重组人GNPNAT1蛋白:功能与应用
重组人GNPNAT1蛋白:功能与应用
Recombinant Human GNPNAT1 Protein是葡糖胺磷酸N-乙酰转移酶1的重组表达形式,是己糖胺生物合成途径中的关键酶,负责催化葡糖胺-6-磷酸的乙酰化反应,生成N-乙酰葡糖胺-6-磷酸。
- 蛋白名称
- 葡糖胺磷酸N-乙酰转移酶1(GNPNAT1)
- 别名
- GNA1;葡糖胺-6-磷酸乙酰转移酶
- 生物学功能
- 在己糖胺生物合成途径中催化葡糖胺-6-磷酸乙酰化生成N-乙酰葡糖胺-6-磷酸
- 相关通路
- 己糖胺生物合成途径;UDP-GlcNAc生物合成;O-GlcNAc糖基化
- 产品编号
- rp371606
- 物种来源
- 人(智人,Homo sapiens)
- 蛋白类型
- 重组蛋白
GNPNAT1简介:基因、蛋白及生物学功能
GNPNAT1(葡糖胺磷酸N-乙酰转移酶1),又称GNA1,编码一种属于乙酰转移酶超家族的酶。该蛋白在己糖胺生物合成途径(HBP)中催化关键反应:将乙酰基从乙酰辅酶A转移至葡糖胺-6-磷酸(GlcN-6P),生成N-乙酰葡糖胺-6-磷酸(GlcNAc-6P)。
该反应是从头合成尿苷二磷酸N-乙酰葡糖胺(UDP-GlcNAc)的必要步骤。UDP-GlcNAc是O-GlcNAc转移酶(OGT)及其他糖基转移酶的重要供体底物,为核蛋白和胞质蛋白的O-GlcNAc修饰所必需。这一翻译后修饰与营养感知、细胞应激反应及转录调控密切相关。
由于HBP整合了葡萄糖、谷氨酰胺、乙酰辅酶A和UTP代谢的信号输入,GNPNAT1处于广泛生理意义的代谢交叉点,在糖尿病、肿瘤代谢及神经退行性疾病研究中具有重要价值。
重组人GNPNAT1蛋白的生化特性
重组人GNPNAT1蛋白(货号:rp371606)采用重组表达系统生产,确保质量稳定、生物活性可靠,适用于体外研究应用。该蛋白对应人GNPNAT1基因产物,保留了GNAT(GCN5相关N-乙酰转移酶)超家族特征性乙酰转移酶催化结构域。
主要生化特性包括:
- 酶活性:葡糖胺-6-磷酸乙酰转移酶活性,需乙酰辅酶A作为共底物。
- 底物特异性:对葡糖胺-6-磷酸具有高度特异性;活性依赖于乙酰辅酶A的可用性。
- 表达系统:重组生产确保高纯度及批次间重现性。具体表达宿主及纯度数据请参阅产品说明书。
建议研究人员参阅Aladdin Scientific提供的最新产品说明书,以获取经确认的规格信息,包括分子量、纯度等级、配方缓冲液、储存条件及推荐复溶方案。
重组人GNPNAT1蛋白的研究应用
重组人GNPNAT1蛋白是多功能研究试剂,适用于涉及己糖胺生物合成途径、O-GlcNAc信号传导或UDP-GlcNAc代谢的多种研究场景:
- 酶活性检测:可用作乙酰转移酶活性比色法、荧光法或偶联酶促反应检测中的活性酶标准品或阳性对照。
- 生化途径重建:实现HBP步骤的体外重建,用于研究通量、酶动力学及抑制剂筛选。
- 药物发现与抑制剂筛选:作为靶酶,用于筛选与代谢疾病、肿瘤及HBP失调相关感染生物学的小分子抑制剂。
- 蛋白相互作用研究:可用于共免疫沉淀(Co-IP)、pull-down实验或表面等离子共振(SPR),绘制HBP内蛋白-蛋白相互作用图谱。
- 结构生物学:可作为晶体学或冷冻电镜研究的源蛋白,用于解析GNPNAT1活性位点以支持基于结构的药物设计。
- 抗体验证:在通过Western blot或ELISA验证抗GNPNAT1抗体时,用作阳性对照抗原。
操作、储存及复溶指南
正确操作和储存重组人GNPNAT1蛋白对于维持酶活性和结构完整性至关重要。适用于重组蛋白的通用最佳操作规范如下:
- 储存:按产品说明书要求,将冻干蛋白储存于–20°C或–80°C。避免反复冻融,以防蛋白聚集和活性丧失。
- 复溶:使用产品说明书推荐的缓冲液(通常为无菌PBS或制造商指定缓冲液)进行复溶。开瓶前使小瓶恢复至室温,复溶前短暂离心以收集冻干材料。
- 工作分装:复溶后立即制备单次使用分装,储存于–80°C以延长货架期。
- 载体蛋白:若蛋白在低浓度下不稳定,可考虑加入0.1% BSA(载体蛋白级)以稳定制品。
注意:请务必参阅Aladdin Scientific当前产品说明书,获取批次特定的储存条件、配方详情及复溶体积。
重组人GNPNAT1蛋白常见问题解答
请参阅下方常见问题解答部分,获取研究人员在使用本产品过程中常见问题的答案。
常见问题
GNPNAT1在己糖胺生物合成途径中的作用是什么?
GNPNAT1以乙酰辅酶A为乙酰基供体,催化葡糖胺-6-磷酸乙酰化生成N-乙酰葡糖胺-6-磷酸。该步骤对于下游UDP-GlcNAc的合成至关重要,UDP-GlcNAc是细胞内O-GlcNAc修饰及其他糖基化事件所必需的核苷酸糖。
重组人GNPNAT1蛋白(rp371606)采用哪种表达系统生产?
rp371606所采用的具体表达宿主系统请参阅Aladdin Scientific最新产品说明书,因为表达系统(如大肠杆菌、杆状病毒/昆虫细胞、HEK293)会影响翻译后修饰和活性特征。如需最新批次信息,请联系Aladdin Scientific技术支持。
如何储存重组人GNPNAT1蛋白以保持其活性?
作为重组蛋白的通用最佳操作规范,冻干品应储存于–20°C或–80°C,避免反复冻融。复溶后制备单次使用分装,储存于–80°C。请务必参阅产品专属说明书以获取经确认的储存和稳定性条件。
重组人GNPNAT1蛋白能否用于抑制剂筛选实验?
是的,重组人GNPNAT1蛋白适合用作抑制剂筛选实验中的靶酶。研究人员可采用偶联酶促反应或直接乙酰转移酶活性检测方法来测量GlcN-6P乙酰化的抑制情况。此类筛选与以HBP通量失调为特征的代谢疾病和肿瘤药物发现项目高度相关。
重组人GNPNAT1蛋白是否适合用作Western blot阳性对照?
是的,该重组蛋白可用作阳性对照抗原,通过Western blot或ELISA验证抗GNPNAT1抗体,前提是其分子量和标签构型与所用检测系统兼容。使用前请参阅产品说明书确认蛋白标签及配方信息。
参考文献
- Boehmelt G, et al. Decreased UDP-GlcNAc levels abrogate proliferation control in EMeg32-deficient cells. EMBO J. 2000.
- Vosseller K, et al. Elevated nucleocytoplasmic glycosylation by O-GlcNAc results in insulin resistance associated with defects in Akt activation in 3T3-L1 adipocytes. Proc Natl Acad Sci USA. 2002.
- Hart GW, Slawson C, Ramirez-Correa G, Lagerlof O. Cross talk between O-GlcNAcylation and phosphorylation: roles in signaling, transcription, and chronic disease. Annu Rev Biochem. 2011.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)