重组人CEP131蛋白:功能与研究应用
重组人CEP131蛋白:功能与研究应用
Recombinant Human CEP131 Protein是一种关键的中心粒卫星组分,在纤毛发生和中心体完整性维持中发挥重要作用,是研究纤毛病及中心体相关细胞过程的重要工具。
- 蛋白名称
- 重组人CEP131蛋白
- 别名
- AZI1(5-氮杂胞苷诱导蛋白1)
- 主要生物学功能
- 中心粒卫星组分;纤毛发生和中心体内聚所必需
- 物种来源
- 人(智人)
- 研究应用
- 生化分析、蛋白相互作用研究、纤毛发生研究、纤毛病模型
- 产品货号
- rp374627
CEP131是什么?生物学背景
CEP131,又称AZI1(5-氮杂胞苷诱导蛋白1),是一种含卷曲螺旋结构域的蛋白质,定位于哺乳动物细胞中围绕中心体和基体的电子密集颗粒——中心粒卫星。这些卫星作为动态蛋白储库,为中心体提供所需蛋白,CEP131被认为是该区室的核心结构与功能组分。
CEP131与中心粒卫星主要组织者PCM1以及CEP290、BBS4等其他卫星蛋白相互作用。通过这些相互作用,CEP131促进货物蛋白向中心体和基体的转运,这是初级纤毛形成和维持的先决条件。在细胞模型中,CEP131功能丧失会破坏中心粒卫星的完整性并损害纤毛发生,凸显了其在纤毛生物学中不可或缺的作用。
除纤毛功能外,CEP131还与DNA损伤应答和基因组稳定性维持有关,部分研究提示其在基因毒性应激后参与将检查点蛋白募集至中心体。这些多方面的功能使CEP131成为细胞生物学、发育生物学和疾病研究领域广泛关注的蛋白质。
重组人CEP131蛋白的生化特性
重组人CEP131蛋白采用重组表达系统生产,获得可溶性、功能性的人CEP131多肽全长或特定片段形式。天然人CEP131基因编码约1,140个氨基酸的蛋白质,预测分子量约为~130 kDa,但由于该蛋白富含卷曲螺旋的拉长结构,其在SDS-PAGE上的表观分子量可能有所不同。
重组蛋白通常携带亲和纯化标签(如His标签或GST标签),通过亲和层析纯化获得纯度明确的制品,适用于体外研究应用。蛋白纯度和特异性通过SDS-PAGE、Western印迹或质谱法确认。蛋白通常以缓冲水溶液形式供应,应按照制造商建议进行储存——通常在−20°C或−80°C——以维持活性并防止降解。
研究人员应从Aladdin Scientific rp374627每批次随附的分析证书(CoA)中核实批次特定信息,包括确切的构建体边界、标签位置、纯度等级和配方缓冲液。
研究应用
纤毛发生与纤毛病研究:重组人CEP131蛋白非常适合用于研究初级纤毛形成的分子机制。可用于pulldown和共免疫沉淀实验,以解析其与PCM1、CEP290、BBS4及其他中心粒卫星组分的相互作用,有助于阐明调控纤毛发生的蛋白质相互作用网络。
生化与结合分析:纯化的重组蛋白可作为抗体验证的抗原、定量分析的标准品,或用于表面等离子体共振(SPR)和酶联免疫吸附测定(ELISA)实验中作为结合配体,以表征CEP131的相互作用。
结构研究:重组CEP131制品可用于动态光散射(DLS)等生物物理表征实验,或作为冷冻电子显微镜(cryo-EM)样品制备的组分,以研究中心粒卫星的结构。
疾病模型开发:鉴于CEP131与纤毛病的关联——纤毛病是一类由纤毛缺陷引起的遗传性疾病,包括Bardet-Biedl综合征相关通路——重组蛋白可支持相关无细胞或细胞系统中的重建实验和功能性修复研究。
操作、储存与质量注意事项
储存:重组蛋白对反复冻融循环敏感。收到产品后,建议在储存前将蛋白分装为单次使用量,长期保存置于−80°C,短期使用可置于−20°C。避免在4°C长期储存,因为这可能导致蛋白聚集或降解。
操作:融化分装时在冰上操作。通过吸管轻柔混匀而非涡旋振荡,以保持天然构象。对于高灵敏度应用,使用前在4°C短暂离心融化的蛋白,以去除可能存在的聚集体。
质量控制:Aladdin Scientific重组人CEP131蛋白(货号:rp374627)每批次均附有分析证书(CoA),记录纯度、浓度和特异性测试结果。建议研究人员在实验前查阅CoA,并联系Aladdin Scientific技术支持获取特定应用指导。
生物安全:本产品仅供体外研究使用,不适用于人类或动物的诊断或治疗目的。
常见问题
CEP131蛋白是什么,为什么它对纤毛研究很重要?
CEP131(又称AZI1)是一种中心粒卫星蛋白,与PCM1相互作用,是正常纤毛发生和中心体内聚所必需的。它作为支架帮助将关键蛋白转运至基体,是理解初级纤毛形成和纤毛病机制的重要靶点。
重组人CEP131蛋白适用于哪些应用?
重组人CEP131蛋白适用于蛋白质-蛋白质相互作用研究(如共免疫沉淀、pulldown实验)、抗体验证(作为抗原)、SPR或ELISA等生化结合分析以及生物物理表征。也可用于纤毛发生重建实验和纤毛病疾病模型研究。
如何储存重组人CEP131蛋白以维持其活性?
收到产品后应立即将蛋白分装为单次使用量,长期保存置于−80°C,短期使用置于−20°C。应避免反复冻融,因为这会降低蛋白活性并促进聚集。处理融化分装时应始终在冰上操作。
重组人CEP131蛋白是否适合体内或诊断用途?
不适合。重组人CEP131蛋白(货号:rp374627)严格用于体外研究目的,不适用于人类或动物的诊断、治疗或任何体内应用,亦未获得相关验证。
在哪里可以找到重组人CEP131蛋白的批次特定数据?
每批次货号rp374627产品附带的分析证书(CoA)中提供了包括纯度、浓度和特异性确认在内的批次特定数据。您也可以联系Aladdin Scientific客户支持,索取特定批次号的CoA。
参考文献
- Lopes CA, et al. Centriolar satellites are assembly points for proteins implicated in human ciliopathies, including oral-facial-digital syndrome 1. J Cell Sci. 2011;124(Pt 4):600-612. doi:10.1242/jcs.077156
- Odabasi E, et al. Centriolar satellites are required for efficient ciliogenesis and ciliary content regulation. EMBO Rep. 2019;20(6):e47723. doi:10.15252/embr.201847723
- Staples CJ, et al. The centriolar satellite protein CEP131 is required for maintaining a functional ciliogenesis-competent state. Mol Cell Biol. 2012;32(24):5086-5097. doi:10.1128/MCB.00843-12
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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