重组人CACNB3蛋白:功能与研究应用
重组人CACNB3蛋白:功能与研究应用
Recombinant Human CACNB3 Protein是一种重组生产的电压依赖性钙通道辅助β亚基,对于神经元及可兴奋细胞研究中通道的转运、动力学及电流幅值的调控至关重要。
- 蛋白名称
- 重组人CACNB3(电压依赖性钙通道β3亚基)
- 基因名称
- CACNB3
- 蛋白家族
- 电压依赖性钙通道β亚基家族
- 生物学功能
- 调控钙通道向细胞膜的转运、通道门控动力学及电流密度
- 表达系统
- 重组表达系统(具体宿主系统请参阅产品数据表)
- 研究应用
- 离子通道研究、神经科学、电生理学、药物靶点验证
- 产品编号
- rp370132
CACNB3是什么?为何重要?
CACNB3(电压依赖性钙通道β3亚基)是四种哺乳动物β亚基亚型(β1–β4)之一,以非共价方式与高压激活(HVA)钙通道的成孔α1亚基结合。这些异质多聚体复合物介导神经元、心肌细胞、骨骼肌及多种内分泌细胞中的钙离子内流。
包括CACNB3在内的β亚基至少发挥三项关键功能:(1)作为分子伴侣,稳定α1亚基并促进其向细胞膜的转运;(2)改变激活与失活的电压依赖性,精细调控通道的开放与关闭时机;(3)调控电流密度,直接影响动作电位期间钙离子内流的幅度。
CACNB3在脑和外周神经系统中广泛表达,已被证实参与N型、P/Q型和L型钙通道行为的调控。目前,CACNB3的研究热点涵盖癫痫遗传学、疼痛信号传导、突触传递以及钙通道阻滞剂的分子药理学。
重组人CACNB3蛋白的生化特性
重组人CACNB3蛋白采用重组DNA技术生产,使研究人员能够在脱离复杂天然组织环境的情况下获得明确、高纯度的人β3钙通道亚基制剂。重组生产可精确控制蛋白质序列(对应典型人CACNB3亚型),便于引入标签以用于检测或亲和纯化,并支持定量生化测定所需的批次间一致性。
CACNB3的关键生化特征包括SH3(Src同源3)结构域和鸟苷酸激酶(GK)样结构域,这些结构特征在全部四种β亚基亚型中均保守。GK样结构域介导与位于α1亚基胞质连接区的α相互作用结构域(AID)之间的高亲和力相互作用。这些结构域还介导与其他胞内信号分子的蛋白-蛋白相互作用,使CACNB3成为多功能调控支架蛋白。
注意:SKU rp370132的具体理化数据(分子量、纯度等级、制剂缓冲液、储存条件及宿主表达系统)须以Aladdin Scientific官方质量检验证书及产品数据表为准,因为这些参数因批次而异。
重组人CACNB3蛋白的研究应用
重组人CACNB3蛋白支持细胞生物学、生物化学、结构生物学和药理学领域的多种实验流程:
- 蛋白-蛋白相互作用研究:该重组蛋白可用于pull-down实验、共免疫沉淀及表面等离子共振(SPR),表征CACNB3与α1亚基AID之间的结合界面,或鉴定新型相互作用伙伴。
- 结构生物学:纯化的重组CACNB3适合作为晶体学或冷冻电镜研究的组分,用于解析钙通道复合物的结构。
- 抗体开发与验证:作为抗原标准品,重组CACNB3可支持抗CACNB3抗体的制备及其在蛋白质印迹、免疫组化和流式细胞术中的特异性验证。
- 功能重建测定:与α1亚基共表达或共重建时,重组CACNB3可在体外评估β亚基对通道门控特性的调控作用。
- 药物发现与靶点验证:利用重组CACNB3的筛选测定可鉴定破坏α1–β亚基相互作用的小分子,这是开发新一代钙通道调节剂的重要策略。
操作、储存与质量注意事项
为保持重组人CACNB3蛋白的活性与完整性,研究人员应遵循重组蛋白操作的通用最佳实践:
- 储存:按产品数据表指示储存。重组蛋白通常在稳定缓冲液中于−20°C或−80°C保存。避免反复冻融,以防聚集和活性丧失。
- 复溶:若以冻干形式供应,使用数据表规定的缓冲液复溶,短暂离心收集全部物料,并在建议温度下平衡后使用。
- 分装:首次解冻时制备单次使用分装量,以减少冻融次数。
- 质量验证:通过SDS-PAGE确认纯度,并按质量检验证书中描述的测定方法验证生物活性。可通过抗CACNB3抗体蛋白质印迹或质谱法确认蛋白质身份。
- 内毒素:对于基于细胞的测定,应确认内毒素水平符合批次特定文件中规定的实验要求。
请务必参阅Aladdin Scientific当前产品数据表(SKU:rp370132)获取批次特定规格,因制剂详情可能有所不同。
常见问题
CACNB3亚基在电压门控钙通道中的功能是什么?
CACNB3是与高压激活钙通道成孔α1亚基结合的辅助β亚基。它促进α1亚基向细胞膜的转运,调控通道门控动力学(改变激活与失活的电压依赖性),并增大电流密度。这些功能使其成为神经元及其他可兴奋细胞中钙离子内流的关键调控因子。
重组人CACNB3蛋白(rp370132)采用何种表达系统生产?
SKU rp370132的具体宿主表达系统应在Aladdin Scientific产品数据表或质量检验证书中确认,因为该信息具有产品和批次特异性。重组β亚基蛋白的常用系统包括大肠杆菌、昆虫细胞(杆状病毒)和哺乳动物细胞表达平台。如需最新批次信息,请联系Aladdin Scientific技术支持。
如何储存和操作重组人CACNB3蛋白以保持其活性?
按产品数据表规定的条件储存蛋白质,通常为−20°C或−80°C。首次解冻时制备单次使用分装量,避免反复冻融。若为冻干品,在推荐缓冲液中复溶并平衡后使用。收到产品后,始终通过SDS-PAGE及质量检验证书中描述的活性测定验证纯度和活性。
重组人CACNB3蛋白适用于哪些研究应用?
重组人CACNB3蛋白适用于蛋白-蛋白相互作用研究(pull-down、共免疫沉淀、SPR)、结构生物学(晶体学、冷冻电镜)、抗体开发与验证、与α1亚基的功能重建测定,以及针对α1–β亚基界面的药物发现筛选研究。
重组人CACNB3蛋白是否适用于基于细胞的测定?
重组人CACNB3蛋白可用于基于细胞的实验,但研究人员应验证特定批次的内毒素水平是否满足其细胞培养系统的阈值要求。批次特定的内毒素数据在质量检验证书中提供。请联系Aladdin Scientific技术支持确认是否适用于您的特定测定格式。
参考文献
- Dolphin AC. Voltage-gated calcium channels and their auxiliary subunits: physiology and pathophysiology and pharmacology. J Physiol. 2016;594(19):5369-5390. doi:10.1113/JP272262
- Buraei Z, Yang J. The ß subunit of voltage-gated Ca2+ channels. Physiol Rev. 2010;90(4):1461-1506. doi:10.1152/physrev.00057.2009
- Aladdin Scientific. Recombinant Human CACNB3 Protein, SKU rp370132. Product Datasheet. Aladdin Scientific.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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