         2. 注射动物；

         3. 对每个模型进行荧光素酶活性动力学曲线检测，以确定成像峰值时间。对于 IP 和 SQ 模型，每 5–10 分钟拍摄一次连续图像，持续 40–60 分钟；IV 模型每 1–5 分钟拍摄一次，持续 20–30 分钟；

         4. 根据动力学曲线确定最佳成像时间点。大多数模型在 IP 或 SQ 注射后 10–520 分钟达到峰值，而 IV 注射后仅需 2–5 分钟；

         5. 一旦确定动力学曲线和成像时间点，就可以在正式实验中开始这些步骤。

Q:荧光素是由真正的萤火虫制成的吗？

         我们的荧光素为重组生产，不使用也不会伤害任何萤火虫。

Q:哪些细胞系适用？

         任何表达萤火虫荧光素酶的细胞系都可与 Aladdin 的 D-荧光素钾盐或钠盐配方配合使用。

Q:体内实验中钾盐好还是钠盐好？

         两者主要在物理性质上有差异。钠盐颗粒感稍强，溶解速度略快于钾盐。大多数研究人员在体内实验中选择钾盐，但两者的性能同样优秀。

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