重组人CEP250蛋白:研究指南
重组人CEP250蛋白:研究指南
Recombinant Human CEP250 Protein是一种对中心粒聚合与纤毛发生至关重要的中心体支架蛋白,由Aladdin Scientific提供,旨在支持细胞生物学及纤毛病相关前沿研究。
- 蛋白名称
- 重组人CEP250蛋白(中心体蛋白250)
- 货号
- rp374831
- 生物学功能
- 作为中心体结构支架,参与中心粒间聚合及初级纤毛形成
- 物种来源
- 人(智人,Homo sapiens)
- 应用领域
- 中心体生物学、纤毛发生研究、纤毛病疾病建模、蛋白互作分析
- 储存建议
- 建议于-80°C储存,避免反复冻融(具体缓冲液条件以产品说明书为准)
CEP250的生物学背景
CEP250,又称C-Nap1(与NEK2相关的中心体蛋白1),是一种定位于中心粒近端的大型卷曲螺旋蛋白。在间期,它通过连接配对中心粒发挥维持中心粒聚合的关键结构功能。进入有丝分裂时,CEP250被激酶NEK2磷酸化并从中心粒解离,从而触发中心体分离和双极纺锤体的组装。
除参与细胞周期调控外,CEP250还与初级纤毛发生的调节密切相关。CEP250基因突变与Usher综合征及其他遗传性纤毛病相关,凸显了其重要的临床意义。重组人CEP250蛋白可用于体外结合实验、结构研究及功能重建实验,帮助研究人员深入解析上述分子机制。
产品规格与质量属性
重组人CEP250蛋白(货号:rp374831)采用重组表达技术生产,以确保实验的可重复性和批次间一致性。主要质量参数包括:
- 纯度:通过SDS-PAGE评估;具体纯度数值详见产品说明书,不同批次可能有所差异。
- 制剂:以适当缓冲液配制以维持蛋白稳定性;缓冲液组成及浓度请参阅最新产品说明书。
- 生物活性:功能验证数据(如有)详见产品说明书。
- 内毒素水平:按批次检测并报告;细胞实验建议使用低内毒素制剂。
研究人员应始终参阅随货提供的当前批次质量检测报告(CoA)以获取精确规格参数。
推荐应用
重组人CEP250蛋白适用于多种体外研究应用:
- 蛋白-蛋白相互作用研究:可作为Pull-down实验中的诱饵或猎物蛋白,用于鉴定CEP250结合伙伴,包括NEK2、根茎蛋白(rootletin)及其他中心体组分。
- 生化检测:适用于基于ELISA的定量分析、蛋白质印迹标准曲线制备以及NEK2相关激酶磷酸化实验。
- 结构生物学:可作为抗体制备的抗原,或用于结构蛋白质组学工作流程中的参考标准。
- 纤毛病研究:通过提供明确的重组底物,支持Usher综合征变体及其他CEP250相关纤毛病的机制研究。
- 无细胞重建:可用于无细胞体系中中心体聚合复合物的重建,以深入解析分子机制。
在开展大规模实验前,请务必针对您的具体检测体系对蛋白进行验证。
操作、储存与稳定性指南
正确操作重组人CEP250蛋白对于保持其完整性和活性至关重要:
- 储存温度:长期储存请置于-80°C。短期使用(不超过一周)可在-20°C保存——请以产品说明书为准。
- 分装:首次解冻后应立即进行单次用量分装,以避免反复冻融导致蛋白聚集和活性丧失。
- 解冻方式:在冰上或4°C缓慢解冻,勿加热以加速解冻过程。
- 操作注意事项:避免剧烈涡旋,用移液器轻柔混匀,实验操作过程中保持在冰上。
- 载体蛋白:在极低浓度下使用时,可考虑添加载体蛋白(如0.1% BSA),以减少蛋白吸附于管壁造成的损失。
- 有效期:请查阅CoA了解产品有效期信息,切勿在规定有效期后使用。
质量控制与验证
Aladdin Scientific对每批重组人CEP250蛋白实施严格的质量控制程序,标准质控检测通常包括:
- SDS-PAGE分析:确认重组蛋白的表观分子量及纯度分布。
- 蛋白质印迹(Western Blot):使用抗CEP250抗体或抗标签抗体(视情况而定)进行蛋白鉴定。
- 内毒素检测:采用鲎试剂(LAL)法或等效方法进行检测。
- 浓度测定:通过紫外吸收(A280)或BCA/Bradford法测定蛋白浓度。
所有质控数据均记录于随产品发货的质量检测报告(CoA)中。建议研究人员在将本蛋白纳入关键检测流程前,进行应用特异性验证,例如功能活性确认。
常见问题
CEP250的生物学功能是什么?它对研究有何重要意义?
CEP250(C-Nap1)是一种中心体卷曲螺旋蛋白,在间期负责维持中心粒聚合,并在进入有丝分裂时被NEK2激酶磷酸化解离,从而启动中心体分离。CEP250同时也是初级纤毛发生所必需的,其基因突变与Usher综合征等纤毛病相关。这些功能使其成为研究细胞周期调控、纤毛生物学及遗传性疾病机制的重要靶点。
应如何储存重组人CEP250蛋白以维持其活性?
建议将蛋白长期储存于-80°C。首次解冻后,应立即分装为单次使用量,以避免反复冻融。解冻时请在冰上或4°C进行,使用过程中保持样品置于冰上。请务必参阅产品说明书和质量检测报告(CoA),以获取特定批次的储存条件和有效期信息。
重组人CEP250蛋白(rp374831)已验证适用于哪些应用?
重组人CEP250蛋白适用于蛋白-蛋白相互作用研究(Pull-down、共免疫沉淀)、ELISA、蛋白质印迹标准曲线制备、激酶活性检测、抗体制备抗原准备及无细胞重建实验。产品说明书中提供了应用特异性验证数据;用户在使用前应确认该蛋白是否适合其具体实验体系。
CEP250是否存在与转化研究相关的已知疾病关联?
是的。CEP250基因突变已被证实与Usher综合征(一种导致听力和视力联合丧失的疾病)及其他纤毛病相关。重组CEP250蛋白可作为体外研究致病变体、评估结合伙伴相互作用破坏以及在生化体系中筛选潜在治疗干预手段的工具。
如何确认收到的CEP250蛋白批次的鉴定信息和纯度?
每批重组人CEP250蛋白均附有质量检测报告(CoA),内容包括SDS-PAGE纯度数据、浓度、内毒素水平及鉴定结果。研究人员还可在内部使用抗CEP250抗体进行蛋白质印迹实验,以在使用前独立验证蛋白鉴定信息。
参考文献
- Fry AM, Mayor T, Meraldi P, Stierhof YD, Tanaka K, Nigg EA. C-Nap1, a novel centrosomal coiled-coil protein and candidate substrate of the cell cycle-regulated protein kinase Nek2. J Cell Biol. 1998;141(7):1563-1574. PMID:9647645
- Graser S, Stierhof YD, Nigg EA. Cep68 and Cep215 (Cdk5rap2) are required for centrosome cohesion. J Cell Sci. 2007;120(Pt 24):4321-4331. PMID:18042621
- Khateb S, Zelinger L, Mizrahi-Meissonnier L, et al. A homozygous nonsense CEP250 mutation combined with a heterozygous nonsense PCDH15 mutation is associated with Usher syndrome. J Med Genet. 2014;51(7):460-469. PMID:24760770
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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