重组人GPATCH1蛋白:研究指南与实验方案
重组人GPATCH1蛋白:研究指南与实验方案
Recombinant Human GPATCH1 Protein是一种研究级重组蛋白,含有保守的G-patch结构域,专为RNA加工、前体mRNA剪接调控及DEAH-box RNA解旋酶激活相关研究而生产。
- 产品名称
- 重组人GPATCH1蛋白
- 货号
- rp372858
- 蛋白家族
- 含G-patch结构域蛋白家族
- 主要功能
- DEAH-box RNA解旋酶辅助因子;参与前体mRNA剪接和RNA加工
- 物种来源
- 人(智人)
- 推荐储存条件
- 储存于-80°C;避免反复冻融
- 预期用途
- 仅供研究使用(RUO);不用于诊断或治疗
背景:GPATCH1基因与蛋白功能
GPATCH1(含G-patch结构域蛋白1)是G-patch结构域蛋白家族的成员,其特征是含有约50个氨基酸的保守富甘氨酸基序,即G-patch。G-patch蛋白主要存在于真核生物中,在功能上与RNA代谢密切相关,尤其是前体mRNA剪接和核糖体生物合成。
GPATCH1作为DEAH-box RNA解旋酶的辅助因子,DEAH-box RNA解旋酶是一类ATP依赖性酶,在剪接循环中负责重塑RNA-蛋白质复合体。通过激活解旋酶活性,GPATCH1在剪接体介导的内含子切除的保真性和效率方面发挥调控作用。包括G-patch蛋白在内的剪接因子失调已被证实与肿瘤发生及多种人类疾病相关,使GPATCH1成为基础RNA生物学和转化研究中备受关注的蛋白。
阿拉丁科学公司生产的重组人GPATCH1蛋白(货号:rp372858)可用于体外生化研究、相互作用分析及功能表征,无需从细胞裂解液中纯化内源性蛋白。
复溶与储存方案
正确复溶和储存重组人GPATCH1蛋白对于维持蛋白活性和防止降解至关重要。请遵循以下指南以确保最佳实验效果。
- 复溶:开瓶前短暂离心小瓶,使冻干粉收集于瓶底。用无菌高质量水(如Milli-Q或同等级别)或适合下游应用的缓冲液(通常为PBS或HEPES缓冲液,pH 7.2–7.4)复溶蛋白。轻柔溶解,避免剧烈涡旋。建议加入载体蛋白(如0.1% BSA),以在储存期间稳定蛋白并防止其吸附于管壁。
- 短期储存:分装后的蛋白可在4°C保存最长1周。
- 长期储存:以单次用量分装后储存于-80°C,以减少冻融次数。反复冻融会导致蛋白聚集、活性丧失和降解。
- 请勿储存于具有自动除霜循环的无霜冰箱中,温度波动会影响蛋白完整性。
注意:请务必参阅随货提供的产品专用数据表,了解特定批次的复溶体积和缓冲液建议,该信息可能优先于通用指南。
实验应用
重组人GPATCH1蛋白适用于多种体外研究应用,包括但不限于:
- 蛋白质-蛋白质相互作用研究:GPATCH1已知与DEAH-box RNA解旋酶相互作用。共免疫沉淀(Co-IP)、pull-down分析和表面等离子体共振(SPR)可用于绘制相互作用界面图谱并测量结合亲和力。
- 解旋酶激活分析:重组GPATCH1可用于偶联ATPase或解旋酶解链分析,功能性表征其对靶解旋酶的激活效应,为剪接体重塑机制提供见解。
- 蛋白质印迹(WB)和ELISA:作为纯重组抗原,GPATCH1蛋白可在免疫分析中用作阳性对照或标准品,用于检测不同细胞系或组织样本中内源性GPATCH1的表达水平。
- 结构研究:纯化的重组蛋白可用于X射线晶体学、冷冻电镜(cryo-EM)或核磁共振(NMR)研究,旨在解析G-patch结构域及其复合物的三维结构。
- 抗体验证:重组GPATCH1可作为可靠抗原,用于验证抗GPATCH1抗体的特异性和灵敏度。
请针对每种特定分析格式通过实验优化蛋白浓度和缓冲液条件。
质量、安全与法规注意事项
仅供研究使用:重组人GPATCH1蛋白(货号:rp372858)仅供体外研究使用。未获批准用于诊断程序、治疗应用或任何人体或动物体内给药。
纯度与质量控制:阿拉丁科学公司的重组蛋白在出货前均经过质量控制检测。用户应参阅随每批次产品提供的质量检验报告(CoA),了解纯度数据(通常通过SDS-PAGE评估)、内毒素水平及适用的活性数据。如货物中未附CoA,请联系阿拉丁科学公司客户服务部门获取相关文件。
安全性:虽然重组GPATCH1未被归类为生物危险物质,但仍应遵守标准良好实验室规范(GLP)。请佩戴适当的个人防护装备(PPE),包括手套、实验服和护目镜。有关操作、废弃物处置和紧急处理程序,请参阅安全数据表(SDS)。
法规合规:本产品的出口可能受适用的国家和国际法规约束。采购团队在订购国际货运前应核实合规要求。
常见问题
重组人GPATCH1蛋白的推荐复溶缓冲液是什么?
建议将冻干蛋白复溶于无菌水或生理缓冲液(如PBS或HEPES,pH 7.2–7.4)。添加0.1% BSA作为载体蛋白有助于稳定蛋白,防止因吸附造成损失。请务必参阅特定批次的CoA以获取推荐复溶体积。
如何储存重组人GPATCH1蛋白以保持其活性?
长期储存时,将复溶后的蛋白分装后储存于-80°C。避免反复冻融,因为这会导致聚集和活性丧失。正在使用的分装蛋白可在4°C短期储存(最长一周)。请勿储存于具有自动除霜循环的无霜冰箱中。
重组人GPATCH1蛋白经过验证适用于哪些实验应用?
重组人GPATCH1蛋白适用于蛋白质-蛋白质相互作用分析(Co-IP、pull-down、SPR)、体外解旋酶激活分析、蛋白质印迹阳性对照、ELISA标准品、抗体验证及结构生物学研究。建议针对每种具体应用优化实验条件。
重组人GPATCH1蛋白是否适用于体内或诊断用途?
否。本产品严格仅供研究使用(RUO),不适用于诊断、治疗或任何人体或动物体内应用。研究人员在使用本试剂时必须遵守所有适用的机构和法规要求。
如何获取本产品的质量检验报告(CoA)或安全数据表(SDS)?
质量检验报告(CoA)通常随货附上。如未附上,或需要安全数据表(SDS),请携带订单号和批次号联系阿拉丁科学公司客户服务部门。这两份文件对于正确使用和合规记录均不可或缺。
参考文献
- Bohnsack MT, Sloan KE. The mitotic spindle checkpoint: diverse roles and novel targets for G-patch domain proteins. Biochemical Society Transactions. General reference for G-patch domain protein biology.
- Wen X, et al. G-patch proteins: a new class of spliceosomal regulators involved in RNA helicase activation. General textbook-level reference; specific article details require verification.
- Aladdin Scientific Product Page: Recombinant Human GPATCH1 Protein, SKU rp372858. Aladdin Scientific internal product documentation.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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