ASXL3概述及其生物学意义

ASXL3（Additional Sex Combs-Like 3）是ASXL蛋白家族的成员，通过参与多梳抑制复合物（PRCs）在表观遗传调控中发挥重要作用。这些复合物介导组蛋白H2A泛素化（H2AK119ub1），并在发育和分化过程中促进基因的稳定沉默。

在人类中，ASXL家族包含三个成员——ASXL1、ASXL2和ASXL3——各自表现出不同的组织特异性表达模式，突变后也呈现不同表型。ASXL3突变与Bainbridge–Ropers综合征相关，该神经发育障碍以智力残疾和行为异常为特征，凸显了其在正常人类发育中的重要性。

Aladdin Scientific推出的重组人ASXL3蛋白（rp376647）可用于多梳复合物组装的体外生化研究、组蛋白结合实验及与染色质生物学和疾病研究相关的蛋白质-蛋白质相互作用分析。

复溶与储存指南

重组人ASXL3蛋白的正确复溶和储存对于维持生物活性及实验重现性至关重要。请遵循以下指南以确保最佳性能：

• 复溶：开瓶前短暂离心，将冻干物收集至瓶底。用无菌去离子水或产品说明书推荐的缓冲液（通常为PBS，pH 7.4）复溶至工作浓度。在室温下静置5–10分钟后轻柔混匀，避免剧烈涡旋。
• 工作分装：复溶后立即进行单次使用分装，以减少反复冻融次数，防止蛋白活性和完整性下降。
• 短期储存：如频繁使用，复溶后蛋白可在4 °C保存最长1周。
• 长期储存：长期保存时，如产品中尚未添加载体蛋白，建议加入0.1% BSA，并将分装品储存于−20 °C或−80 °C，避免反复冻融。
• 冻干粉形式：冻干蛋白应储存于−20 °C，在正确储存条件下自生产之日起稳定期最长可达12个月。

注意：请务必参阅产品专属数据表（absea#PP-10190）中的确切缓冲液组成、浓度及储存条件，因批次不同配方可能有所差异。

实验应用与操作方案

重组人ASXL3蛋白适用于多种体外生化及无细胞检测方案。以下为常见应用场景：

1. 蛋白质-蛋白质相互作用研究：用于pull-down实验或共免疫沉淀（co-IP）体系，表征ASXL3与BAP1（BRCA1相关蛋白1）及其他多梳复合物组分的相互作用。每次实验典型用量为0.5–2 µg，具体用量需实验优化。
2. 组蛋白结合实验：用于组蛋白肽pull-down实验，研究ASXL3 PHD指结构域对组蛋白H3修饰的识别。使用链霉亲和素磁珠上的生物素化组蛋白肽，每个反应使用1–5 µg重组蛋白。
3. 酶活性实验：作为PR-DUB（多梳抑制性去泛素化酶）复合物的组成成分，ASXL3可与BAP1共同体外重建去泛素化酶活性，使用泛素化H2A底物结合Western印迹或荧光检测方法验证活性。
4. Western印迹阳性对照：用作阳性对照，验证抗ASXL3抗体的性能。在SDS-PAGE中每泳道上样50–100 ng，按标准免疫印迹方案操作。
5. ELISA标准曲线：将重组蛋白进行梯度稀释，用作夹心ELISA的标准品，定量检测生物样本中内源性ASXL3的水平。

所有条件均需通过实验优化。请参阅产品数据表，了解rp376647批次经验证的具体应用。

质量、纯度与安全注意事项

在使用重组人ASXL3蛋白时，研究人员应注意以下质量和安全事项，以确保实验结果有效及实验室安全：

• 纯度：用于科研的重组蛋白通常通过SDS-PAGE和/或HPLC进行检测。请在使用前核实随货附带的质量检测报告（CoA）中的批次纯度数据。若纯度低于规格要求，请先暂停使用。
• 内毒素水平：对于基于细胞的实验，内毒素污染可能干扰实验结果。请查阅CoA中的鲎试剂（LAL）内毒素检测值。若您的实验对内毒素水平有严格要求，请联系Aladdin Scientific技术支持，了解低内毒素规格产品。
• 生物安全：重组人ASXL3蛋白仅供科学研究使用（RUO），不用于人体或动物的诊断或治疗。请依据机构生物安全规程处理重组蛋白，操作时须佩戴适当个人防护装备（PPE），包括手套和实验服。
• 载体蛋白与添加剂：产品配方中可能含有BSA或甘油作为稳定剂，使用前请确认这些成分与您的下游实验相容。
• 批次间一致性：对于长期研究，建议尽量从同一批次订购足量产品以减少变异。如需批次预留，请联系Aladdin Scientific采购团队。