常见问题(FAQs)

重组人CNOT4蛋白:常见问题与关键信息

Recombinant Human CNOT4 Protein是一种重要的科研试剂,助力科学家研究人类细胞系统中CCR4-NOT去腺苷酸化酶复合物、E3泛素连接酶活性及mRNA降解通路。

产品名称
重组人CNOT4蛋白
货号
rp372206
蛋白功能
CCR4-NOT复合物的组成成分;通过其RING指结构域具有E3泛素连接酶活性
生物学作用
参与mRNA去腺苷酸化、转录调控及蛋白质泛素化过程
物种来源
人(智人)
产品形式
通过异源表达系统生产的重组蛋白
供应商
Aladdin Scientific

CNOT4是什么?为何它在科研中至关重要?

CNOT4(CCR4-NOT转录复合物亚基4)是一种多功能蛋白,也是进化上高度保守的CCR4-NOT复合物的亚基之一。CCR4-NOT复合物是真核生物中主要的细胞质去腺苷酸化酶复合物,在mRNA降解、翻译抑制及转录后水平的基因表达调控中发挥核心作用。

CNOT4的显著特点在于其N末端含有RING(真正有趣的新基因)指结构域,赋予其E3泛素连接酶活性。这意味着CNOT4能够将泛素转移至底物蛋白,标记其进行蛋白酶体降解或改变其功能。通过在CCR4-NOT复合物中作为支架蛋白以及作为独立E3连接酶的双重角色,CNOT4参与调控转录、mRNA稳定性、蛋白质周转及细胞应激反应。

CNOT4及CCR4-NOT复合物的异常调控与发育缺陷、癌症及其他人类疾病相关,使CNOT4成为生化和细胞生物学研究的重要靶点。

重组人CNOT4蛋白的主要应用场景有哪些?

重组人CNOT4蛋白(货号:rp372206)适用于多种体外及无细胞研究应用,包括:

  • 生化检测:作为底物或活性酶用于泛素化实验,以表征CNOT4 E3连接酶活性并鉴定潜在底物或抑制剂。
  • 蛋白质相互作用研究:利用pull-down、共免疫沉淀或表面等离子体共振(SPR)等方法,研究CNOT4与其他CCR4-NOT亚基或配体蛋白的相互作用。
  • 结构研究:为CCR4-NOT复合物的晶体学或冷冻电镜研究提供纯化的重组蛋白。
  • 抗体制备与验证:作为抗原,用于制备或验证针对人CNOT4的特异性抗体。
  • 药物发现:筛选小分子化合物库,寻找CNOT4 E3连接酶活性的抑制剂或调节剂,作为肿瘤学或其他疾病领域的潜在先导化合物。

研究人员应针对每种具体应用确认适用性,并以实验方式优化条件,因为性能可能因实验情境不同而有所差异。

储存、操作及稳定性指南

正确的储存和操作对于维持重组人CNOT4蛋白的完整性和生物活性至关重要。适用于重组蛋白的通用最佳操作规范如下:

  • 储存温度:长期保存请置于−80 °C。避免反复冻融,以防蛋白聚集和活性丧失。
  • 短期储存:若蛋白将在数天内使用,可在4 °C条件下短期保存;请查阅产品数据表确认具体条件。
  • 分装:收到产品后,立即将蛋白分装为单次使用量,以减少冻融次数。
  • 载体蛋白:许多重组蛋白以BSA或甘油稳定保存。请查阅产品专属分析证书(CoA)了解配方详情。
  • 防止污染:使用无菌低吸附微量离心管和移液器吸头,操作时置于冰上进行。

注:货号rp372206的具体储存条件、缓冲液组成、浓度及稳定性数据,请以每批次随附的最新产品数据表和CoA为准。

质量、纯度及法规注意事项

Aladdin Scientific重组人CNOT4蛋白作为研究级试剂生产,仅供体外研究使用。主要质量注意事项包括:

  • 纯度:本产品类别中的重组蛋白通常通过SDS-PAGE分析确认纯度。rp372206的具体纯度数据请参阅产品CoA。
  • 身份确认:产品身份可通过Western印迹或质谱法进行确认。批次特定结果请参阅CoA。
  • 内毒素水平:对于对内毒素敏感的应用(如基于细胞的检测),请在CoA上核实内毒素含量。某些应用可能需要低内毒素制剂。
  • 非临床或诊断用途:本产品严格用于实验室研究目的,未经批准用于人体、动物或诊断试剂。
  • 批间一致性:如需了解批次特定质量文件及一致性数据,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。

常见问题

CNOT4在人类细胞中的生物学功能是什么?

CNOT4是真核生物主要mRNA去腺苷酸化酶复合物——CCR4-NOT复合物的亚基,参与mRNA降解和转录调控。其N末端RING指结构域赋予其E3泛素连接酶活性,使其能够对靶蛋白进行泛素化修饰,调节底物蛋白的稳定性或功能。通过上述活性,CNOT4在转录后和翻译后两个层面影响基因表达。

重组人CNOT4蛋白(rp372206)采用何种表达系统生产?

当前可用的资料中未详细说明货号rp372206所使用的具体表达系统(如大肠杆菌、杆状病毒/昆虫细胞或哺乳动物细胞)。需要此信息的研究人员应查阅产品数据表,或直接联系Aladdin Scientific技术支持获取批次特定的生产详情。

重组人CNOT4蛋白是否适合用于基于细胞的检测实验?

重组人CNOT4蛋白主要用于体外生化应用。用于基于细胞的检测实验在技术上可行,但需对递送方式、使用浓度和内毒素水平进行优化。研究人员应在分析证书上核实内毒素含量,并通过实验验证该蛋白是否适用于其特定的细胞体系。

在日常使用重组CNOT4蛋白时,如何防止活性损失?

为保持蛋白活性,收到产品后应立即分装,避免反复冻融;将分装品储存于−80 °C;实验操作时置于冰上进行。避免接触洗涤剂、极端pH或在室温下长时间放置。请始终参阅产品专属数据表了解推荐的操作条件。

重组人CNOT4蛋白能否用于结构生物学研究?

是的,纯化的重组蛋白(如CNOT4)常用于X射线晶体学和冷冻电镜等结构生物学应用。然而,适用性取决于蛋白的纯度、均一性以及可能需要去除的标签。在进行结构研究之前,研究人员应向Aladdin Scientific确认批次特定的纯度和配方详情。

参考文献

  1. Lau NC, et al. Human Ccr4-Not complexes contain variable deadenylase subunits. Biochemical Journal. 2009.
  2. Hanzawa H, et al. The structure of the C4C4 RING finger of human CNOT4 reveals a novel zinc-binding domain. Nature Structural Biology. 2001.
  3. Dölken L, et al. Transcriptional regulation and mRNA turnover via the CCR4-NOT complex. Molecular Cell. Review.

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

目录: 常见问题(FAQs)

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《重组人CNOT4蛋白:常见问题与关键信息》. 阿拉丁知识库,更新于 2026年10月30日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/recombinant-human-cnot4-protein-faqs.html
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