重组人CFAP77蛋白:研究指南
重组人CFAP77蛋白:研究指南
Recombinant Human CFAP77 Protein是一种纤毛和鞭毛相关重组蛋白,适用于体外研究,包括功能研究、抗体验证及轴丝组分的结构研究。
- 产品名称
- 重组人CFAP77蛋白
- 货号
- rp374838
- 蛋白家族
- 纤毛和鞭毛相关蛋白(CFAP)家族
- 物种来源
- 人(智人)
- 蛋白类型
- 在异源系统中表达的重组蛋白
- 主要应用
- 体外研究:功能检测、抗体验证、结合研究
- 储存建议
- 储存于-80°C;避免反复冻融(重组蛋白通用建议)
CFAP77的生物学背景
CFAP77(纤毛和鞭毛相关蛋白77)是CFAP蛋白家族的成员,该家族蛋白定位于纤毛和鞭毛,参与维持这些细胞器的结构完整性和运动功能。纤毛和鞭毛是存在于许多真核细胞表面的微管基础附属结构,在液体流动、感觉信号传导和细胞运动中发挥关键作用。
轴丝是纤毛和鞭毛的核心结构单元,由高度有序的微管双联体及其周围的相关蛋白组成。CFAP77被认为与轴丝结构相关,但其精确的分子功能尚需进一步表征。纤毛相关蛋白的功能异常与一类称为纤毛病的疾病有关,可影响多个器官系统,包括呼吸道、生殖系统和中枢神经系统。
CFAP77的重组生产使研究人员能够在受控的无细胞环境中研究该蛋白,有助于进行生物化学和生物物理研究,而这些研究若使用内源性蛋白来源则难以实现。
推荐研究应用
重组人CFAP77蛋白(rp374838)适用于多种体外研究应用。研究人员在关键实验中使用前,应针对每种具体应用对该蛋白进行验证。
- 抗体验证:在通过Western blot、ELISA或免疫沉淀验证抗CFAP77抗体时,可用作阳性对照抗原。
- 蛋白-蛋白相互作用研究:用于pull-down实验或共免疫沉淀实验,以鉴定轴丝或纤毛蛋白网络中的结合伴侣。
- 结构与生物物理研究:适用于圆二色谱、动态光散射或其他生物物理表征技术的底物。
- 功能检测:在明确的体外条件下研究CFAP77的生物化学活性或结合特性。
- 标准曲线制备:用作以CFAP77为靶点的ELISA检测系统中的定量标准品。
注意:所有应用均应由终端用户进行实验验证。特定活性及对特定检测格式的适用性取决于批次特定表征数据,可向Aladdin Scientific索取。
操作、复溶及储存指南
正确操作重组人CFAP77蛋白对于保持其完整性和生物活性至关重要。以下为适用于重组蛋白的通用最佳操作规范;请始终参阅产品特定数据表以获取批次确认参数。
收货时
- 收货后立即检查货物,确认产品在运输过程中维持了正确的温度。
- 开瓶前短暂离心(1,000–2,000 × g,30秒),使附着于瓶盖或瓶壁上的物料沉积。
复溶
- 若为冻干形式,按数据表推荐的缓冲液(通常为无菌PBS或制造商指定缓冲液)复溶至指定浓度。
- 复溶前将小瓶平衡至室温,以降低聚集风险。
- 通过轻柔吹打混匀;避免涡旋,以防蛋白质变性。
储存
- 长期稳定性储存于-80°C。
- 短期使用(最多1周),在4°C储存可能可以接受;请以数据表规格为准。
- 冻存前分装为单次用量,以避免反复冻融,反复冻融会降低蛋白活性并增加聚集。
- 低浓度长期储存时,添加载体蛋白(如0.1% BSA)可提高稳定性。
质量注意事项与实验最佳实践
为使用重组人CFAP77蛋白获得可重复且可靠的实验结果,请考虑以下质量和实验最佳实践要点:
- 纯度评估:在关键实验前,通过SDS-PAGE或同等方法确认蛋白纯度。如需批次特定的质量检验报告(CoA)数据,请联系Aladdin Scientific。
- 内毒素水平:对于细胞实验,验证内毒素水平在可接受范围内。从产品数据表或CoA获取内毒素检测数据。
- 蛋白浓度测定:通过已验证方法(如BCA法、A280吸光度法)测定蛋白浓度,而非仅依赖标称浓度,因批次间可能存在细微差异。
- 阳性和阴性对照:在功能和结合实验中始终加入适当的对照,以排除非特异性信号。
- 聚集监测:若复溶或解冻后观察到蛋白浑浊,在4°C以≥10,000 × g离心10分钟,使用澄清后的上清液。
- 批次一致性:当实验间重现性至关重要时,从同一批次预留足够的分装量以完成整个项目。
常见问题
CFAP77是什么?它与纤毛研究有何关联?
CFAP77(纤毛和鞭毛相关蛋白77)是一种与纤毛和鞭毛轴丝相关的蛋白质。它在纤毛生物学研究中备受关注,因为轴丝蛋白的功能异常与纤毛病有关,纤毛病是一组影响依赖纤毛功能器官(如肺、肾和生殖系统)的疾病。重组CFAP77可用于体外研究其功能和相互作用。
如何复溶和储存重组人CFAP77蛋白以维持其活性?
若蛋白以冻干形式提供,请按产品数据表指定的缓冲液复溶,通过轻柔吹打混匀,避免涡旋。长期储存时,将分装品置于-80°C,避免反复冻融。短期使用时,在4°C储存最多一周可能可以接受;请务必参阅批次特定数据表以获取已确认参数。
重组人CFAP77蛋白经验证适用于哪些实验应用?
重组人CFAP77蛋白适用于多种体外研究应用,包括抗体验证(Western blot、ELISA)、蛋白-蛋白相互作用研究、生物物理表征,以及用作ELISA标准品。用户应针对每种预期应用对蛋白进行实验验证,批次特定表征数据可向Aladdin Scientific索取。
在使用CFAP77时,如何最大程度减少蛋白聚集?
为最大程度减少聚集,复溶前使小瓶升温至室温,轻柔混匀避免涡旋,并在冻存前分装为单次用量。若解冻后观察到聚集,在4°C以≥10,000 × g离心10分钟,仅使用澄清后的上清液。在储存期间添加0.1% BSA等载体蛋白也有助于在低浓度下稳定蛋白质。
参考文献
- Reiter JF, Leroux MR. Genes and molecular pathways underpinning ciliopathies. Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2017;18(9):533-547. doi:10.1038/nrm.2017.60
- Pazour GJ, Agrin N, Leszyk J, Witman GB. Proteomic analysis of a eukaryotic cilium. Journal of Cell Biology. 2005;170(1):103-113. doi:10.1083/jcb.200504008
- Aladdin Scientific. Recombinant Human CFAP77 Protein, SKU rp374838. Product Datasheet.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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