重组人腺苷脱氨酶蛋白常见问题解答
重组人腺苷脱氨酶蛋白常见问题解答
Recombinant Human Adenosine Deaminase Protein 是嘌呤代谢中的关键酶,可催化腺苷不可逆脱氨生成肌苷,广泛应用于免疫学、生物化学及基因治疗研究。
- 产品名称
- 重组人腺苷脱氨酶蛋白
- 货号
- rp364764
- 生物学功能
- 催化腺苷及2-脱氧腺苷分别脱氨生成肌苷和2-脱氧肌苷
- 疾病相关性
- ADA缺乏可导致重症联合免疫缺陷病(SCID);ADA是酶替代疗法的重要靶点
- 表达系统
- 重组表达,采用异源表达系统(具体宿主请参阅产品说明书)
- 建议储存条件
- -20°C或-80°C保存;避免反复冻融(请以产品说明书为准)
什么是重组人腺苷脱氨酶蛋白?
腺苷脱氨酶(ADA;EC 3.5.4.4)是嘌呤补救途径中普遍存在的酶,可催化腺苷和2-脱氧腺苷不可逆水解脱氨,分别生成肌苷和2-脱氧肌苷。该反应对调节细胞内外腺苷水平至关重要,进而调控免疫细胞的发育和功能。
重组人腺苷脱氨酶蛋白(货号:rp364764)通过重组DNA技术生产,所得蛋白质与人源天然序列一致,可用作酶活性检测、免疫学研究及生化工作流程中的参考标准品。
ADA缺乏症是研究最为深入的先天性代谢缺陷之一,约占常染色体隐性遗传重症联合免疫缺陷病(SCID)病例总数的10–15%,因此重组ADA在转化医学和基础免疫学研究中具有重要价值。
如何储存和复溶该蛋白?
正确储存和处理重组人腺苷脱氨酶蛋白对保持酶活性和防止降解至关重要。
- 储存温度:冻干或液态蛋白短期使用可储存于-20°C,长期保存建议储存于-80°C。请以产品说明书(货号:rp364764)中的具体储存条件为准。
- 避免反复冻融:反复冻融会降低酶活性。首次复溶后应立即分装为单次使用量。
- 复溶方法:冻干产品应按产品说明书推荐缓冲液(通常为无菌PBS或厂家指定缓冲液)进行复溶。开瓶前将样品瓶恢复至室温,轻柔吹打溶解,切勿涡旋振荡。
- 载体蛋白:稀溶液储存时可加入0.1% BSA等载体蛋白以提高稳定性,使用前请确认其与目标实验的相容性。
复溶后若出现可见颗粒物或浑浊,则不应使用该蛋白,因为这可能提示蛋白聚集或污染。
该蛋白有哪些主要科研应用?
重组人腺苷脱氨酶蛋白在生命科学研究中具有多种用途:
- 酶活性检测:可通过分光光度法监测腺苷向肌苷的转化,或采用偶联酶法测定ADA活性。重组ADA可作为阳性对照和标准曲线组分。
- 免疫学研究:由于ADA对淋巴细胞发育至关重要,重组ADA被用于研究腺苷蓄积对T细胞和B细胞分化、增殖及信号通路的影响。
- ADA缺乏症疾病模型:研究人员利用重组人ADA拯救ADA缺陷细胞系或原代细胞,为ADA-SCID的发病机制研究提供依据。
- 药物发现与抑制剂筛选:ADA抑制剂(如喷司他丁、EHNA)具有重要药理学意义;重组ADA为高通量抑制剂筛选提供了可重复使用的酶来源。
- RNA及核苷酸研究:ADA可用于专项核苷酸代谢研究及体外转录质量控制流程中,从反应体系中去除腺苷。
请务必确认产品说明书中重组蛋白的活性和纯度规格符合您的具体实验设计要求。
质量、纯度与批次间一致性
研究级重组蛋白须满足明确的质量标准,以确保实验结果的可重复性。对于重组人腺苷脱氨酶蛋白(rp364764),研究人员应查阅随批次提供的质量检验报告(CoA),其通常包括以下内容:
- 纯度:通过SDS-PAGE或HPLC评估纯度,研究级重组蛋白通常报告为≥90%或更高(具体规格请参阅产品说明书)。
- 内毒素水平:内毒素含量对细胞实验和体内实验尤为重要,请查阅CoA中经LAL法检测的内毒素数值。
- 生物活性:通过酶活性检测确认比活力(单位/mg),证明蛋白质折叠正确且具有催化功能。
- 分子量确认:通过蛋白质印迹(Western blot)或质谱数据确认ADA蛋白的预期分子量。
若批次间差异性对您的实验存在影响,请联系Aladdin Scientific技术支持,申请获取额外质控数据,或预留足量同一批次产品以满足整个研究周期的需求。
订购、运输及技术支持
重组人腺苷脱氨酶蛋白可通过Aladdin Scientific购买,货号为rp364764。
- 订购:可直接通过Aladdin Scientific官网下单,或联系当地销售代表。如需大批量或定制配方,可按需申请。
- 运输:重组蛋白通常以干冰运输,以维持冷链完整性。请在下单时向Aladdin Scientific确认包装细节和运输条件,以满足您所在机构的收货要求。
- 货期:标准货期适用;请联系Aladdin Scientific了解当前库存情况及您所在地区的预计交货时间。
- 技术支持:如有实验设计、复溶问题排查或活性优化等方面的疑问,请携带批号和CoA联系Aladdin Scientific技术支持,以便获得高效协助。
- 退货与退款:请参阅Aladdin Scientific的退货与退款政策。附有实验数据记录和CoA的质量投诉将由技术团队进行审核。
常见问题
人腺苷脱氨酶(ADA)的生物学功能是什么?
ADA催化腺苷和2-脱氧腺苷不可逆脱氨,分别生成肌苷和2-脱氧肌苷,是嘌呤补救途径的重要组成部分。该反应对调控嘌呤核苷水平、维持正常淋巴细胞发育和免疫功能至关重要。ADA缺乏会导致脱氧腺苷代谢产物在淋巴细胞中毒性蓄积,引发重症联合免疫缺陷病(SCID)。
如何复溶重组人腺苷脱氨酶蛋白(rp364764)?
开瓶前先将样品瓶平衡至室温。按产品说明书规定,用推荐缓冲液(通常为无菌PBS或厂家指定缓冲液)按建议浓度复溶冻干蛋白。轻柔吹打混匀,切勿涡旋振荡,以防蛋白聚集和活性损失。复溶后立即分装为单次使用量,储存于-80°C,避免反复冻融。
我可以使用哪些方法验证ADA的酶活性?
ADA活性通常通过分光光度法检测,监测腺苷转化为肌苷过程中265 nm处吸光度的降低。此外,市售的偶联比色法或荧光法检测试剂盒也可使用。将重组人腺苷脱氨酶蛋白(rp364764)用作阳性对照时,请将实测比活力(单位/mg)与该批次质量检验报告(CoA)中标注的数值进行比对。
重组人腺苷脱氨酶蛋白是否适用于细胞实验?
是否适用于细胞实验取决于特定批次的内毒素水平和制剂配方。在用于细胞培养实验前,请务必查阅质量检验报告(CoA)中的内毒素含量(通常采用LAL法检测),因为高内毒素水平可能干扰细胞反应结果。如需了解rp364764内毒素规格的详细信息,请联系Aladdin Scientific技术支持。
如果复溶后蛋白出现浑浊或活性降低,应该怎么办?
复溶后出现浑浊可能提示由于缓冲液条件不当、温度冲击或涡旋混合导致蛋白聚集。如观察到浑浊,请勿使用该样品,并携带批号和CoA联系Aladdin Scientific客户服务进行问题排查或退换货评估。活性降低也可能由反复冻融、储存温度不当或使用不兼容缓冲液引起,请首先检查储存和操作条件。
参考文献
- Giblett ER, Anderson JE, Cohen F, Pollara B, Meuwissen HJ. Adenosine-deaminase deficiency in two patients with severely impaired cellular immunity. Lancet. 1972;2(7786):1067-1069.
- Hershfield MS. Adenosine deaminase deficiency: clinical expression, molecular basis, and therapy. Seminars in Hematology. 1998;35(4):291-298.
- Aladdin Scientific. Recombinant Human Adenosine Deaminase Protein, SKU rp364764. Product Datasheet. Aladdin Scientific.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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