重组人GPATCH11蛋白:常见问题解答
重组人GPATCH11蛋白:常见问题解答
Recombinant Human GPATCH11 Protein是重组表达的人源G-patch结构域蛋白11,专为生化、结构及功能研究应用而生产。
- 产品名称
- 重组人GPATCH11蛋白
- 货号
- rp375062
- 蛋白家族
- 含G-patch结构域蛋白家族
- 物种来源
- 人源(智人)
- 主要研究用途
- 生化检测、蛋白相互作用研究、功能表征
- 储存建议
- 遵循供应商提供的数据表;通常储存于-20°C或-80°C;避免反复冻融
什么是GPATCH11,为何对其进行研究?
GPATCH11,又称含G-patch结构域蛋白11,是G-patch结构域蛋白家族的成员。G-patch结构域是一种保守的富甘氨酸基序,存在于多种真核生物蛋白中,已知在RNA加工过程中发挥作用,包括前体mRNA剪接。GPATCH11被认为参与RNA解旋酶活性和剪接因子功能的调控,因此在RNA代谢和基因表达调控研究中备受关注。
对GPATCH11的研究有助于深入理解转录后基因调控及其与疾病机制的潜在联系,包括在发育和细胞稳态通路中的作用。该蛋白的重组形式使研究人员能够进行可控的体外实验,这是利用内源性蛋白来源难以实现的。
重组人GPATCH11蛋白的典型应用有哪些?
重组人GPATCH11蛋白适用于多种体外研究应用,包括但不限于:
- 蛋白质-蛋白质相互作用研究:研究GPATCH11的结合伴侣,尤其是在RNA解旋酶复合体和剪接体组分的背景下。
- 生化活性检测:评估GPATCH11对相关酶活性的调节作用。
- 抗体验证:作为阳性对照抗原,用于验证针对GPATCH11制备的抗体。
- 结构研究:为SPR、ITC或晶体学等生物物理表征方法提供纯化蛋白。
- 功能重建实验:在明确的体外体系中重建部分RNA加工复合体。
研究人员应参阅产品数据表,了解针对特定批次和表达系统的已验证应用。
重组人GPATCH11蛋白应如何储存和操作?
妥善的储存和操作对于维持重组蛋白的活性和完整性至关重要。针对GPATCH11等重组蛋白的一般最佳实践指南包括:
- 温度:按照产品数据表规定,短期使用时储存于-20°C,长期储存时置于-80°C。
- 分装:首次解冻后,将蛋白分装为单次使用量,以防止反复冻融导致活性损失。
- 载体蛋白:若蛋白不含稳定性载体,可考虑添加BSA至终浓度0.1%,以改善储存稳定性。
- 避免反复冻融:每次冻融循环均可能导致蛋白聚集和功能活性丧失。
- 工作条件:实验操作过程中将蛋白置于冰上,尽量减少在室温下的暴露时间。
请务必参阅随产品提供的特定批次数据表,获取准确的储存条件和有效期信息,因制剂配方可能有所不同。
该重组蛋白适用哪些质量和纯度标准?
用于研究的重组蛋白通常需依据多项质量参数进行评估,以确保实验结果的可重复性和可靠性。对于重组人GPATCH11蛋白,通常评估以下质量属性:
- 纯度:通过SDS-PAGE和/或HPLC评估;典型研究级重组蛋白的纯度目标通常≥85–95%,具体规格应以产品数据表为准。
- 身份确认:通过使用GPATCH11特异性抗体进行Western blot或质谱分析进行验证。
- 内毒素水平:通过LAL法检测;低内毒素规格对细胞实验至关重要。
- 生物活性:根据已知生物学特性,可通过结合实验或辅助因子刺激实验验证功能活性。
需要特定批次质量检验报告(CoA)的研究人员,请联系Aladdin Scientific客户服务部门或在订购时申请相关文件。
常见问题
GPATCH11与其他G-patch结构域蛋白有何区别?
GPATCH11是含有G-patch结构域的多种人源蛋白之一,该结构域是一种与RNA结合及RNA解旋酶调控相关的保守富甘氨酸基序。虽然G-patch结构域蛋白共享这一结构特征,但每个成员(包括GPATCH11)均具有独特的结构域构成、表达模式和相互作用伙伴,赋予其独特的生物学功能。研究人员应查阅最新文献,了解GPATCH11相对于GPATCH2、GPATCH4或RBM5等旁系同源物的最新功能表征。
重组人GPATCH11蛋白适用于细胞实验吗?
若内毒素水平满足目标细胞类型的要求,重组人GPATCH11蛋白可用于细胞实验,因为高内毒素污染可能干扰细胞反应。研究人员应核查产品数据表上的内毒素规格,并在向培养体系中引入外源蛋白时进行细胞活力对照实验。对于GPATCH11等胞内靶点,还可能需要优化递送方式(如蛋白转染试剂)。
收到重组GPATCH11蛋白后,如何确认其身份?
收到蛋白后,可通过SDS-PAGE验证表观分子量条带,随后使用经验证的抗GPATCH11抗体进行Western blot,以确认蛋白身份。如需进一步确认,可采用基于质谱的肽段图谱分析进行明确的序列验证。Aladdin Scientific为每个产品批次提供质量检验报告(CoA),研究人员应将其内部质控结果与所提供的CoA数据进行对比核验。
重组人GPATCH11蛋白采用何种表达系统生产?
来源材料中未详细说明重组人GPATCH11蛋白(rp375062)所使用的具体表达系统(如大肠杆菌、杆状病毒/昆虫细胞、哺乳动物细胞)。研究人员在开展实验前,应参阅Aladdin Scientific提供的官方产品数据表,或联系客户支持,确认表达宿主、标签信息及制剂详情。
重组人GPATCH11蛋白能否用作ELISA标准品或包被抗原?
重组人GPATCH11蛋白可用作ELISA抗体筛选的包被抗原或夹心ELISA开发的标准品,前提是蛋白在检测条件下能保持适当的表位呈现。其适用性取决于蛋白纯度、制剂缓冲液与ELISA板的相容性以及所用抗体。建议研究人员在开展大规模实验前,先对包被浓度和封闭条件进行预实验。
参考文献
- Aladdin Scientific product page: Recombinant Human GPATCH11 Protein, SKU rp375062.
- Sloan KE, Bohnsack MT. Unravelling the mechanisms of RNA helicase regulation. Trends Biochem Sci. 2018. [General reference for G-patch domain helicase regulation — verify applicability to GPATCH11]
- Heininger AU, et al. Protein cofactor competition regulates the action of a multifunctional RNA helicase in different pathways. RNA Biol. 2016. [G-patch protein functional context — verify relevance to GPATCH11 specifically]
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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