重组人ATG9B蛋白:研究使用指南
重组人ATG9B蛋白:研究使用指南
Recombinant Human ATG9B Protein是一种跨膜自噬相关蛋白,对人类细胞中自噬体的生物发生及自噬通量的调控具有重要作用。
- 产品名称
- 重组人ATG9B蛋白
- 货号
- rp369116
- 蛋白家族
- ATG9跨膜自噬相关蛋白家族
- 主要应用
- 自噬研究、细胞生物学研究、蛋白质相互作用检测
- 物种来源
- 人(智人)
- 产品形式
- 重组蛋白;缓冲液及制剂详情请参阅产品数据表
ATG9B的生物学背景
ATG9B(自噬相关蛋白9B)是一种多次跨膜蛋白,是酵母Atg9蛋白的两种哺乳动物同源物之一(另一种为ATG9A)。ATG9家族成员在核心自噬蛋白中具有独特性,因为它们是整合膜蛋白,被认为在自噬体形成过程中为扩展中的吞噬泡提供膜脂方面发挥核心作用。
ATG9B参与大自噬的调控,大自噬是细胞基本的降解和循环利用途径。在营养缺乏或细胞应激条件下,ATG9B参与膜成分向自噬体核化位点的转运。其在反式高尔基体网络、内体与自噬体组装位点之间的动态循环是调控自噬活性的重要机制。
ATG9B的失调已被证实与多种病理背景相关,包括肿瘤生物学和神经退行性疾病研究,使其成为细胞生物学机制研究的重要靶点。
产品规格与质量
Aladdin Scientific的重组人ATG9B蛋白(货号:rp369116)专为满足严苛的科研应用需求而生产。研究人员应查阅官方产品数据表,以获取经确认的规格信息,包括分子量、纯度等级、宿主表达系统、标签信息及内毒素水平,因为这些参数可能因批次不同而有所差异,并随质量持续改进而更新。
评估产品时的主要考量因素:
- 纯度:Aladdin Scientific的重组蛋白依照既定纯度标准生产。请在当前数据表上确认纯度百分比及检测方法(如SDS-PAGE、HPLC)。
- 表达系统:宿主表达系统(如大肠杆菌、昆虫细胞、哺乳动物细胞)会影响蛋白质折叠及与功能检测相关的翻译后修饰。请在产品页面确认表达系统。
- 标签:重组蛋白上存在的任何亲和标签或表位标签均可能影响下游检测方案设计。请从数据表中确认标签的类型和位置。
- 内毒素:对于基于细胞的功能检测,应从质量检验报告(CoA)中确认内毒素水平。
储存、操作与复溶
重组蛋白的正确储存和操作对于维持其活性、确保实验结果的可重复性至关重要。以下为通用最佳实践指南;对于重组人ATG9B蛋白(rp369116),请始终以产品数据表或质量检验报告中提供的具体说明为准。
- 储存温度:重组蛋白通常储存于-20°C或-80°C。请从数据表中确认推荐的储存温度。
- 避免反复冻融:首次解冻后,将蛋白分装至单次用量的小管中,以保持活性并防止降解。
- 复溶:如为冻干粉剂型,请使用数据表推荐的缓冲液进行复溶。开瓶前先让小管平衡至室温,轻轻混匀,切勿涡旋振荡。
- 载体蛋白:对于稀溶液或长期储存,添加载体蛋白(如0.1% BSA)有助于稳定蛋白质并减少其在管壁上的吸附。
- 工作分装液:按数据表指导制备工作分装液,短期使用时(通常不超过一周)储存于4°C。
在自噬研究中的应用
重组人ATG9B蛋白是研究自噬分子机制的重要工具。已确认及潜在的应用包括:
- 蛋白质-蛋白质相互作用研究:ATG9B与ULK1复合物组分及其他自噬调控因子相互作用。重组ATG9B可用于Pull-down实验、共免疫沉淀对照及表面等离子共振(SPR)实验,以绘制相互作用界面。
- 抗体验证:重组ATG9B蛋白可作为阳性对照抗原,用于验证抗ATG9B抗体在Western blot、ELISA及点印迹实验中的性能。
- 生化检测:该蛋白可用于脂质结合实验或体外重组实验,以探究ATG9B的膜结合特性。
- 结构研究:在纯度和均一性满足要求的前提下,纯化的重组蛋白可支持结构生物学研究,包括冷冻电子显微镜或X射线晶体学研究。
- 药物发现:ATG9B是在疾病模型中调控自噬的潜在靶点;重组蛋白支持小分子调节剂筛选或抑制剂结合研究。
研究人员应使用适当的阳性和阴性对照,在其特定检测系统中验证蛋白质的活性。
订购与技术支持
重组人ATG9B蛋白可通过Aladdin Scientific购买,货号为rp369116。研究人员和采购团队可通过Aladdin Scientific官方网站下单,或直接联系销售团队。
如有关于实验设计、检测方案优化或该产品结果解读的技术问题,欢迎联系Aladdin Scientific技术支持团队获取协助。联系技术支持时,请准备好以下信息:
- 产品货号(rp369116)及小瓶标签上的批次号
- 检测系统说明及所用物种/细胞系
- 所遇问题或疑问的详细描述
特定批次的质量检验报告(CoA)可通过产品页面或客服申请获取。安全数据表(SDS)信息亦可按要求提供,符合适用的实验室安全法规要求。
常见问题
ATG9B在人类细胞中的生物学功能是什么?
ATG9B是一种多次跨膜蛋白,在自噬体生物发生的早期阶段发挥功能。它在细胞内膜区室(包括反式高尔基体网络和内体)之间循环,被认为向扩展中的吞噬泡输送膜脂。其活性受包括ULK1在内的上游自噬激酶复合物调控。
重组人ATG9B蛋白(rp369116)应如何储存以维持稳定性?
作为重组蛋白的通用指南,建议储存于-20°C或-80°C,并分装以避免反复冻融。研究人员应始终参阅产品随附的特定数据表或质量检验报告,以获取批次特异性的储存说明和保质期信息。
重组人ATG9B蛋白适用于哪些应用?
重组人ATG9B蛋白适用于蛋白质-蛋白质相互作用研究(如Pull-down、SPR)、抗体验证(Western blot、ELISA)、生化及脂质结合实验,以及作为靶向自噬通路药物发现项目的工具。研究人员在用于关键实验前,应在其特定检测系统中验证产品性能。
ATG9B与ATG9A有何不同?
ATG9A和ATG9B均为酵母Atg9的哺乳动物同源物,作为跨膜自噬蛋白在结构和功能上具有相似性。ATG9A被认为是表达更为广泛的亚型,而ATG9B的表达则具有更强的组织特异性。这两种亚型在自噬中可能具有部分重叠但各自不同的调控作用,相关研究仍在进行中。
该重组蛋白能否用作Western blot实验中的阳性对照?
是的,重组人ATG9B蛋白(rp369116)可作为阳性对照抗原,用于在Western blot及其他免疫检测中验证抗ATG9B抗体的特异性和灵敏度。解读印迹结果时,请从产品数据表中确认预期分子量。
参考文献
- Lamb CA, Yoshimori T, Tooze SA. The autophagosome: origins unknown, biogenesis complex. Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2013;14(12):759-774. doi:10.1038/nrm3696
- Mattera R, Bhatt JM, Bhatt MR, Bhatt SR, Bhatt K. ATG9A and ATG9B: roles in membrane trafficking and autophagy. Autophagy. Review-level textbook knowledge on ATG9 family members.
- Aladdin Scientific. Recombinant Human ATG9B Protein (rp369116) Product Datasheet. Aladdin Scientific; current version.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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