重组人GMPPA蛋白:研究使用指南
重组人GMPPA蛋白:研究使用指南
Recombinant Human GMPPA Protein是一种研究级重组酶,在GDP-甘露糖生物合成通路中发挥重要调节作用,是研究蛋白质糖基化及相关代谢过程的重要工具。
- 产品名称
- 重组人GMPPA蛋白
- 货号
- rp367981
- 参考来源
- absea#PP-5801
- 蛋白功能
- GDP-甘露糖焦磷酸化酶的调节亚基,参与糖基化通路的调控
- 研究应用
- 糖基化研究、酶活性测定、蛋白相互作用研究
- 储存建议
- 避免反复冻融,按说明书推荐温度储存
GMPPA概述及其生物学功能
GMPPA(GDP-甘露糖焦磷酸化酶A)是GDP-甘露糖焦磷酸化酶复合体的两个旁系同源亚基之一,另一亚基为GMPPB。该酶催化GTP与甘露糖-1-磷酸合成GDP-甘露糖,是含甘露糖糖链生物合成的关键步骤。GDP-甘露糖是甘露糖基化反应不可或缺的糖核苷酸供体,参与N-连接糖基化、O-连接糖基化及GPI锚定结构的生物合成。
与GMPPB不同,GMPPA被认为是具有催化活性减弱的调节性亚基,负责调控整体酶活性,并可能在细胞内GDP-甘露糖水平的反馈调节中发挥作用。GMPPA基因突变与无泪症、贲门失弛缓症及智力障碍综合征(AAMR综合征)相关,凸显了其重要的生理功能。
产品规格与质量
重组人GMPPA蛋白(货号:rp367981)采用成熟的重组表达系统生产,以确保高纯度和生物学相关性。研究人员应查阅产品说明书(参考编号:absea#PP-5801),获取以下参数的精确信息:
- 纯度:按说明书规定,通过SDS-PAGE或等效方法验证纯度等级。
- 配方:核实说明书上列明的缓冲液成分、蛋白浓度及任何载体添加剂(如BSA、甘油)。
- 标签信息:注意任何亲和标签或表位标签(如His标签、GST标签),这些标签可能影响下游实验设计。
- 生物活性:确认说明书是否提供功能性或结合活性数据。
纯度、浓度和分子量的所有具体数值在实验使用前均应参照最新产品说明书进行核实。
操作、复溶与储存方案
正确操作重组人GMPPA蛋白对维持其结构完整性和功能活性至关重要。请遵循以下通用指南,并始终参照产品说明书中的具体说明:
- 收货与检查:收货后立即检查标签是否正确、包装是否完好以及运输条件是否适当,记录批次号和有效期。
- 复溶:若产品为冻干粉,按说明书推荐的体积和缓冲液(通常为无菌水或PBS)进行复溶。开瓶前使小瓶平衡至室温,用移液器轻柔混匀,切勿涡旋。
- 分装:复溶后立即制备单次使用的分装份,以减少反复冻融导致的蛋白降解。
- 储存:按说明书规定温度储存分装份(长期储存通常为-20°C或-80°C),避免反复冻融以保持蛋白活性。
- 工作条件:实验操作过程中将蛋白置于冰上,使用低蛋白吸附离心管以减少吸附损失。
推荐研究应用
重组人GMPPA蛋白适用于多种体外研究应用。以下为此类重组蛋白的常见用途:
- 酶学与生化测定:作为重建的GDP-甘露糖焦磷酸化酶活性测定体系中的组分,用于研究酶动力学及抑制剂筛选。
- 蛋白-蛋白相互作用研究:适用于共免疫沉淀(Co-IP)、pull-down实验或表面等离子共振(SPR)研究,以鉴定GMPPA的结合配体(包括GMPPB)。
- 结构生物学:可用作抗体制备的抗原,或作为Western blot和ELISA验证实验的标准品。
- 无细胞体系:适用于研究甘露糖代谢的无细胞转录/翻译或通路重建实验。
- 疾病机制研究:可作为工具蛋白,用于研究AAMR综合征及先天性糖基化障碍(CDG)的分子机制。
研究人员应在其特定实验体系中验证该蛋白,并参阅最新说明书获取已确认的应用数据。
常见问题
GMPPA在人体细胞中的功能是什么?
GMPPA编码GDP-甘露糖焦磷酸化酶的调节亚基,该酶合成GDP-甘露糖——糖基化反应不可或缺的糖核苷酸供体。GMPPA调控催化亚基GMPPB的活性,并可能参与细胞内GDP-甘露糖水平的反馈调控。
如何储存重组人GMPPA蛋白以维持其活性?
按产品说明书规定的温度储存蛋白(长期储存通常为-20°C或-80°C)。复溶后制备单次使用分装份,避免反复冻融导致蛋白活性和完整性下降。实验过程中将蛋白置于冰上保存。
重组人GMPPA蛋白(rp367981)经过哪些应用验证?
该蛋白适用于酶活性测定、蛋白-蛋白相互作用研究(Co-IP、pull-down、SPR)、抗体制备用抗原,以及Western blot或ELISA标准品。如需特定已验证应用及已确认活性数据,请参阅最新产品说明书(absea#PP-5801)。
GMPPA蛋白可用于疾病模型研究吗?
可以。GMPPA基因突变与AAMR综合征(无泪症、贲门失弛缓症及智力障碍)相关,也可能与先天性糖基化障碍(CDG)有关。重组人GMPPA蛋白可作为工具蛋白,用于上述疾病背景下的机制研究、抑制剂测试或生物标志物检测方法的开发。
参考文献
- Koehler K, et al. Mutations in GMPPA cause a glycosylation disorder characterized by intellectual disability and autonomic dysfunction. Am J Hum Genet. 2013.
- Willer T, et al. The glucuronyltransferase B4GAT1 is required for initiation of LARGE-mediated alpha-dystroglycan functional glycosylation. eLife. 2014.
- Product Datasheet: Recombinant Human GMPPA Protein, absea#PP-5801. Aladdin Scientific / absea.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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