重组人CFAP58蛋白:操作与使用方案
重组人CFAP58蛋白:操作与使用方案
Recombinant Human CFAP58 Protein 是一种研究级试剂,专为支持纤毛相关生物学过程的研究而设计,需经过规范的复溶、精确的储存及经验证的操作流程,以确保实验结果的可重复性。
- 产品名称
- 重组人CFAP58蛋白
- 货号
- rp375998
- 蛋白来源
- 人(智人)
- 蛋白类型
- 重组纤毛和鞭毛相关蛋白58
- 推荐储存条件
- -20°C或-80°C;避免反复冻融
- 主要研究领域
- 纤毛生物学、细胞运动、纤毛病研究
CFAP58概述及其研究意义
CFAP58(纤毛和鞭毛相关蛋白58)是由人类CFAP58基因编码的蛋白质,与纤毛和鞭毛的结构及功能完整性密切相关。纤毛和鞭毛是细胞运动、液体流动和信号转导的关键细胞器。CFAP58的失调或突变与纤毛病有关——纤毛病是一类由纤毛功能缺陷引起的疾病,可影响肺、肾及生殖系统等器官。
阿拉丁科学的重组人CFAP58蛋白(rp375998)使研究人员能够研究CFAP58的功能、筛选结合配体、开发抗体,并探究其在疾病模型中的作用。该试剂采用重组方式生产,确保批次间一致性和体外研究所需的确定纯度。
复溶方案
正确的复溶操作对维持蛋白活性和防止聚集至关重要。复溶重组人CFAP58蛋白时,请遵循以下步骤:
- 平衡温度:开瓶前,将小瓶在室温下平衡10–15分钟,以防止凝结水接触冻干物料。
- 离心:将密封小瓶短暂离心(1,000–2,000 × g,30秒),使冻干物料沉集于瓶底。
- 加入复溶缓冲液:将蛋白质溶于无菌超纯水或推荐缓冲液(如PBS,pH 7.4)中,配制所需工作浓度。沿小瓶内壁缓慢加入复溶液,勿直接滴在冻干饼上。
- 轻柔溶解:静置小瓶5分钟后,轻轻旋转或吸打混匀。请勿涡旋振荡,以免蛋白质变性。
- 检查溶解情况:目视检查溶液是否澄清、无颗粒。若仍浑浊,低速离心后取上清液使用。
注:实际复溶体积和推荐缓冲液应以产品专属数据表为准。请参阅每批次附带的质量检验报告(CoA)。
储存与稳定性指南
为保持重组人CFAP58蛋白的生物活性和结构完整性,请遵循以下储存指南:
- 短期储存(最长1周):在含适当载体蛋白的缓冲液中(如PBS中含0.1–0.5% BSA)于4°C储存,以在频繁使用期间稳定蛋白质。
- 长期储存:将复溶蛋白分装为单次用量,于-20°C或最好-80°C储存,以最大限度延长保质期。
- 避免反复冻融:反复冻融会显著降低蛋白活性。首次使用前请提前分装备用。
- 添加载体蛋白:在与下游实验兼容的前提下,添加载体蛋白(如BSA)可提高稳定性并减少非特异性吸附于管壁。
- 有效期:请参阅批次专属CoA中的推荐使用期限。冻干蛋白于-20°C干燥储存通常可稳定长达12个月;具体以产品数据表为准。
注:rp375998的具体保质期数据和稳定性条件应以官方产品数据表和CoA为准。
质量验证与功能应用
在开展关键实验前,请使用以下方法对复溶后的重组人CFAP58蛋白的质量和活性进行验证:
质量控制检查
- SDS-PAGE:进行还原性SDS-PAGE电泳,确认预期分子量条带并评估纯度。与产品数据表中标注的分子量对比。
- 蛋白质免疫印迹(Western Blot):在还原条件下使用抗CFAP58抗体确认蛋白身份。
- 蛋白定量:使用BCA法或Bradford法测定复溶液的实际蛋白浓度,并与CoA中标注浓度对照核实。
研究应用
重组人CFAP58蛋白适用于多种体外研究应用,包括但不限于:
- 生化相互作用研究(共免疫沉淀、pull-down实验)
- 抗体制备和免疫原制备
- ELISA标准曲线开发
- 结构与生物物理表征研究
- 探究纤毛相关蛋白网络的无细胞功能实验
注:特定应用的适用性应由研究人员自行确认。请参阅CFAP58生物学相关文献以获取经验证的实验条件。
安全、废弃处理及订购信息
安全性:重组人CFAP58蛋白仅供体外研究使用,不得用于人体或动物。处理所有重组蛋白时,请遵循标准实验室生物安全规范(BSL-1或按所在机构规定执行)。请佩戴适当的个人防护装备,包括手套、实验服和护目镜。废弃处理方面,请咨询所在机构的生物安全指南。
废弃处理:含蛋白质材料的废弃处置应符合当地、国家及机构关于生物废弃物的相关法规。根据要求,在处置前通过高压灭菌或化学处理对材料进行灭活。
订购:重组人CFAP58蛋白可通过阿拉丁科学订购,货号为rp375998。请联系当地阿拉丁科学代表,或访问阿拉丁科学官网下单、申请报价,或获取最新产品数据表和质量检验报告。
常见问题
重组人CFAP58蛋白的推荐复溶缓冲液是什么?
该蛋白质通常在无菌超纯水或PBS(pH 7.4)中复溶。为获得最佳稳定性,可加入载体蛋白(如0.1% BSA)。请务必参阅货号rp375998附带的批次专属质量检验报告(CoA)和产品数据表,以获取制造商的具体建议。
如何储存重组人CFAP58蛋白以维持其活性?
短期使用(最长一周)时,将复溶蛋白储存于4°C的稳定缓冲液中。长期储存时,分装为单次用量,于-20°C或-80°C保存。请避免反复冻融,因为这会显著降低蛋白的生物活性。
重组人CFAP58蛋白经过验证适用于哪些实验应用?
重组人CFAP58蛋白(rp375998)适用于体外研究应用,包括生化相互作用研究(pull-down、共免疫沉淀)、抗体开发、ELISA标准品制备及生物物理表征。研究人员应在各自实验室环境中验证其对特定实验的适用性。
重组人CFAP58蛋白是否可用于细胞实验?
重组人CFAP58蛋白主要用于体外生化实验。细胞实验中的应用可能可行,但需要研究人员进行独立验证,包括评估细胞摄取、潜在免疫原性及功能读数。本产品不适用于体内或临床用途。
如何确认复溶蛋白质的身份和纯度?
通过还原性SDS-PAGE电泳验证预期分子量条带,并通过比较条带强度评估纯度。使用特异性抗CFAP58抗体进行Western Blot确认蛋白身份。蛋白浓度应使用BCA法或Bradford法测定,并与CoA数值对比。
参考文献
- Aladdin Scientific. Recombinant Human CFAP58 Protein, SKU rp375998. Product Datasheet and Certificate of Analysis.
- Reiter JF, Leroux MR. Genes and molecular pathways underpinning ciliopathies. Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2017;18(9):533-547. doi:10.1038/nrm.2017.60
- Fliegauf M, Benzing T, Omran H. When cilia go wrong: cilia defects and ciliopathies. Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2007;8(11):880-893. doi:10.1038/nrm2278
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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