重组人CLPTM1蛋白:使用与操作指南
重组人CLPTM1蛋白:使用与操作指南
Recombinant Human CLPTM1 Protein 是一种研究级试剂,专为研究唇腭裂跨膜蛋白1(CLPTM1)在细胞凋亡调控、细胞存活信号及肿瘤生物学中作用的科学家而设计。
- 产品名称
- 重组人CLPTM1蛋白
- 货号
- rp369322
- 供应商参考编号
- absea#PQ-554
- 蛋白来源
- 人(智人)
- 应用领域
- 细胞生物学、凋亡研究、肿瘤研究
- 储存建议
- 收到后于-80°C储存;避免反复冻融
- 操作注意事项
- 按产品数据表指示用适当缓冲液复溶;使用前短暂离心
背景:CLPTM1及其生物学意义
CLPTM1(唇腭裂跨膜蛋白1)是由人类CLPTM1基因编码的多次跨膜蛋白。该蛋白最初通过腭裂的定位克隆研究被发现,此后被证实在多种组织中广泛表达。研究表明,CLPTM1参与细胞凋亡调控和细胞存活通路。值得注意的是,CLPTM1在多种肿瘤中存在过表达现象,提示其可能是潜在的肿瘤靶点和生物标志物。在分子水平上研究CLPTM1功能需要特性明确的重组蛋白工具,因此重组人CLPTM1蛋白是相关研究不可或缺的试剂。
复溶与储存方案
请按照以下步骤正确复溶和储存重组人CLPTM1蛋白(rp369322):
- 离心:收到产品后,开盖前对小瓶进行短暂离心(例如低速离心5–10秒),使冻干物收集至管底。
- 复溶:使用产品数据表中规定的缓冲液和体积进行复溶(通常为无菌PBS或含载体蛋白的缓冲液)。将复溶缓冲液沿小瓶壁轻轻加入,在室温下静置10分钟使蛋白溶解,勿涡旋混匀。
- 分装:复溶后立即制备单次使用的分装,以减少冻融次数。
- 短期储存:工作分装可于4°C保存最长1周。
- 长期储存:未使用的分装于-80°C保存,避免反复冻融,以免影响蛋白完整性和活性。
- 载体蛋白:若蛋白使用浓度很低,建议添加载体蛋白(如0.1% BSA)以提高稳定性。
注意:请务必参阅具体产品数据表(absea#PQ-554)中批次特定的复溶体积、浓度及缓冲液配方信息。
实验应用与使用技巧
重组人CLPTM1蛋白适用于多种体外研究应用,典型用途包括:
- 蛋白质-蛋白质相互作用研究:在pull-down实验或共免疫沉淀实验中用作诱饵或猎物蛋白,以鉴定CLPTM1的结合配体。
- 抗体验证:作为阳性对照抗原,用于在Western blot、ELISA或点印迹等实验中验证抗CLPTM1抗体。
- 细胞实验:通过向细胞培养模型中补充该蛋白,并遵循既定的重组蛋白递送方案,研究CLPTM1在细胞凋亡和细胞存活中的作用。
- 结构研究:在适用情况下,将纯化蛋白作为生物物理表征的起始材料(如圆二色光谱、动态光散射)。
在设计实验时,应通过实验摸索优化蛋白浓度,并纳入适当的阴性对照。建议在开展大规模实验前,先进行多浓度(如0.1、1和10 µg/mL)的预实验,以建立剂量-效应关系。
质量、安全及合规注意事项
质量:阿拉丁科学公司的重组人CLPTM1蛋白按照研究级标准生产和质量控制。每批次均经过纯度和特性鉴定检测;批次特定数据(包括纯度、内毒素水平及生物活性)请参阅随产品附带的质量检验报告(CoA)(供应商参考编号:absea#PQ-554)。
安全性:虽然源自人类序列的重组蛋白通常被认为风险较低,但仍应遵循标准实验室生物安全操作规范。请佩戴适当的个人防护装备(PPE),包括手套、实验服和护目镜,避免吸入或误食。所有含蛋白质的废弃物应按照所在机构的生物安全规定进行处置。
合规性:本产品仅供研究使用(RUO),未经批准用于诊断、治疗或临床用途。请确保所有实验符合所在机构的伦理和生物安全法规要求。
常见问题排查
如果在使用重组人CLPTM1蛋白过程中遇到问题,请参考以下排查指南:
- 复溶后蛋白不溶解:在室温下延长等待时间(最长30分钟),或轻柔地上下吹打。切勿涡旋。如怀疑发生聚集,可低速短暂离心后取上清液使用。
- 储存后活性丧失:确认蛋白于-80°C储存且冻融次数已最小化,确认复溶缓冲液与数据表建议一致,考虑添加稳定性载体蛋白。
- Western blot中出现非特异性条带:优化抗体浓度和封闭条件,确保蛋白样品未过量上样,并确认上样缓冲液兼容性。
- ELISA背景值偏高:提高洗涤强度,确保所有试剂在使用前已平衡至室温,验证包被浓度是否适合该实验格式。
如需进一步技术支持,请携带批次号和产品货号(rp369322)联系阿拉丁科学公司技术支持团队。
常见问题
CLPTM1是什么?它与肿瘤研究有何关联?
CLPTM1(唇腭裂跨膜蛋白1)是一种多次跨膜蛋白,与细胞凋亡调控和细胞存活信号通路有关。多种肿瘤类型中均有CLPTM1过表达的报道,使其成为潜在肿瘤生物标志物和治疗靶点的研究热点。重组人CLPTM1蛋白使研究人员能够在受控的体外环境中研究这些功能。
如何复溶重组人CLPTM1蛋白(rp369322)?
开盖前对小瓶进行短暂离心,使冻干物收集至管底。将产品数据表(absea#PQ-554)中规定的复溶缓冲液沿瓶壁轻轻加入,在室温下静置约10分钟使蛋白溶解,勿涡旋。复溶后立即分装,以减少冻融次数。
该蛋白推荐的储存条件是什么?
重组人CLPTM1蛋白应于-80°C长期保存。工作分装可在4°C保存最长一周。应严格避免反复冻融,因为这会导致蛋白完整性下降并降低生物活性。
重组人CLPTM1蛋白适合体内或临床使用吗?
不适合。本产品仅供研究使用(RUO),未经验证、批准或许可用于诊断、治疗或临床应用。所有使用均须符合所在机构的生物安全和伦理规定。
如果在使用rp369322时遇到技术问题,应联系谁?
请联系阿拉丁科学公司技术支持团队。联系时请提供产品货号(rp369322)、供应商参考编号(absea#PQ-554)、批次号以及所遇问题的详细描述,以便高效排查问题。
参考文献
- Product Datasheet: Recombinant Human CLPTM1 Protein, absea#PQ-554, Aladdin Scientific SKU rp369322.
- UniProt entry for human CLPTM1 protein (Homo sapiens). UniProt Consortium.
- General best practices for recombinant protein reconstitution and storage in research applications.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)