重组人GOLM2蛋白:操作与使用实验方案
重组人GOLM2蛋白:操作与使用实验方案
Recombinant Human GOLM2 Protein 是一种研究级高尔基体膜蛋白,专为细胞生物学、细胞内运输及相关疾病机制研究而生产,具备高纯度和功能相关性。
- 产品名称
- 重组人GOLM2蛋白
- 货号
- rp369614
- 蛋白来源
- 人(智人)
- 蛋白类型
- 高尔基体膜蛋白(II型跨膜蛋白)
- 推荐储存条件
- 收货后储存于-80°C,避免反复冻融
- 应用领域
- 细胞生物学研究、细胞内运输研究、疾病机制探究
GOLM2概述及其生物学意义
GOLM2(高尔基体膜蛋白2),又称CASC4(癌症易感性候选基因4),是一种主要定位于高尔基体的II型跨膜蛋白,参与高尔基体结构维持及细胞内蛋白质运输。由于GOLM2与癌症易感性的潜在关联及其在多种肿瘤中的表达特征,研究者对其关注度持续提升。Aladdin Scientific提供的重组人GOLM2蛋白(货号:rp369614)为研究人员在体外及相关疾病模型中探究上述生物学功能提供了高纯度的研究工具。
所需材料
- 重组人GOLM2蛋白(rp369614,Aladdin Scientific)
- 无菌、无核酸酶去离子水或推荐复溶缓冲液(如PBS,pH 7.4)
- 低吸附微量离心管(1.5 mL)
- 微量移液器及无菌吸头
- 涡旋混合仪和台式微量离心机
- SDS-PAGE及蛋白质印迹试剂(如需质量验证)
- 与下游应用兼容的适当检测缓冲液
- 干冰或液氮(用于分装储存)
复溶与储存实验方案
步骤1 — 准备:将重组人GOLM2蛋白(rp369614)冻干小瓶在开封前置于室温平衡10–15分钟,以减少冷凝水和污染风险。
步骤2 — 复溶:轻柔离心小瓶(1,000–2,000 × g,30秒),使冻干物沉积于管底。加入推荐体积的无菌PBS(pH 7.4)或制造商指定缓冲液进行复溶。请参阅产品数据表以确认复溶所需的准确体积和目标储液浓度。请勿剧烈涡旋,应轻柔移液混匀。
步骤3 — 分装:复溶后,使用低吸附微量离心管进行单次用量分装,以避免反复冻融导致蛋白质降解。
步骤4 — 储存:长期储存请将分装样品置于-80°C。短期使用(1–2周内)可视情况储存于-20°C或4°C。避免反复冻融,以免影响蛋白质完整性和活性。
注意:具体复溶体积、缓冲液建议及浓度数值应以每批次随附的产品合格证书(CoA)为准。
质量控制与验证
在进行下游检测前,建议通过以下方法验证复溶后重组人GOLM2蛋白的鉴别、纯度和完整性:
- SDS-PAGE:在还原及非还原条件下电泳,确认预期分子量条带并评估纯度。
- 蛋白质印迹(Western Blot):使用抗GOLM2抗体通过免疫检测确认蛋白质身份。
- 蛋白定量:采用BCA法或Bradford法测定实际蛋白浓度,并与数据表规格进行比对。
每批次产品随附的合格证书(CoA)提供纯度、内毒素及生物活性等批次特异性数据。如结果与规格说明存在显著偏差,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。
获得最佳实验结果的使用建议
添加载体蛋白:在极低工作浓度下使用时,建议在稀释缓冲液中加入载体蛋白(如0.1–0.5% BSA),以减少蛋白质在管壁上的吸附损失。
内毒素注意事项:若蛋白质用于细胞实验或体内实验,请在CoA中核实内毒素水平,并在整个操作流程中使用无内毒素试剂。
避免反复操作:复溶后尽量减少移液和混匀操作次数,以降低机械剪切导致的蛋白质聚集风险。
温度平衡:从-80°C取出分装样品使用前,应短暂离心融化后的小瓶,并将其平衡至适合检测的温度后再使用。
记录文档:对每份分装样品记录批次号、复溶日期、浓度及储存条件,以确保可追溯性和实验重复性。
常见问题
复溶重组人GOLM2蛋白(rp369614)应使用何种缓冲液?
推荐使用无菌PBS(pH 7.4)作为复溶缓冲液,除非产品数据表或合格证书(CoA)另有说明。请始终参阅随货附带的批次特异性CoA以获取最准确的指导,因配方不同,缓冲液建议可能有所差异。
如何储存重组人GOLM2蛋白以保持其稳定性?
收货后,将冻干蛋白储存于-80°C。复溶后,分装为单次用量并长期储存于-80°C。避免反复冻融,因为这会损害蛋白质完整性并降低生物活性。短期使用时,分装样品可在4°C储存一至两周。
重组人GOLM2蛋白经过哪些质量控制检测?
每批次产品随附的合格证书(CoA)提供批次特异性质量控制数据,包括SDS-PAGE纯度评估、蛋白质身份确认及内毒素水平。建议研究人员收货后查阅CoA,并根据具体应用需要进行额外的内部验证,如BCA蛋白定量或蛋白质印迹检测。
重组人GOLM2蛋白可用于细胞实验吗?
重组人GOLM2蛋白可能适用于细胞实验;但在用于细胞培养或体内模型之前,必须仔细评估内毒素水平,因为高内毒素污染会干扰实验结果。请查阅CoA了解内毒素规格,并在整个操作流程中使用无内毒素试剂。在大规模实验前,请先在您的特定检测体系中验证蛋白质的性能。
参考文献
- Aladdin Scientific Product Datasheet: Recombinant Human GOLM2 Protein (rp369614). Aladdin Scientific.
- General principles for reconstitution and storage of recombinant proteins. Standard laboratory practice guidelines.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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