PTN 小鼠单克隆抗体:筛选、操作与应用指南
PTN 小鼠单克隆抗体:筛选、操作与应用指南
PTN Mouse mAb是一种靶向多效营养因子(PTN)的小鼠源性单克隆抗体,以PBS为配方,适用于标准免疫学研究应用。
- 产品货号
- Ab350663
- 克隆参考编号
- KC-1700
- 宿主物种
- 小鼠
- 抗体形式
- 单克隆抗体(mAb)
- 配方
- 仅PBS(磷酸盐缓冲液)
- 靶抗原
- 多效营养因子(PTN)
PTN小鼠单克隆抗体概述
多效营养因子(PTN),又称肝素结合生长相关分子(HB-GAM),是一种分泌型生长因子,参与细胞增殖、分化和血管生成过程。PTN小鼠单克隆抗体(Ab350663,克隆号KC-1700)是一种靶向PTN的小鼠源性单克隆抗体,以磷酸盐缓冲液(PBS)供应。作为单克隆抗体,它具有高度特异性和批次间一致性,适合作为免疫检测的研究工具。从事肿瘤学、神经科学和发育生物学研究的科研人员通常使用抗PTN抗体来研究PTN的表达水平和信号通路。
储存、处理与稳定性指南
正确储存和处理PTN小鼠单克隆抗体对于维持抗体完整性和检测重复性至关重要。请遵循以下指南:
- 储存温度:长期储存请置于–20 °C。避免反复冻融,因为这会导致抗体变性并降低其结合活性。
- 分装:首次解冻后,分装为单次使用量,以减少冻融次数。在每个分装上清晰标注日期和浓度。
- 配方说明:本产品仅以PBS供应。未声明含有载体蛋白(如BSA)或防腐剂(如叠氮化钠);在用于细胞实验前,请查阅质量检验报告(CoA)核实确切配方,因为叠氮化钠具有细胞毒性。
- 工作液:实验当天新鲜配制稀释抗体溶液,使用适当的检测缓冲液,使用过程中置于冰上。
- 防止污染:使用无菌、低蛋白结合的离心管和移液枪头,避免储存液遭受微生物污染。
推荐应用方案
PTN小鼠单克隆抗体可适用于抗生长因子单克隆抗体常用的标准免疫检测技术。以下通用方案步骤仅供参考,需根据您的具体实验体系进行优化:
- 滴定/优化:通过梯度稀释,在每种应用(如蛋白质印迹、ELISA、免疫荧光、免疫组化)中凭经验确定最佳工作稀释度。单克隆抗体在WB中的典型起始范围为1:500–1:2000;在IHC中为1:50–1:200。这些仅为示例范围,需通过实验验证。
- 样本制备:在含蛋白酶抑制剂的适当裂解缓冲液中裂解细胞或匀浆组织。PTN为分泌蛋白,条件培养基也可作为合适的样本类型。
- 封闭:根据检测形式,用5%脱脂奶粉或3–5% BSA(溶于TBST)在室温下封闭1小时,以阻断非特异性结合。
- 一抗孵育:根据应用要求,将稀释后的PTN小鼠单克隆抗体(Ab350663)在4 °C过夜或室温孵育1小时。
- 检测:使用与HRP、荧光染料或其他报告分子偶联的适当抗小鼠二抗,与检测形式相匹配。
- 对照:始终设置阳性对照(PTN表达裂解液或重组PTN)、阴性对照(未转染裂解液或同型对照),以及在适用情况下设置无一抗对照。
注:Ab350663的经过验证的具体应用及推荐稀释度,请以Aladdin Scientific提供的产品说明书和CoA为准。
常见问题排查
如果在使用PTN小鼠单克隆抗体时观察到意外结果,请参阅以下故障排查指南:
| 问题 | 可能原因 | 建议措施 |
|---|---|---|
| 未检测到信号 | 抗体降解;稀释度不当;样本类型不兼容 | 检查储存条件;重新滴定抗体;用经验证的阳性对照确认样本中PTN的表达 |
| 背景过高 | 封闭不充分;抗体浓度过高;二抗交叉反应 | 延长封闭时间;降低一抗浓度;使用更严格的洗涤缓冲液 |
| 非特异性条带(WB) | 抗体浓度过高;转膜不完全 | 优化稀释度;用总蛋白染色法验证转膜效率 |
| 实验间结果不稳定 | 冻融损伤;试剂批次差异 | 收货后立即分装抗体;记录批次号;设置批间对照 |
质量控制与订购信息
PTN小鼠单克隆抗体(Ab350663)在质量控制条件下生产,每批产品在放行前均经过特性鉴定和性能验证。研究人员应:
- 索取所收批次的质量检验报告(CoA),以确认经验证的应用、推荐稀释度和配方详情。
- 在操作前查阅安全数据表(SDS),了解危害分类和安全处置信息。
- 如需特定应用指导或定制需求,请联系Aladdin Scientific技术支持。
订购信息:
- 货号:Ab350663
- 产品名称:PTN小鼠单克隆抗体
- 克隆号:KC-1700
- 配方:PBS
请通过Aladdin Scientific在线平台下订单,或联系您所在地区的销售代表了解价格、货期及批量优惠。
常见问题
PTN小鼠单克隆抗体(Ab350663)经验证适用于哪些应用?
Ab350663经验证的具体应用请以Aladdin Scientific提供的产品说明书和质量检验报告(CoA)为准。抗PTN单克隆抗体的常见应用包括蛋白质印迹(WB)、ELISA、免疫荧光(IF)和免疫组化(IHC),但每种应用和样本类型均需经过实验优化。
如何储存PTN小鼠单克隆抗体以确保最佳稳定性?
长期保存请将PTN小鼠单克隆抗体储存于–20 °C。首次解冻后将抗体分装为单次使用量,以避免反复冻融。工作稀释液应在实验当天新鲜配制,使用时置于冰上。
PTN小鼠单克隆抗体Ab350663的配方是什么?
PTN小鼠单克隆抗体(Ab350663)仅以PBS(磷酸盐缓冲液)为配方。研究人员在用于敏感检测前,应查阅所收批次的质量检验报告(CoA),以确认是否含有其他辅料、防腐剂或载体蛋白。
使用PTN小鼠单克隆抗体时为何背景过高?
背景过高最常见的原因是封闭不充分、抗体浓度过高或二抗交叉反应。解决方法包括:延长封闭步骤、降低一抗浓度、增加洗涤次数或提高洗涤严格度,并确保二抗与物种匹配且经过检测形式验证。
PTN小鼠单克隆抗体能否用于检测条件培养基中的PTN?
PTN是一种分泌蛋白,因此细胞条件培养基是检测PTN的相关样本类型。根据表达水平,检测前可能需要超滤或免疫沉淀等浓缩步骤。请使用适当的阳性和阴性对照,验证抗体在该样本基质中的性能。
参考文献
- Aladdin Scientific. PTN Mouse mAb, SKU Ab350663, Clone KC-1700. Product datasheet and Certificate of Analysis. Aladdin Scientific.
- Deuel TF, Zhang N, Yeh HJ, Silos-Santiago I, Wang ZY. Pleiotrophin: a cytokine with diverse functions and a novel signaling pathway. Arch Biochem Biophys. 2002;397(2):162-171. doi:10.1006/abbi.2001.2705
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