重组人CACNA2D2蛋白:研究指南
重组人CACNA2D2蛋白:研究指南
Recombinant Human CACNA2D2 Protein is a research-grade auxiliary subunit of voltage-gated calcium channels,为科研人员在体外实验体系中研究钙通道调控、神经系统疾病机制及药物靶点相互作用提供有力工具。
- 产品名称
- 重组人CACNA2D2蛋白
- 货号
- rp367361
- 蛋白功能
- 电压门控钙通道的辅助α2/δ亚基;调节通道的转运、动力学特性及药理学特性
- 生物学意义
- 与神经病理性疼痛、癫痫及肿瘤相关;是加巴喷丁类药物的作用靶点
- 表达体系
- 重组表达(具体表达体系详见产品说明书,请向Aladdin Scientific确认)
- 推荐储存条件
- 建议储存于-80°C;避免反复冻融(具体条件以产品说明书为准)
- 供应商
- Aladdin Scientific
背景介绍:CACNA2D2与电压门控钙通道
CACNA2D2基因编码电压门控钙通道(VGCC)的辅助亚基α2/δ-2(α2δ-2)。VGCC是由形成孔道的α1亚基与辅助性β亚基和α2δ亚基共同构成的多亚基复合物。α2δ亚基由单一前体蛋白翻译后剪切产生,并通过二硫键重新连接,其中δ片段负责将复合物锚定于细胞质膜。
CACNA2D2主要在脑和小脑中表达,对钙通道的细胞表面表达、向质膜的转运及生物物理门控动力学具有重要调控作用。CACNA2D2功能失调与癫痫、小脑共济失调及神经病理性疼痛等神经系统疾病密切相关。此外,CACNA2D2还被认定为部分肿瘤(包括肺癌和乳腺癌)的候选抑癌基因。
广泛用于神经病理性疼痛和癫痫治疗的加巴喷丁类药物(加巴喷丁、普瑞巴林)通过与α2δ亚基(包括CACNA2D2)结合发挥药理作用,使该蛋白成为具有重要临床意义的研究靶点。
重组人CACNA2D2蛋白的研究应用
重组人CACNA2D2蛋白(货号:rp367361)适用于多种体外研究应用,典型用途包括:
- 蛋白质-蛋白质相互作用研究:通过pull-down实验、免疫共沉淀或表面等离子体共振技术,研究CACNA2D2与钙通道α1亚基、β亚基或其他相互作用蛋白的结合特性。
- 药物结合与筛选实验:表征加巴喷丁类药物或新型小分子与α2δ-2亚基的结合,服务于疼痛和癫痫药物发现项目。
- ELISA及免疫分析开发:作为夹心ELISA的标准品或阳性对照抗原,用于Western blot验证及抗体特异性检测。
- 结构与生物物理研究:支持结构生物学研究,包括晶体学、冷冻电镜样品制备,以及α2δ-2构象和稳定性的生物物理表征。
- 无细胞功能实验:在重建体系中研究CACNA2D2的功能域,或开展通道转运通路研究。
研究人员应根据产品说明书验证具体应用的适用性,如有需要请联系Aladdin Scientific技术支持团队。
操作、复溶及储存指南
妥善操作重组人CACNA2D2蛋白对于保持其活性并确保实验结果可重复性至关重要。请遵循以下通用最佳操作规范,并始终以随货号rp367361提供的产品说明书中的权威说明为准:
- 复溶:若产品以冻干形式提供,应使用说明书推荐的缓冲液(通常为无菌PBS或生产商指定缓冲液)进行复溶。开瓶前将冻干粉瓶平衡至室温,轻柔混匀,避免剧烈涡旋。
- 分装:复溶后立即进行单次用量分装,以减少反复冻融,防止蛋白降解和活性损失。
- 储存:长期储存应置于-80°C。根据制剂配方,短期储存(数天内)可在-20°C或4°C保存——请以说明书为准。
- 载体蛋白:若制剂中含有BSA或其他载体蛋白,在下游实验(如ELISA标准曲线制备)中应加以考虑。
- 无菌与污染防控:在细胞实验中使用时,应在无菌条件下操作,使用无菌低吸附离心管和枪头。
注:具体缓冲液组成、浓度及推荐工作稀释比例请参阅产品说明书。如需技术支持,请联系Aladdin Scientific。
质量控制与纯度考量
为确保研究结果的可重复性,在使用重组蛋白前必须充分了解其质量属性。对于重组人CACNA2D2蛋白(rp367361),需在质检报告(CoA)上核实的关键质控参数包括:
- 纯度:纯度通常通过SDS-PAGE(考马斯亮蓝或银染)和/或HPLC进行评估。不同应用对可接受纯度阈值的要求不同,请根据具体用途确认纯度等级。
- 身份确认:可通过使用抗CACNA2D2抗体进行Western blot或质谱肽段图谱分析来确认蛋白身份。
- 生物活性:如适用,说明书上可能会报告功能活性(如配体结合实验结果)。请确认所供批次是否已进行活性检测。
- 内毒素水平:对于细胞实验和体内研究至关重要。CoA上应注明内毒素含量(LAL法检测结果);对于敏感实验,建议选用低内毒素等级产品。
- 批次间一致性:开展纵向研究时,应记录批次号,并向Aladdin Scientific申请保留同批次产品,以降低实验间变异。
每次收货时务必索取CoA,并将其与实验记录一同存档,以满足合规性和可重复性要求。
常见问题
CACNA2D2是什么?它在科学研究中为何重要?
CACNA2D2编码电压门控钙通道的辅助亚基α2/δ-2,负责调节通道的细胞表面表达、转运及门控动力学。该蛋白与癫痫、神经病理性疼痛等神经系统疾病密切相关,同时也是加巴喷丁类药物的结合靶点,因此在基础神经科学研究和药物发现领域均具有重要意义。
重组人CACNA2D2蛋白适用于哪些实验应用?
重组人CACNA2D2蛋白(rp367361)适用于蛋白质-蛋白质相互作用研究、药物结合与筛选实验、ELISA标准品或阳性对照、Western blot验证,以及结构或生物物理表征。具体应用的适用性请以产品说明书为准。
如何储存重组人CACNA2D2蛋白以维持其稳定性?
长期储存应将蛋白保存于-80°C,复溶后立即分装为单次用量,避免反复冻融。短期储存条件因制剂不同而异,请务必参阅货号rp367361随附产品说明书中的权威储存说明。
如何确认收到蛋白的身份和纯度?
请索取您所在批次的质检报告(CoA),其中应记录SDS-PAGE或HPLC纯度、Western blot或质谱身份确认结果,以及内毒素水平。请将CoA与实验记录一同存档。如有任何质控数据缺失或不明确,请联系Aladdin Scientific。
重组人CACNA2D2蛋白是否适用于基于细胞的功能实验?
重组人CACNA2D2蛋白可用于基于细胞的实验场景,但在使用前必须评估内毒素水平及制剂组分(如载体蛋白或防腐剂)。请查阅产品说明书,如有需要,在开展敏感细胞实验前向Aladdin Scientific申请低内毒素等级产品。
参考文献
- Dolphin AC. Voltage-gated calcium channels and their auxiliary subunits: physiology and pathophysiology and pharmacology. J Physiol. 2016;594(19):5369-5390. doi:10.1113/JP272262
- Gao B, et al. Functional properties of a new voltage-dependent calcium channel alpha(2)delta auxiliary subunit gene (CACNA2D2). J Biol Chem. 2000;275(16):12237-12242. doi:10.1074/jbc.275.16.12237
- Aladdin Scientific. Recombinant Human CACNA2D2 Protein, SKU rp367361. Product Datasheet. Aladdin Scientific; [date not provided in source material].
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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