重组人ASXL2蛋白:研究指南与实验方案
重组人ASXL2蛋白:研究指南与实验方案
Recombinant Human ASXL2 Protein是一种关键的表观遗传调控因子,参与多梳蛋白复合物的组装与组蛋白修饰,被广泛应用于染色质生物学及癌症表观遗传学研究。
- 产品名称
- 重组人ASXL2蛋白
- 货号
- rp376570
- 蛋白来源
- 人源(智人)
- 蛋白类别
- 重组表观遗传调控蛋白
- 主要应用
- 染色质生物学、表观遗传学研究、蛋白质相互作用研究
- 储存建议
- 避免反复冻融;按数据表中建议温度储存
背景:ASXL2的生物学功能与重要性
ASXL2(额外性梳状蛋白类似物2)是ASXL蛋白家族成员,通过与多梳抑制复合物(PRCs)及三胸组蛋白的相互作用,在表观遗传调控中发挥关键作用。ASXL2作为支架组分,促进组蛋白H2A泛素化并调节H3K27甲基化状态,从而影响对发育与分化至关重要的基因沉默和激活程序。
ASXL2的异常调控与血液系统恶性肿瘤及发育障碍密切相关,使其成为癌症表观遗传学与转化研究的重要靶点。重组人ASXL2蛋白使研究人员能够在可控的体外环境中研究其生化活性、结合配体及调控机制。
复溶与操作规范
妥善处理重组人ASXL2蛋白对于保持其结构完整性和生物学活性至关重要。请遵循以下操作规范以确保最佳实验效果:
- 复溶:开封前短暂离心小瓶。将冻干蛋白复溶于无菌超纯水或厂家推荐缓冲液中,室温平衡数分钟后轻柔混匀,勿涡旋。
- 浓度:根据实验需求配制适当浓度的工作液。具体浓度建议请参阅产品数据表(absea#PP-10118)。
- 分装:复溶后立即进行单次使用分装,以减少反复冻融导致的降解。
- 储存:按数据表说明储存复溶蛋白;冻干品应按指示条件保存至使用前。
- 载体蛋白:添加BSA等载体蛋白(0.1–0.5%)可增强长期储存稳定性;使用前请确认其与下游实验的兼容性。
操作过程中始终置于冰上,并使用低蛋白结合管以减少吸附损失。
在表观遗传学与染色质研究中的应用
重组人ASXL2蛋白支持表观遗传学与染色质生物学领域的多种研究应用:
- 蛋白质相互作用研究:通过免疫共沉淀(Co-IP)、pull-down实验和表面等离子体共振(SPR)表征ASXL2在PRC1/PRC2复合物中的结合伴侣。
- 酶活性检测:体外组蛋白泛素化与去泛素化实验,解析ASXL2依赖性染色质修饰通路。
- 结构生物学:作为冷冻电镜或X射线晶体学研究的组分,用于解析高级染色质调控复合物的结构。
- 抗体验证:作为蛋白质印迹(Western blot)、ELISA及免疫荧光实验的阳性对照抗原,用于抗体开发和特异性验证。
- 无细胞转录实验:在无细胞系统中重建染色质调控回路,研究转录抑制机制。
- 药物发现:作为靶蛋白用于小分子筛选,旨在破坏血液肿瘤中ASXL2的致癌相互作用。
质量控制与实验注意事项
为获得重组人ASXL2蛋白实验的可重复结果,研究人员应纳入以下质量控制措施:
- 纯度验证:在功能实验前通过SDS-PAGE确认蛋白纯度。产品数据表中提供预期纯度和分子量信息。
- 活性验证:在大规模实验前,使用与实验系统相关的功能实验验证蛋白活性。
- 批次间一致性:记录所有实验的批号。更换批次时,进行并行对比实验以确认性能等效。
- 内毒素水平:细胞实验中,应确认内毒素水平在检验证书(COA)规定的可接受范围内。
- 阴性对照:始终设置适当的阴性对照(如热灭活蛋白或纯缓冲液),以区分特异性活性与背景信号。
请参阅每批rp376570随附的产品数据表和COA,获取批次特异性质量数据。
常见问题
重组人ASXL2蛋白的推荐复溶缓冲液是什么?
rp376570的推荐复溶缓冲液和用量详见产品数据表。通常,无菌超纯水或生理缓冲液(如PBS)均适用;但请务必参阅批次特异性数据表以获取准确操作说明,以保护蛋白活性。
如何储存重组人ASXL2蛋白以维持其稳定性?
按数据表指示条件储存冻干蛋白。复溶后,分装为单次使用量并按产品文件中标注的温度储存。避免反复冻融,因为这会降低蛋白活性并导致聚集。
重组人ASXL2蛋白已验证适用于哪些应用?
重组人ASXL2蛋白(rp376570)适用于蛋白质相互作用实验、体外组蛋白修饰研究、抗体验证、结构生物学实验,以及作为靶向表观遗传通路药物发现的研究工具。完整的已验证应用列表请参阅产品数据表。
重组人ASXL2蛋白可用于细胞实验吗?
能否用于细胞实验取决于内毒素水平和制剂相容性。在细胞培养系统中使用前,请查阅检验证书(COA)中的内毒素规格。具体细胞实验应用指导请参阅产品数据表。
收到重组人ASXL2蛋白后如何验证其质量?
收货后,检查小瓶是否有可见损坏,并对照COA确认批号。通过SDS-PAGE验证纯度和表观分子量。如需功能确认,使用适合实验系统的活性检测方法,并将结果与产品数据表中的规格进行比较。
参考文献
- Aladdin Scientific. Recombinant Human ASXL2 Protein, SKU rp376570. Product Datasheet (absea#PP-10118).
- Micol J-B, Abdel-Wahab O. The Role of Additional Sex Combs-Like Proteins in Cancer. Cold Spring Harb Perspect Med. 2016.
- Sahtoe DD, van Dijk WJ, Ekkebus R, Ovaa H, Sixma TK. BAP1/ASXL1 recruitment and activation for H2A deubiquitination. Nat Commun. 2016.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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