重组人CEP126蛋白:研究使用指南
重组人CEP126蛋白:研究使用指南
Recombinant Human CEP126 Protein is a centriolar satellite-associated protein reagent designed to support mechanistic studies of ciliogenesis, centrosome biology, and related ciliopathy research.
- 产品名称
- 重组人CEP126蛋白
- 货号
- rp374590
- 蛋白来源
- 人(智人)
- 蛋白类别
- 中心粒卫星/中心体相关蛋白
- 主要研究应用
- 纤毛发生、中心体生物学、纤毛病研究
- 规格形式
- 重组蛋白;具体制剂详情请参阅产品规格书
- 供应商
- Aladdin Scientific
背景:CEP126及其在纤毛发生中的作用
CEP126(中心体蛋白126)是与中心粒卫星相关的蛋白组分。中心粒卫星是哺乳动物细胞中围绕中心体和基体聚集的电子致密颗粒,在蛋白质向中心体的转运及纤毛发生的启动与调控中发挥关键作用。
CEP126已被鉴定为一种纤毛相关蛋白,其表达与定位与细胞周期紧密耦合。研究表明,CEP126定位于中心粒卫星,并参与构建纤毛正常形成所需的结构与调控框架。CEP126功能缺失与纤毛发生缺陷有关,使其归属于与纤毛病相关的蛋白家族——纤毛病是一类由纤毛功能异常引起的人类疾病谱系,包括肾消耗病、Bardet-Biedl综合征及Joubert综合征等。
作为重组人源蛋白,本试剂使研究人员能够开展体外生化检测、相互作用研究及功能重组实验,无需依赖内源性蛋白来源,从而提供更高的实验可控性与重复性。
蛋白性质与制剂注意事项
重组人CEP126蛋白(rp374590)是人CEP126基因产物的重组形式。研究人员应查阅Aladdin Scientific提供的最新产品规格书,以确认分子量、表达系统(如哺乳动物、昆虫细胞或大肠杆菌)、标签配置(如His标签或GST标签)、纯度级别及缓冲液组成等关键参数,这些参数对下游实验设计至关重要。
适用于此类重组蛋白的一般注意事项包括:
- 纯度:用于研究的重组蛋白通常经SDS-PAGE检测纯度≥85–95%;请以产品规格书中的确切说明为准。
- 内毒素水平:对于细胞实验,应核实内毒素含量;规格书将注明经检测的内毒素水平。
- 复溶:冻干产品应按规格书说明进行复溶,通常用无菌去离子水或适当缓冲液轻柔混合,避免蛋白变性。
- 载体蛋白:部分制剂含BSA作为稳定剂;使用前请验证其与实验体系的相容性。
储存、操作与稳定性指南
正确的储存与操作对维持重组人CEP126蛋白的生物活性和结构完整性至关重要。除非产品规格书另有说明,请遵循以下最佳实践指南:
- 长期储存:冻干蛋白应在–20 °C或–80 °C避光防潮储存。液态制剂应按规格书规定温度储存,长期保存通常为–80 °C。
- 分装:复溶后立即制备单次使用分装,以减少冻融次数,避免蛋白活性降低和聚集。
- 冻融次数:避免反复冻融;建议冻融次数不超过2–3次,每次冻融均可导致部分变性及功能活性损失。
- 工作浓度:根据具体实验体系通过实验确定最佳工作浓度。建议在大规模实验前先进行梯度滴定预实验。
- 防污染:操作蛋白时使用无菌技术,避免将蛋白酶、去垢剂或其他变性剂引入储液。
请始终参照产品标签及最新规格书上注明的具体储存条件,制剂特定要求优先于一般性指导原则。
实验应用
重组人CEP126蛋白适用于多种体外及无细胞研究应用,代表性应用包括:
- 蛋白质-蛋白质相互作用研究:CEP126可作为诱饵或猎物蛋白用于pull-down实验、共免疫沉淀验证实验或表面等离子体共振(SPR)结合研究,以绘制其在中心粒卫星复合物中的相互作用网络。
- 生化表征:重组蛋白支持酶学或结构研究,包括用于二级结构分析的圆二色(CD)光谱及用于评估稳定性的热位移实验。
- Western blot标准品:重组CEP126可作为使用抗CEP126抗体进行Western blot实验的阳性对照或分子量参考标准。
- ELISA标准曲线建立:纯化蛋白可用于建立定量夹心ELISA检测生物样本中内源性CEP126水平的标准曲线。
- 功能重组:在无细胞体系中,重组蛋白可用于研究中心粒卫星组装的重组,或评估翻译后修饰对CEP126相互作用的影响。
- 抗体验证:该蛋白适用于通过点印迹或免疫沉淀实验验证抗CEP126抗体的特异性。
研究人员应在每种特定实验格式中对蛋白活性进行验证,因为性能可能因实验条件及重组蛋白的表达系统不同而存在差异。
常见问题
CEP126是什么?它在纤毛研究中为何重要?
CEP126是一种与中心粒卫星相关的蛋白,在哺乳动物细胞的纤毛发生(即初级纤毛的形成)调控中发挥关键作用。它参与中心粒卫星的结构组织及纤毛组分向基体的转运。CEP126功能缺失与纤毛组装缺陷相关,使其与肾消耗病和Joubert综合征等疾病的纤毛病研究密切相关。
如何储存重组人CEP126蛋白以保持其活性?
为长期保存,冻干重组人CEP126蛋白应在干燥避光环境中于–20 °C或–80 °C储存。复溶后立即分装,避免反复冻融——最多不超过2–3次冻融循环。请务必参照Aladdin Scientific产品规格书(货号:rp374590)中的具体储存说明,制剂要求优先适用。
重组人CEP126蛋白采用何种表达系统生产?
重组人CEP126蛋白(rp374590)所用的具体表达系统,请参阅Aladdin Scientific官方产品规格书进行确认,该信息对实验结果解读至关重要,尤其涉及翻译后修饰和蛋白折叠方面。常见的重组蛋白表达系统包括大肠杆菌、昆虫细胞和哺乳动物细胞表达系统。
重组人CEP126蛋白能否用作Western blot的阳性对照?
是的,重组人CEP126蛋白(rp374590)可作为使用抗CEP126抗体进行Western blot实验的阳性对照或分子量参考标准,也适用于点印迹和免疫沉淀实验中的抗体特异性验证。使用前请确认其与所用抗体克隆及检测系统的相容性。
重组人CEP126蛋白经过哪些质量控制检测?
包括SDS-PAGE纯度检测、内毒素检测及功能活性验证在内的质量控制规格详见rp374590产品规格书。研究人员可从Aladdin Scientific官网下载最新规格书,或联系技术支持获取最新质量控制数据。
参考文献
- Wilkinson CJ et al. A SUMO-dependent protein interaction network regulates the formation of centriolar satellites. EMBO Rep. 2014; referenced as context for centriolar satellite biology.
- Lopes CA et al. Centriolar satellites are assembly points for proteins implicated in human ciliopathies, including oral-facial-digital syndrome 1. J Cell Sci. 2011;124(Pt 4):600-612.
- Braun DA, Hildebrandt F. Ciliopathies. Cold Spring Harb Perspect Biol. 2017;9(3):a028191. doi:10.1101/cshperspect.a028191
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)