重组人ATL2蛋白:特性与实验室使用指南
重组人ATL2蛋白:特性与实验室使用指南
Recombinant Human ATL2 Protein is a dynamin-related GTPase essential for endoplasmic reticulum tubule network formation and homotypic ER membrane fusion, making it a critical tool for studying ER morphogenesis and hereditary spastic paraplegia pathways.
- 蛋白名称
- 重组人ATL2蛋白(Atlastin-2)
- 货号
- rp365297
- 蛋白家族
- 发动蛋白相关GTP酶超家族
- 主要生物学功能
- 同型内质网膜融合及内质网管状网络形成
- 主要研究领域
- 内质网形态学、膜融合、遗传性痉挛性截瘫(HSP)
- 推荐储存条件
- -80°C长期储存;避免反复冻融
蛋白概述与生物学意义
ATL2(Atlastin-2)是发动蛋白相关GTP酶atlastin家族的成员,在内质网(ER)网络的形态调控中发挥核心作用。ATL2介导内质网管状结构的同型融合,该过程对于建立和维持外周内质网特有的三维形态至关重要。ATL2在人体多种组织中广泛表达,通过GTP依赖性构象变化驱动相邻内质网管状结构之间的膜栓系和脂质双分子层融合。
ATL2基因突变与遗传性痉挛性截瘫(HSP)相关,HSP是一组以进行性下肢痉挛为特征的遗传性神经系统疾病。这一关联使ATL2成为研究神经退行性变、轴突内质网维持及细胞器形态发生的重要靶标蛋白。
产品规格与质量属性
重组人ATL2蛋白(货号:rp365297)采用重组表达系统生产,批次间一致性高,纯度满足生化及细胞生物学研究需求。研究人员应参阅随附的质量检验报告(CoA),获取包括纯度、浓度及活性验证在内的批次特异性数据。
主要质量考量包括:
- 纯度:通常通过SDS-PAGE和/或HPLC验证;批次特异性数值详见CoA。
- 制剂:蛋白储存于经优化的稳定缓冲液中;具体缓冲液组成请参阅产品说明书。
- 生物学活性:可通过标准孔雀绿法或NADH偶联GTP酶活性检测法确认GTP酶活性。
注意:使用前请从当前产品说明书或CoA确认纯度百分比及内毒素水平的具体数值。
储存、操作与复溶指南
正确操作重组人ATL2蛋白对于保持其结构完整性和酶活性至关重要。请遵循以下指南以确保最佳实验结果:
- 长期储存:于-80°C保存。请勿长期储存于-20°C,以免影响蛋白稳定性。
- 冻融次数:尽量减少冻融次数。首次解冻后应将蛋白分装为单次使用量,以避免活性损失。
- 操作条件:实验操作期间将蛋白置于冰上,避免长时间暴露于室温。
- 复溶:若产品为冻干形式,请按产品说明书推荐的缓冲液复溶。复溶前将小瓶在室温平衡数分钟,轻柔移液溶解,切勿涡旋振荡。
- 蛋白浓度:每次实验前通过280 nm吸光度或比色法(如BCA法或Bradford法)测定工作浓度。
请务必参阅产品专属说明书获取最准确的储存和操作说明,因制剂细节可能因批次而异。
实验应用与检测兼容性
重组人ATL2蛋白适用于内质网生物学和GTP酶生化领域的多种体外及无细胞研究应用,常见用途包括:
- GTP酶活性检测:ATL2以浓度和时间依赖性方式水解GTP,可采用标准比色法或荧光法GTP酶检测方案对抑制剂或结合配体进行表征。
- 脂质体融合实验:可将重组ATL2蛋白重组入蛋白脂质体,在体外研究膜栓系与融合过程,这是研究atlastin介导内质网融合的成熟模型。
- 蛋白-蛋白相互作用研究:ATL2与网状蛋白(reticulons)、DP1/Yop1p家族蛋白及其他内质网形态调控因子存在相互作用,可采用pull-down、共免疫沉淀及表面等离子体共振(SPR)等方法绘制相互作用图谱。
- 结构与生物物理研究:适用于圆二色(CD)光谱、动态光散射(DLS)及冷冻电镜样品制备,以研究其构象动态变化。
- Western blot标准品:可作为ATL2免疫印迹实验的阳性对照或分子量参考标准。
研究人员应根据具体实验体系对蛋白浓度、缓冲液条件和检测参数进行优化。
订购信息与技术支持
重组人ATL2蛋白可通过Aladdin Scientific订购,货号为rp365297。如需定价、库存、大批量采购及定制制剂方面的咨询,请直接联系Aladdin Scientific销售团队或通过产品页面提交申请。
Aladdin Scientific技术团队可提供检测方法开发、故障排除及方案优化等技术支持服务。联系技术支持时,请准备好您的批次号和CoA,以便获得快速协助。
所有产品仅供科学研究使用(RUO),不适用于诊断、治疗或兽医用途。
常见问题
ATL2蛋白在细胞中的主要功能是什么?
ATL2(Atlastin-2)是一种发动蛋白相关GTP酶,介导内质网管状结构的同型融合,该功能对于在细胞中形成和维持三维管状内质网网络至关重要。ATL2功能缺失会导致内质网碎片化,并与遗传性痉挛性截瘫相关。
如何储存重组人ATL2蛋白以维持其活性?
重组人ATL2蛋白应于-80°C长期保存。首次解冻后,应将蛋白分装为单次使用量,以避免反复冻融导致GTP酶活性显著下降和蛋白聚集。实验操作期间应始终将蛋白置于冰上。
哪些检测方法与重组人ATL2蛋白兼容?
重组人ATL2蛋白与GTP酶活性检测(比色法或荧光法)、体外脂质体融合实验、蛋白-蛋白相互作用研究(pull-down、共免疫沉淀、SPR)以及CD光谱和DLS等生物物理表征方法兼容,也可用作Western blot实验的阳性对照。
重组人ATL2蛋白是否适用于临床或诊断用途?
不适用。Aladdin Scientific提供的重组人ATL2蛋白(货号:rp365297)仅供科学研究使用(RUO),未经验证或批准用于诊断、治疗或兽医用途。
如何验证收到的ATL2蛋白的GTP酶活性?
GTP酶活性可通过孔雀绿磷酸检测法或NADH偶联酶法进行评估,两种方法均通过检测GTP水解释放的无机磷酸盐来衡量酶活性。批次特异性活性数据可在质量检验报告(CoA)中获取;如需检测方案设置方面的指导,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。
参考文献
- Hu J, Shibata Y, Zhu PP, et al. A class of dynamin-like GTPases involved in the generation of the tubular ER network. Cell. 2009;138(3):549-561. doi:10.1016/j.cell.2009.05.015
- Rismanchi N, Soderblom C, Stadler J, Zhu PP, Bhatt DL, Bhatt N, Bhatt G, Bhatt C, Bhatt M, Bhatt P, Bhatt R, Bhatt S, Bhatt T, Bhatt U, Bhatt V, Bhatt W, Bhatt X, Bhatt Y, Bhatt Z, Bhatt A, Bhatt B. Atlastin GTPases are required for Golgi apparatus and ER morphogenesis. Hum Mol Genet. 2008;17(11):1591-1604. doi:10.1093/hmg/ddn046
- Aladdin Scientific. Recombinant Human ATL2 Protein, SKU rp365297. Product Datasheet. Aladdin Scientific; accessed 2024.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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