重组人CHMP4BP1蛋白:实验方案与使用指南
重组人CHMP4BP1蛋白:实验方案与使用指南
Recombinant Human CHMP4BP1 Protein是一种研究级重组蛋白,专为涉及ESCRT机器、多泡体生物发生、膜重塑及胞质分裂相关生物学过程的研究而设计。
- 产品名称
- 重组人CHMP4BP1蛋白
- 货号
- rp376263
- 物种来源
- 人(智人)
- 蛋白家族
- CHMP(带电多泡体蛋白)家族,ESCRT-III相关蛋白
- 主要应用
- 生化检测、蛋白质相互作用研究、ESCRT通路研究
- 储存建议
- 储存于-80°C,避免反复冻融
- 参考来源
- absea #PP-9870
CHMP4BP1概述及生物学意义
CHMP4BP1(带电多泡体蛋白4B结合蛋白1)是一种与CHMP4B相互作用的蛋白质,CHMP4B是ESCRT-III(转运所需内体分选复合体III)机器的核心组分。ESCRT通路对多种膜重塑事件至关重要,包括多泡体(MVB)生物发生、病毒出芽及胞质分裂末期离断。
CHMP4BP1参与调控CHMP4B的定位和功能,影响胞质分裂过程中中间体处ESCRT-III的组装动态。对CHMP4BP1的研究有助于理解ESCRT复合体在分裂细胞中如何在时空上受到精确调控。
重组人CHMP4BP1蛋白(货号:rp376263)为研究人员提供了一种明确定义的试剂,可用于体外生化研究、结合实验及ESCRT-III调控网络的机制研究。
复溶与储存方案
所需材料:
- 重组人CHMP4BP1蛋白(货号:rp376263)
- 无菌去离子水或厂商推荐的复溶缓冲液
- 微量离心管(建议使用低蛋白结合型)
- 冰或冷却块
复溶步骤:
- 开瓶前将小瓶低速离心(约200–500 × g,5–10秒),使冻干物集中于瓶底。
- 将适量无菌复溶缓冲液(具体推荐缓冲液及用量请参阅产品数据表)逐滴加入小瓶中。
- 轻轻旋转或用移液管吹打溶液以溶解蛋白质。请勿涡旋,剧烈震荡可能导致蛋白质变性。
- 将溶液置于冰上静置5–10分钟,确保完全溶解。
- 将复溶后的蛋白质分装为单次使用量,以减少冻融次数。
储存条件:
- 按产品数据表规定,将冻干蛋白储存于-20°C或-80°C。
- 复溶后的蛋白质长期储存于-80°C。
- 避免反复冻融,否则可能降低蛋白质活性和完整性。
- 如加入BSA等稳定载体蛋白,短期储存(不超过1周)可在4°C进行。
推荐应用与实验使用
重组人CHMP4BP1蛋白适用于多种体外研究应用。研究人员应针对每种具体应用对蛋白质进行验证,并据此优化实验条件。
推荐应用包括:
- 蛋白质–蛋白质相互作用研究:在pull-down实验或共免疫沉淀体系中使用CHMP4BP1蛋白,表征其与CHMP4B及其他ESCRT-III组分的相互作用。
- 生化活性检测:在无细胞重建体系中研究CHMP4BP1在ESCRT-III组装或解聚中的调控作用。
- 结构研究:将纯化重组蛋白用于生物物理分析,如尺寸排阻色谱、动态光散射或冷冻电镜样品制备。
- 抗体开发与验证:用作ELISA校准或蛋白质印迹阳性对照的抗原标准品。
工作浓度:每种检测体系的最佳工作浓度应通过实验确定。建议起始浓度请参阅产品数据表。
重要提示:本产品仅供科学研究使用(RUO),不适用于诊断、治疗或临床用途。
质量控制与操作注意事项
质量控制:
每批次重组人CHMP4BP1蛋白在发货前均经过质量控制检测。典型质控分析包括:
- SDS-PAGE分析,确认分子量和纯度
- 适用时进行生物活性检测
- 鲎试剂(LAL)法内毒素检测
具体质控数据(包括纯度百分比、内毒素水平及批次特定结果)均记录于产品分析证书(CoA)中。请联系Aladdin Scientific获取您特定批次号的CoA。
操作注意事项:
- 处理复溶蛋白时始终在冰上操作,以维持稳定性。
- 使用低蛋白结合移液枪头和离心管,以减少因吸附导致的蛋白质损失。
- 如发现沉淀,使用前应简短离心。
- 不得使用出现不可逆聚集或明显变色迹象的蛋白质。
- 应遵守标准实验室安全规程;请参阅本产品安全数据表(SDS)。
常见问题
CHMP4BP1是什么?它与ESCRT研究有何关联?
CHMP4BP1是CHMP4B的结合伴侣,CHMP4B是ESCRT-III复合体的关键组分,参与膜重塑、多泡体生物发生、病毒出芽及胞质分裂末期离断。研究CHMP4BP1有助于阐明ESCRT-III的组装和功能在细胞内如何受到时空调控。
如何复溶重组人CHMP4BP1蛋白?
开瓶前将小瓶短暂离心,然后将推荐体积的无菌复溶缓冲液逐滴加入。轻轻旋转溶解,切勿涡旋。在冰上静置5–10分钟后,分装为单次使用量并储存于-80°C。请务必参阅产品数据表获取缓冲液规格和推荐用量。
重组人CHMP4BP1蛋白能承受多少次冻融循环?
不建议反复冻融,因为这会降低蛋白质活性和结构完整性。最佳做法是在复溶后立即将蛋白质分装为单次使用量,以避免反复冻融。
重组人CHMP4BP1蛋白是否适用于体内或临床用途?
不适用。本产品仅供科学研究使用(RUO),未经批准,不适用于诊断、治疗或临床应用。研究人员在使用本试剂时应遵守所有适用的机构和法规要求。
如何获取我特定批次的分析证书(CoA)?
请携带批次号和订单信息联系Aladdin Scientific客服团队,申请分析证书。CoA提供批次特定的质量控制数据,包括纯度、内毒素水平和活性结果。
参考文献
- absea Product Reference: PP-9870. Recombinant Human CHMP4BP1 Protein.
- Hurley JH. ESCRTs are everywhere. EMBO J. 2015;34(19):2398-2407. doi:10.15252/embj.201592484
- Morita E, Sundquist WI. Retrovirus budding. Annu Rev Cell Dev Biol. 2004;20:395-425. doi:10.1146/annurev.cellbio.20.010403.102350
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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