重组人GNB5蛋白:研究指南与应用
重组人GNB5蛋白:研究指南与应用
Recombinant Human GNB5 Protein是一种重要的科研试剂,帮助科学家研究G蛋白β5亚基在异三聚体G蛋白信号级联及相关细胞通路中的结构与功能作用。
- 产品名称
- 重组人GNB5蛋白
- 货号
- rp370331
- 蛋白家族
- G蛋白β亚基(WD40重复序列家族)
- 物种来源
- 人(智人)
- 主要研究应用
- G蛋白信号传导、蛋白质相互作用研究、酶活性检测
- 储存建议
- 分装后于-80°C保存,避免反复冻融
GNB5蛋白:生物学背景与研究意义
GNB5(G蛋白β5亚基)属于WD40重复蛋白超家族,是异三聚体G蛋白的一种非典型β亚基。与常规Gβ亚基(GNB1–GNB4)不同,GNB5优先与R7家族G蛋白信号调节蛋白(RGS)——包括RGS6、RGS7、RGS9和RGS11——相互作用,而非与Gγ亚基形成经典的Gβγ二聚体。这一独特的结合方式调控Gαi/o偶联受体的失活动力学,使GNB5处于视觉信号转导、神经元信号传导和心脏节律调节的核心位置。
GNB5基因功能缺失变异已被证实与人类严重智力障碍、心律失常(包括病态窦房结综合征)及视觉损伤相关,进一步凸显了其重要的生理意义。因此,重组人GNB5蛋白为体外解析上述通路提供了宝贵的生化研究工具。
产品规格与质量属性
阿拉丁科学重组人GNB5蛋白(货号:rp370331)采用重组表达技术制备,经充分表征,达到科研级别,适用于多种生化及细胞实验。研究人员应重点关注以下质量属性:
- 纯度:此类重组蛋白通常通过SDS-PAGE和/或HPLC进行评估,以确认纯度达到功能研究要求。请参阅当前批次检验报告(CoA)获取批次特异性纯度数据。
- 生物活性:功能验证可包括与已知GNB5相互作用蛋白(如RGS7或RGS9)的结合实验。请参阅产品说明书获取经验证的活性数据。
- 制剂:具体缓冲液组成、浓度及载体蛋白信息详见每批次产品说明书和CoA。
- 内毒素水平:对LPS污染敏感的实验,应在CoA中核实内毒素含量。
注意:纯度、浓度和内毒素的具体数值因批次而异,使用前请务必参阅随附的CoA。
推荐操作与储存规程
正确操作和储存重组人GNB5蛋白是保持生物活性、确保实验结果可重复的关键。请遵循以下指南:
- 收货时:立即检查包装。若产品以干冰运输,在开启前应先在推荐储存温度下短暂平衡。
- 复溶:若为冻干粉,按说明书规定的缓冲液复溶。将小瓶平衡至室温,加入适量无菌超纯水或推荐缓冲液,轻柔混匀,避免涡旋震荡。
- 分装:复溶后立即制备单次用量分装,以减少冻融次数,避免蛋白聚集和活性损失。
- 短期储存:如需在1–2周内使用,分装品可于4°C储存。稀释至低浓度时,加入0.1% BSA等载体蛋白以防止吸附损失。
- 长期储存:于-80°C保存。避免在-20°C储存,因无霜冰箱可能形成冰晶损伤蛋白。
- 解冻:在冰上解冻,不得使用超过37°C的水浴或加热模块。解冻后轻柔混匀,使用前短暂离心。
请务必查阅产品专属说明书,其中制剂相关储存说明优先于通用指导原则。
重组人GNB5蛋白的研究应用
重组人GNB5蛋白是一种用途广泛的科研试剂,适用于多个研究领域。代表性应用包括:
- 蛋白质相互作用研究:GNB5可作为pull-down实验、共免疫沉淀及表面等离子体共振(SPR)研究中的诱饵或猎物蛋白,用于表征其与RGS蛋白及其他结合伴侣的相互作用。
- 结构生物学:纯化的重组GNB5可用于晶体学或冷冻电镜样品制备,以阐明GNB5–RGS复合物的三维结构。
- 酶活性与GTPase活性检测:含GNB5的复合物可调节RGS蛋白对Gα亚基的GTPase加速活性;重组GNB5支持体外重建这些调控复合物以进行动力学分析。
- 抗体验证:重组GNB5蛋白可作为阳性对照抗原,用于验证Western blot、ELISA或免疫荧光中所用抗GNB5抗体的特异性。
- 药物发现与筛选:作为RGS–Gβ5信号轴的组成部分,重组GNB5有助于开发生化检测方法,以筛选G蛋白信号通路的小分子调节剂。
- 疾病机制研究:通过评估疾病相关突变对蛋白功能的影响,在体外模拟GNB5相关疾病,包括智力障碍和心律失常。
订购、质量保证与技术支持
重组人GNB5蛋白(货号:rp370331)可通过阿拉丁科学订购。为确保您收到正确产品和相关文件,请注意以下事项:
- 订购:在线下单或通过阿拉丁科学客户代表下单时,请注明货号rp370331。如需大量或定制规格,可按需咨询。
- 检验报告(CoA):每批货物随附批次专属CoA,并可通过批号在线查询。在实验使用前,请核查纯度、活性和内毒素数据。
- 质量保证:阿拉丁科学所有重组蛋白在出货前均经过内部质量控制检测,具体QC方法和验收标准详见产品说明书。
- 技术支持:如有关于复溶、最佳实验条件或故障排除的问题,请联系阿拉丁科学技术支持团队,提供货号和批号可加快处理速度。
- 退货与退款:若产品到货时损坏或不符合CoA所列规格,请参阅阿拉丁科学标准退货和退款政策。
常见问题
GNB5蛋白的主要生物学功能是什么?
GNB5是一种非典型G蛋白β亚基,优先与R7家族RGS蛋白(RGS6、RGS7、RGS9、RGS11)相互作用,调控Gαi/o偶联受体的失活。因此,GNB5是视觉光转导、神经元信号传导和心脏起搏的关键调节因子,而非经典Gβγ异二聚体的组成部分。
重组人GNB5蛋白应如何储存以保持活性?
收货后,应将蛋白分装为单次用量,避免反复冻融,并于-80°C长期储存。若需在1–2周内使用,分装品可在4°C短期保存。储存时请务必参阅批次专属CoA和产品说明书中的制剂特异性储存说明。
重组人GNB5蛋白适用于哪些实验类型?
重组人GNB5蛋白适用于蛋白质相互作用研究(pull-down、共免疫沉淀、SPR)、体外重建GNB5–RGS复合物用于GTPase实验、结构研究(晶体学、冷冻电镜)、作为阳性对照抗原用于抗体验证,以及针对G蛋白信号通路的药物发现筛选实验。
重组人GNB5蛋白是否经过验证可用作Western blot标准品?
是的,已知浓度和纯度的重组GNB5蛋白可用作Western blot实验中的阳性对照或分子量参考标准,以验证抗GNB5抗体的特异性。请通过当前产品说明书和CoA确认您所用批次的分子量及制剂信息。
GNB5基因突变与哪些疾病相关?该蛋白如何支持相关研究?
GNB5功能缺失突变与人类智力障碍、心律失常(如病态窦房结综合征)及视觉缺陷相关。重组人GNB5蛋白支持在体外对疾病相关突变体进行生化研究,有助于深入解析这些疾病的发生机制,并促进潜在治疗靶点的发现。
参考文献
- Bhattacharya S, et al. Meeting the challenge of GNB5-related neurodevelopmental syndrome. (General reference — specific details require verification.)
- Cheever ML, et al. Crystal structure of the multifunctional Gbeta5-RGS9 complex. Nature Structural & Molecular Biology. (Specific volume, page and year require verification.)
- Lodish H, et al. Molecular Cell Biology. 8th ed. W.H. Freeman. (General textbook reference for G-protein signaling.)
- Aladdin Scientific. Recombinant Human GNB5 Protein, SKU rp370331. Product Datasheet. (Access current version at aladdin-e.com.)
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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