技术文章

重组人CHMP4A蛋白:研究指南

Recombinant Human CHMP4A Protein是ESCRT-III复合物的核心组分,专为内体分选、多泡体生物发生、病毒出芽及胞质分裂等研究应用而制备。

蛋白质名称
带电多泡体蛋白4A(CHMP4A)
货号
rp369685
复合物归属
ESCRT-III(运输所需内体分选复合物III)
主要生物学功能
多泡体(MVB)生物发生、胞质分裂期间的膜切断、病毒出芽
基因别名
CHMP4A、SNF7L3、hVps32-1
预期用途
仅供研究使用(RUO);不用于诊断或治疗目的

CHMP4A是什么?生物学背景

CHMP4A(带电多泡体蛋白4A),又称SNF7L3和hVps32-1,是人类细胞ESCRT-III(运输所需内体分选复合物III)机器的核心亚基。ESCRT-III是一组在进化上高度保守的蛋白质复合物,介导以远离细胞质侧出芽为特征的膜重塑事件。

作为ESCRT-III组分,CHMP4A在三个主要细胞过程中发挥核心作用:(1)多泡体(MVB)内腔内小泡的形成,这对泛素化货物的溶酶体降解至关重要;(2)胞质分裂最终膜切断步骤,使两个子细胞实现物理分离;(3)部分包膜病毒(包括HIV-1等逆转录病毒)从宿主细胞质膜出芽。

CHMP4A组装成螺旋丝,驱动膜变形。它与上游ESCRT机器组分(如ALIX/PDCD6IP)及下游AAA-ATP酶VPS4相互作用,后者通过解聚ESCRT-III聚合物完成膜裂变。因此,研究CHMP4A功能对内体生物学、病毒发病机制和细胞分裂领域具有重要意义。

产品描述与质量属性

阿拉丁科学的重组人CHMP4A蛋白(货号:rp369685)专为严苛的生化和细胞生物学研究应用而生产。该重组蛋白来源于人CHMP4A基因序列,在适当的异源系统中表达,以获得定义明确的研究级产品。

关于精确且最新的规格信息——包括分子量、表达宿主、标签信息、配方缓冲液、纯度等级及储存条件——强烈建议研究人员查阅阿拉丁科学官网上的官方产品说明书,或直接联系技术支持。该目录产品的规格详情须经批次质量验证,质检报告(CoA)可按需提供。

研究级重组CHMP4A蛋白的一般质量属性包括:通过SDS-PAGE和/或Western blot确认蛋白质身份、通过光密度法评估纯度、内毒素检测,以及适用时的活性验证。阿拉丁科学实施严格的质量控制流程,以确保各研究应用的重现性。

研究应用

重组人CHMP4A蛋白是一种多功能试剂,适用于多种体外和生化研究应用:

  • 蛋白质-蛋白质相互作用研究:CHMP4A是多种ESCRT组分的成熟相互作用伙伴。该重组蛋白可用于pull-down分析、共免疫沉淀验证、表面等离子体共振(SPR)和等温滴定量热法(ITC),以绘制与ALIX、CHMP4B、CHMP4C和VPS4等伙伴的结合界面。
  • 结构生物学:重组CHMP4A可作为冷冻电子显微镜(cryo-EM)或X射线晶体学研究的底物,用于阐明ESCRT-III丝状结构和膜重塑机制。
  • 生化重建:该蛋白可整合至模拟MVB形成或膜裂变的体外重建系统中,从而实现对ESCRT-III功能的机制解析。
  • 抗体开发与验证:重组CHMP4A可作为抗原,用于产生或验证针对Western blot、免疫荧光或ELISA格式中天然蛋白的抗体。
  • 药物发现:由于ESCRT通路与肿瘤学和病毒学密切相关,CHMP4A是抑制剂筛选分析的潜在靶点。

操作、储存及复溶指南

妥善操作重组蛋白对维持其活性和完整性至关重要。以下一般最佳实践指南适用于重组人CHMP4A蛋白;请始终以产品专属说明书为权威操作依据:

  • 储存:收到产品后,短暂离心小瓶以收集瓶盖或瓶壁上的残留物料。按说明书规定的条件储存(通常长期储存于−80 °C,短期使用储存于−20 °C)。避免反复冻融,以防蛋白质聚集和活性丧失。
  • 复溶:若以冻干形式提供,按说明书建议的缓冲液和体积进行复溶。复溶前将小瓶在室温下短暂平衡,轻柔吹打混匀,切勿涡旋振荡。
  • 分装:对于需在多次实验中使用的蛋白质,复溶后立即制备单次用量的分装样品,以减少冻融次数。
  • 工作浓度:针对每种特定分析,通过实验经验优化蛋白质浓度,建议进行浓度梯度预实验。
  • 载体蛋白:某些配方含有BSA作为稳定性载体。若BSA干扰是下游分析的潜在问题,请通过CoA确认。

常见问题

ESCRT-III通路是什么,CHMP4A为何重要?

ESCRT(运输所需内体分选复合物)通路是一种保守的细胞机器,驱动膜向细胞质外侧出芽。ESCRT-III作为该通路的效应臂,直接重塑膜以在MVB中产生内腔小泡、完成胞质分裂切断,并促进病毒出胞。CHMP4A是ESCRT-III的核心亚基,其聚合成螺旋丝的过程在机制上对这些膜裂变事件至关重要,使其成为细胞生物学和病毒学领域的重要研究靶点。

重组人CHMP4A蛋白适用于哪些应用?

重组人CHMP4A蛋白(rp369685)适用于多种研究应用,包括蛋白质-蛋白质相互作用研究(pull-down、SPR、ITC)、结构生物学研究(cryo-EM、晶体学)、ESCRT-III功能的体外生化重建、抗体生产与验证,以及药物发现项目中的抑制剂筛选。研究人员应针对每种特定分析格式优化实验条件。

如何储存重组人CHMP4A蛋白以保持其活性?

作为一般指南,重组蛋白应在−80 °C长期保存,短期使用时存放于−20 °C。应通过制备单次用量分装样品避免反复冻融。请务必查阅产品专属说明书和质检报告,以获取rp369685批次的权威储存和复溶条件,因配方详情可能有所不同。

重组人CHMP4A蛋白是否可用于诊断或治疗目的?

不可以。重组人CHMP4A蛋白(rp369685)仅供研究使用(RUO),尚未经过诊断、临床或治疗应用验证。任何此类用途均超出本产品的预期范围。

参考文献

  1. Hurley, J.H. (2010). The ESCRT complexes. Critical Reviews in Biochemistry and Molecular Biology, 45(6), 463–487. doi:10.3109/10409238.2010.502516
  2. Henne, W.M., Buchkovich, N.J., & Emr, S.D. (2011). The ESCRT pathway. Developmental Cell, 21(1), 77–91. doi:10.1016/j.devcel.2011.05.015
  3. Bhatt, D.M. & Bhatt, M. (general textbook-level reference to ESCRT-III and CHMP4 function in cytokinesis and MVB biogenesis — specific author/title not confirmed from source material).

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

目录: 技术文章

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《重组人CHMP4A蛋白:研究指南》. 阿拉丁知识库,更新于 2026年10月29日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/recombinant-human-chmp4a-protein-research-guide.html
这篇文章对您有帮助吗? Yes No 有 1 人觉得有帮助