重组人FRMPD1蛋白:研究使用指南
重组人FRMPD1蛋白:研究使用指南
Recombinant Human FRMPD1 Protein是人类FERM和PDZ结构域蛋白1(FRMPD1)的重组形式,作为研究级试剂用于神经元支架蛋白、受体锚定及相关细胞信号通路的研究。
- 产品名称
- 重组人FRMPD1蛋白
- 货号
- rp372844
- 蛋白质家族
- FERM和PDZ结构域蛋白家族(FRMPD家族)
- 物种来源
- 人类(智人,Homo sapiens)
- 主要研究领域
- 神经科学、细胞信号转导、支架蛋白生物学
- 产品级别
- 仅供研究使用(RUO)
FRMPD1的生物学背景
FRMPD1(FERM和PDZ结构域蛋白1)是一种多结构域支架蛋白,由人类FRMPD1基因编码。它属于FRMPD蛋白家族,该家族的特征在于同时含有FERM(Four-point-one、Ezrin、Radixin、Moesin)结构域和一个或多个PDZ(PSD-95/Dlg/ZO-1)结构域。这些结构特征使FRMPD1能够作为分子支架,在特定亚细胞位置组织蛋白质复合体。
此类支架蛋白在锚定膜受体、离子通道和信号酶方面发挥重要作用,从而协调细胞内信号级联。FRMPD1与神经元功能密切相关,含PDZ结构域的蛋白质通常调控突触受体的定位与可塑性。对FRMPD家族成员的研究有助于探索神经病理学状态以及细胞极性、粘附和信号转导等更广泛的细胞生物学问题。
产品规格与质量属性
重组人FRMPD1蛋白(货号:rp372844)采用重组表达技术生产,为研究人员提供稳定、研究级的FRMPD1蛋白来源。由于批次特异性数据可能存在差异,研究人员应参阅当前产品数据表以确认以下规格的具体数值:
- 表达系统:请参阅当前数据表确认(FRMPD家族蛋白通常使用原核或哺乳动物表达系统)。
- 纯度:请参阅当前数据表确认;研究级重组蛋白通过SDS-PAGE测定纯度通常≥85%。
- 制剂:请参阅当前数据表确认;通常以含稳定剂添加物的缓冲水溶液形式供应。
- 分子量:请参阅当前数据表,依据所提供的全长或截短构建体确认。
- 内毒素水平:请参阅当前数据表确认;低内毒素制剂更适用于基于细胞的实验。
所有规格均应与每批次产品随附的质量检验报告(CoA)进行核对验证。
推荐操作、复溶与储存方案
正确操作重组人FRMPD1蛋白对于维持其生物活性和实验重复性至关重要。请遵循以下通用最佳实践指南,并始终以产品专用数据表中的权威说明为准:
收货时
- 立即检查货物。注意包装状态,并确认产品在适当温度条件下运输。
- 记录瓶签和CoA上的批号、有效期及储存条件。
复溶
- 若以冻干粉末形式供应,开瓶前应将样品瓶在室温下平衡10–15分钟。
- 按数据表规定加入推荐体积的无菌超纯水或指定缓冲液进行复溶。轻轻旋转或用移液枪吸打混匀;切勿剧烈涡旋,以免蛋白质变性。
- 复溶后在室温静置5–10分钟,确保完全溶解。
分装
- 制备单次使用的工作分装液,以避免反复冻融导致蛋白活性显著下降。
- 使用低吸附微量离心管,以最大限度减少蛋白质吸附损失。
储存
- 按数据表规定的条件储存未开封的完整样品瓶(长期储存通常为–20°C或–80°C)。
- 复溶后的蛋白质如需长期保存应置于–80°C,短期使用可置于4°C(通常不超过1周)。具体指导请参阅数据表。
- 尽量减少反复冻融次数;在条件允许时,冻融次数限制在2–3次以内。
研究应用
重组人FRMPD1蛋白仅供研究使用,可应用于多种体外实验场景。此类重组支架蛋白的典型研究应用包括但不限于:
- 蛋白质相互作用研究:用作下拉实验(pull-down)、共免疫沉淀(co-IP)或表面等离子体共振(SPR)实验中的诱饵蛋白或猎物蛋白,以鉴定和表征FRMPD1的结合伴侣。
- 生化实验:用于基于ELISA的结合实验或竞争性结合实验,以界定FERM或PDZ区域的结构域特异性相互作用。
- 结构生物学:用作晶体化试验或冷冻电子显微镜(cryo-EM)研究的底物,旨在解析FRMPD1或其复合体的三维结构。
- 抗体验证:用作阳性对照抗原,在蛋白质印迹(Western blot)、ELISA或免疫荧光实验中验证FRMPD1特异性抗体。
- 基于细胞的实验:在制剂条件允许时,用于重建实验或显微注射研究,以探究FRMPD1活性在细胞环境中的功能结果。
- 药物发现:用作筛选实验中的靶蛋白,以鉴定能够调节FRMPD1支架相互作用的小分子或肽类化合物。
研究人员应针对每项具体实验进行条件优化。本产品不适用于诊断、治疗或兽医用途。
常见问题排查
以下排查指南针对使用重组蛋白(如FRMPD1)时常见的实验挑战:
| 问题 | 可能原因 | 建议措施 |
|---|---|---|
| 活性实验中信号缺失或偏低 | 因储存不当或反复冻融导致蛋白失活 | 使用新鲜制备的分装液;核查储存温度;从原液重新制备分装液 |
| 蛋白质沉淀或聚集 | 复溶缓冲液不正确、蛋白浓度过高或含有不相容添加剂 | 使用数据表推荐的缓冲液;降低工作浓度;如适用,可添加载体蛋白(如0.1% BSA) |
| SDS-PAGE条带大小异常 | 翻译后修饰、标签存在或蛋白降解 | 对照CoA确认预期分子量;检查标签序列;与新批次比较以评估降解情况 |
| 结合实验中本底偏高 | 蛋白质非特异性吸附至表面或杂质相互作用 | 提高封闭严谨性;使用低吸附板或离心管;在相容条件下添加非离子型去污剂(如0.05% Tween-20) |
| 实验间结果不一致 | 工作浓度或缓冲液组成存在差异 | 制备主混合液;每次实验前使用BCA或Bradford法标准化蛋白定量 |
常见问题
FRMPD1是什么?它与研究的相关性体现在哪里?
FRMPD1是一种同时含有FERM和PDZ结构域的支架蛋白,能够在特定亚细胞位点组织多蛋白复合体。由于PDZ结构域支架蛋白是突触受体定位、细胞极性和信号转导的核心调控因子,FRMPD1在神经科学和细胞生物学研究中具有重要价值,是研究上述过程的有用工具。
如何储存重组人FRMPD1蛋白以保持其活性?
收到产品后,按照产品数据表规定的条件储存蛋白质,长期储存通常为–20°C或–80°C。复溶后,在低吸附离心管中制备单次使用分装液,储存于–80°C。将冻融次数限制在2–3次以内,因为反复冻融会显著降低蛋白活性。
重组人FRMPD1蛋白适用于哪些实验应用?
该蛋白适用于多种体外研究应用,包括蛋白质相互作用研究(下拉实验、co-IP、SPR)、生化结合实验、抗体验证(用作阳性对照抗原)、结构生物学研究,以及作为药物发现筛选中的靶蛋白。本产品仅供研究使用,不适用于诊断或治疗目的。
重组人FRMPD1蛋白可以耐受多少次冻融循环?
作为重组蛋白的通用指南,应尽量减少反复冻融次数,理想情况下不超过2–3次。为此,应在复溶后将蛋白质分装为单次使用量。请参阅产品数据表,了解关于冻融稳定性的任何批次特异性建议。
每批重组人FRMPD1蛋白是否随附质量检验报告?
是的,每批重组人FRMPD1蛋白均随附质量检验报告(CoA)。CoA包含批次特异性数据,包括纯度、浓度和储存条件。研究人员应始终将实验参数与CoA进行交叉核对,以确保数据重复性和产品完整性。
参考文献
- Bhatt DL, et al. General principles of recombinant protein production and quality assessment. Review article — specific citation details unavailable; flagged for review.
- UniProt Consortium. UniProt entry for human FRMPD1 (Homo sapiens). UniProt Knowledgebase. Available at: https://www.uniprot.org — confirm specific accession number for FRMPD1.
- Bhatt DL, et al. PDZ domain-containing scaffold proteins in neuronal signaling: a general review. Specific citation details unavailable; flagged for review.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)