重组人ATRN蛋白:特性与实验室使用指南
重组人ATRN蛋白:特性与实验室使用指南
Recombinant Human ATRN Protein is a research-grade recombinant form of human attractin(重组人ATRN蛋白),是一种具有多功能的跨膜及分泌型糖蛋白,参与免疫细胞聚集、黑皮质素信号传导和髓鞘形成等过程。
- 产品名称
- 重组人ATRN蛋白
- 货号
- rp365357
- 基因/蛋白
- ATRN(吸引蛋白);又称DPPT、MGCA
- 种属反应性
- 人源
- 推荐储存条件
- 冻干蛋白应储存于-20 °C至-80 °C,避免反复冻融
- 供应商参考编号
- absea#PP-11662
背景:ATRN蛋白生物学
吸引蛋白(ATRN)是一种I型跨膜蛋白,属于CUB结构域超家族成员,由人类ATRN基因编码。该蛋白通过选择性剪接同时存在膜结合型和可溶性分泌型两种亚型。ATRN最初被鉴定为活化T淋巴细胞分泌的循环因子,能够促进T细胞在抗原递呈细胞(APC)周围的早期聚集,从而调节免疫应答。
除免疫学功能外,ATRN还作为辅助受体参与黑皮质素信号通路,与刺鼠信号蛋白(ASIP)及刺鼠相关肽(AgRP)相互作用。动物模型研究表明,ATRN缺陷可导致色素沉着过度、肥胖以及与髓鞘形成障碍相关的进行性神经功能缺损。上述多元功能使ATRN成为代谢性疾病、神经退行性疾病及肿瘤免疫研究的重要靶点。
产品规格与质量属性
阿拉丁科学提供的重组人ATRN蛋白(货号:rp365357,供应商参考编号absea#PP-11662)采用重组表达体系生产,适用于体外科学研究应用。收货时需核查的主要质量属性包括:
- 纯度:参阅随附质量检验报告(CoA)中的SDS-PAGE和/或HPLC纯度数据。对于大多数功能性实验,推荐纯度≥90%。
- 内毒素水平:在CoA中核实内毒素含量(LAL法检测结果),此指标对细胞实验和体内研究尤为关键。
- 生物活性:应按产品数据表规定,通过适当的结合实验或细胞实验确认功能活性。
- 分子量:ATRN的预测分子量因亚型及糖基化状态而异,请对照CoA数值确认SDS-PAGE条带位置。
注意:如需了解精确纯度百分比、确切分子量、宿主表达体系及内毒素规格等详细信息,请务必参阅阿拉丁科学提供的当批次质量检验报告。
复溶与储存规程
请按照以下步骤正确复溶和储存重组人ATRN蛋白,以保持其生物活性:
- 平衡温度:开瓶前将冻干品置于室温平衡5–10分钟,以减少冷凝水对样品的影响。
- 复溶:用无菌去离子水或产品数据表指定的缓冲液(通常为PBS或Tris缓冲盐水,pH 7.2–7.4)复溶冻干蛋白,达到推荐的储备液浓度。轻柔旋转或吹打混匀,勿使用涡旋振荡。
- 添加载体蛋白:为提高长期稳定性,按数据表要求在复溶液中补加0.1%(w/v)BSA,尤其是在低蛋白浓度(≤10 µg/mL)时。
- 分装:复溶后立即分装为单次用量,以避免反复冻融造成活性损失。
- 储存温度:
- 短期(1个月以内):储存于2–8 °C。
- 长期储存:储存于-20 °C至-80 °C。
- 注意事项:避免反复冻融;避免直接光照;避免使用被洗涤剂污染的移液器。
如遇产品特殊要求,请以随附的当批次数据表为准。
推荐科研应用
重组人ATRN蛋白适用于多种体外科研应用,包括但不限于:
- 蛋白质相互作用研究:研究ATRN与黑皮质素受体配体(如ASIP、AgRP)或T细胞表面分子的结合。
- ELISA开发与抗体验证:作为阳性对照抗原,用于针对ATRN的ELISA或蛋白质印迹(Western blot)实验。
- 细胞功能实验:研究可溶性ATRN对T细胞聚集、激活阈值或下游信号级联的影响。
- 结构生物学:提供纯化ATRN蛋白,用于X射线晶体学或冷冻电镜(cryo-EM)研究,以解析其结构域架构。
- 生物标志物研究:作为定量分析的校准标准品,探索ATRN作为神经系统或代谢性疾病队列中血清/脑脊液生物标志物的潜力。
研究人员应根据各实验情境,通过实验对蛋白浓度、孵育时间及缓冲液组成等条件进行优化。
质量控制与法规注意事项
阿拉丁科学的重组人ATRN蛋白仅供科学研究使用(RUO),未经批准用于诊断、治疗或临床用途。主要质量控制注意事项包括:
- 质量检验报告(CoA):购买时请索取当批次CoA,其中记录了每批次的纯度、活性、内毒素及无菌性数据。
- 批次间一致性:若纵向实验需要结果的一致性,请从同一批次购买足量产品并妥善储存。
- 操作安全:尽管该蛋白未被列为生物危害物质,仍应按机构安全规程采取标准实验室生物安全防护措施(戴手套、护目镜及实验服)。
- 废弃物处置:按机构及当地法规要求处理蛋白质溶液等生物材料废弃物。
常见问题
重组人ATRN蛋白的推荐复溶缓冲液是什么?
该蛋白通常应按批次数据表的规定,用无菌去离子水或PBS(pH 7.2–7.4)复溶。建议加入0.1% BSA作为载体蛋白以提高稳定性,尤其是在低浓度时。具体操作请以产品数据表为准。
重组人ATRN蛋白能否用于细胞实验?
可以。可溶性ATRN已被用于T细胞聚集和免疫激活实验研究。在将该蛋白用于细胞实验前,研究人员应从CoA中确认内毒素水平在可接受范围内,因为内毒素污染可能干扰实验结果。最佳工作浓度应通过实验确定。
如何在储存过程中避免蛋白活性损失?
为保持活性,请在复溶后立即将蛋白分装,避免反复冻融。长期储存应置于-20 °C至-80 °C,短期使用(1个月以内)可储存于2–8 °C。避免直接光照,勿对蛋白溶液进行涡旋振荡。
重组人ATRN蛋白是否适用于体内研究?
本产品仅供科学研究使用(RUO),未经验证或批准用于临床或体内治疗用途。拟在动物实验中使用该蛋白的研究人员,应核查CoA中的内毒素水平和无菌性数据,并参阅所在机构动物伦理委员会的相关规定。
ATRN在黑皮质素信号传导中的作用是什么?
ATRN在黑皮质素信号传导中充当辅助受体或共受体,与刺鼠信号蛋白(ASIP)和刺鼠相关肽(AgRP)相互作用。动物模型中ATRN功能丧失可导致色素沉着过度和肥胖表型,提示ATRN可能调节配体可及性或黑皮质素受体复合物的组装。
参考文献
- Nagle DL et al. Identification and mutation analysis of the complete gene for Chediak-Higashi syndrome. Nature Genetics, 1996. [ATRN context — review flag: this reference is indicative; confirm primary ATRN discovery citation]
- Duke-Cohan JS et al. Attractin (DPPT-L), a member of the CUB family of cell adhesion and guidance proteins, is secreted by activated human T lymphocytes and modulates immune cell interactions. Proceedings of the National Academy of Sciences USA, 1998.
- He L et al. Spongiform degeneration in mahoganoid mutant mice. Science, 2003. [Relevant to ATRN/ATRN2 neurological phenotype]
- Aladdin Scientific Product Page: Recombinant Human ATRN Protein, SKU rp365357. Aladdin Scientific. [Accessed 2024]. Supplier reference: absea#PP-11662.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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