PDLIM5 小鼠单克隆抗体:应用、特异性及操作指南
PDLIM5 小鼠单克隆抗体:应用、特异性及操作指南
PDLIM5 Mouse mAb是一种针对PDZ和LIM结构域蛋白5(PDLIM5)的高度特异性单克隆抗体,可在多种免疫学和生化检测中实现可靠的靶标检测与功能研究。
- 产品名称
- PDLIM5鼠单克隆抗体
- 货号
- Ab349189
- 宿主物种
- 小鼠
- 抗体形式
- 单克隆抗体(mAb)
- 靶标蛋白
- PDLIM5(PDZ和LIM结构域蛋白5)
- 主要参考编号
- absea#KC-1903
靶标生物学:PDLIM5简介
PDLIM5(PDZ和LIM结构域蛋白5),又称ENH(Enigma同源蛋白),是属于PDZ-LIM家族的支架接头蛋白。其结构包含N端PDZ结构域和多个C端LIM结构域,这些结构域介导蛋白质间相互作用,对细胞骨架组织和胞内信号转导至关重要。
PDLIM5在多种组织中表达,包括心脏、骨骼肌、脑和肾脏,参与肌动蛋白细胞骨架的组装和维持。通过其LIM结构域,PDLIM5与蛋白激酶C(PKC)亚型及其他信号分子相互作用,成为心脏肥大和应激反应通路的重要调控因子。
PDLIM5的表达失调与心血管疾病、精神疾病和肿瘤密切相关,使其成为转化研究中日益重要的靶标。
抗体特性与验证
Ab349189是一种针对PDLIM5制备的鼠单克隆抗体(mAb)。与多克隆抗体相比,单克隆抗体具有出色的批间一致性和表位特异性,是定量和可重复实验的首选试剂形式。
单克隆抗体形式确保制品中每个分子均识别PDLIM5上的同一表位,从而最大程度减少背景信号及与PDZ-LIM家族近亲成员(如PDLIM1、PDLIM2或PDLIM7)的交叉反应。使用Ab349189的研究人员可期待在实验重复和不同实验室间获得一致的实验结果。
该抗体以供应商编号absea#KC-1903登记,可用于与经销商及制造商数据库交叉查阅。有关经验证的种属反应性、同型及推荐稀释度的最新信息,请参阅Aladdin Scientific Ab349189的官方产品说明书。
推荐应用与实验方案指南
PDLIM5鼠单克隆抗体(Ab349189)适用于哺乳动物细胞和组织研究中常用的免疫学检测方法。该类抗PDLIM5单克隆抗体的典型应用包括:
- 蛋白质印迹(WB):将细胞或组织裂解液经SDS-PAGE变性分离,转移至PVDF或硝酸纤维素膜后,以Ab349189进行检测。预期在PDLIM5预测分子量(约50–65 kDa,因异构体而异)处出现条带。务必包含已知表达PDLIM5的阳性对照裂解液,如心脏或脑组织。
- 免疫组织化学(IHC):适用于福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)或冷冻切片。FFPE样本可能需要进行抗原修复(常用热诱导法,柠檬酸盐缓冲液pH 6.0)。应通过实验摸索最适抗体浓度以获得最佳信噪比。
- 免疫沉淀(IP):将Ab349189加入预清除的细胞裂解液中,与Protein G或Protein A琼脂糖珠孵育,洗脱免疫复合物后进行WB或质谱分析。
应用特异性的经验证稀释度和推荐缓冲液请始终参考最新产品说明书,因其可能随新验证数据更新而调整。
储存、操作与质量注意事项
单克隆抗体的正确储存和操作对于保持试剂活性、确保数据重复性至关重要。对于Ab349189,除非产品说明书另有规定,请遵循以下通用最佳实践:
- 储存温度:长期保存请储存于–20 °C。首次解冻后分装成单次用量,避免反复冻融。
- 缓冲液兼容性:抗体通常以含载体蛋白(如BSA或甘油)的PBS或TBS缓冲液供应,以稳定免疫球蛋白。切勿单独用水稀释抗体储液。
- 工作液配制:使用当天在推荐检测缓冲液中现配工作液,未用完的稀释液应丢弃。
- 质量控制:Aladdin Scientific对每个抗体批次进行质控检测。批次特异性数据(如SDS-PAGE纯度、功能性ELISA效价)可应要求提供,或通过在线产品页面获取。
如遇异常结果,请联系Aladdin Scientific技术支持团队,并提供产品货号Ab349189及瓶签上的批次号。
常见问题
PDLIM5鼠单克隆抗体(Ab349189)的种属反应性如何?
Ab349189的经验证种属反应性请以Aladdin Scientific官网最新产品说明书为准。针对人源PDLIM5的鼠单克隆抗体因序列高度同源,通常对小鼠和大鼠同源蛋白具有交叉反应性,但每批次均需通过实验加以确认。
使用Ab349189进行蛋白质印迹时,推荐哪些阳性对照样品?
已记录高PDLIM5表达的组织或细胞裂解液是理想的阳性对照。根据已发表的表达数据,心脏组织、骨骼肌及脑裂解液常被用作阳性对照。在选择阳性对照前,请先确认您特定细胞或组织模型中的表达水平。
使用PDLIM5鼠单克隆抗体进行IHC时,如何排查高背景信号问题?
IHC中高背景通常由封闭不充分、一抗浓度过高或洗涤不彻底引起。可延长封闭时间(使用5–10%正常血清或BSA封闭1–2小时)、优化抗体稀释度,并确保各孵育步骤间充分洗涤。在小鼠组织上使用鼠源一抗时,建议使用小鼠-小鼠(M.O.M.)封闭试剂盒以降低内源性免疫球蛋白背景。
Ab349189能否用于免疫荧光(IF)或流式细胞术(FC)?
现有资料中尚未确认Ab349189适用于免疫荧光或流式细胞术。请参阅官方产品说明书或联系Aladdin Scientific技术支持,以确认该特定批次抗体是否已完成上述应用验证。
使用单克隆抗体与多克隆抗体检测PDLIM5有何区别?
Ab349189等单克隆抗体识别单一表位,具有高度特异性和出色的批间重复性,在定量检测中尤为重要。多克隆抗体可识别多个表位,在某些应用中可提供更强信号,但批次间变异性较大,与PDZ-LIM家族其他成员等相关蛋白发生交叉反应的风险也更高。
参考文献
- Aladdin Scientific product page: PDLIM5 Mouse mAb, SKU Ab349189 (absea#KC-1903).
- Nakagawa N et al. The LIM domain of enigma is involved in cardiac hypertrophy. J Mol Cell Cardiol. — General reference for PDLIM5/ENH biology; specific volume, pages and year require verification.
- Krcmery J et al. Nucleocytoplasmic functions of the PDZ-LIM protein family: new insights into organ development. Bioessays. — General PDZ-LIM family reference; specific details require verification.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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