实验方案(Protocols)

重组人GPR158蛋白:制备与使用实验方案

Recombinant Human GPR158 Protein是孤儿G蛋白偶联受体GPR158的纯化重组形式,专为结合实验、结构研究及GPCR相关药物发现研究而制备。

产品名称
重组人GPR158蛋白
货号
rp368052
蛋白家族
C类G蛋白偶联受体(GPCR),孤儿受体
物种来源
人(智人)
推荐储存条件
-80°C长期储存;避免反复冻融
供应商参考编号
absea#PQ-843

GPR158概述及研究意义

GPR158是C类G蛋白偶联受体(GPCR)超家族的成员,被归类为孤儿受体,即其内源性配体尚未被明确鉴定。该受体主要在中枢神经系统中表达,在小脑、前额叶皮层和海马体中均有较高表达水平。新兴研究表明GPR158参与情绪调节、应激反应,并可能与抑郁症等神经精神疾病相关。由于其选择性神经表达模式,该受体已被视为开发新型治疗药物的候选靶点。

重组人GPR158蛋白(rp368052)使研究人员能够在不依赖内源性表达系统的情况下研究受体结构、筛选潜在配体并进行生化表征实验。本产品仅供体外研究使用。

复溶操作规程

请按照以下步骤正确复溶重组人GPR158蛋白:

  1. 平衡温度:开瓶前,将小瓶在室温下平衡10–15分钟,勿加热。
  2. 离心:短暂离心小瓶(1,000–2,000 × g,30秒),使可能附着于瓶盖或瓶壁的冻干物沉降。
  3. 复溶缓冲液:用无菌去离子水或适当的生理缓冲液(如PBS,pH 7.4)将蛋白复溶至工作浓度。请参阅质量检验报告(CoA)获取供应商推荐的复溶体积和终浓度。
  4. 轻柔混匀:轻轻旋转或用移液器混匀,勿涡旋,以免蛋白变性。
  5. 载体蛋白(可选):为提高长期稳定性,尤其在低蛋白浓度条件下,建议在复溶缓冲液中加入0.1% BSA(牛血清白蛋白)作为载体蛋白。

注意:请务必查阅产品专属CoA(absea#PQ-843)获取批次特异性复溶说明,因不同批次规格可能有所差异。

储存与操作指南

妥善储存对维持重组人GPR158蛋白的生物活性和结构完整性至关重要:

  • 短期储存(≤1周):复溶后在4°C条件下保存。
  • 长期储存:将复溶蛋白分装为单次用量,于-80°C储存,以防止反复冻融导致的降解。
  • 避免反复冻融:每次冻融循环均可降低蛋白活性,请按单次实验用量分装。
  • 冻干原液:未开封的冻干蛋白应按产品标签和CoA规定条件储存,通常为-20°C或-80°C。
  • 无菌操作:在无菌条件下处理复溶蛋白,防止微生物污染。

如发现蛋白出现聚集、浑浊或污染迹象,应及时丢弃未使用的蛋白。

质量控制与故障排查

质量控制:每批次重组人GPR158蛋白在发货前均经过纯度和鉴别检测。请参阅质量检验报告(CoA,absea#PQ-843)获取批次特异性数据,包括纯度评估(通常采用SDS-PAGE)、鉴别确认及内毒素水平(如适用)。

常见问题故障排查:

  • 蛋白聚集:若观察到沉淀,低速离心溶液(500–1,000 × g,5分钟,4°C)后使用上清液。聚集可能由不当浓度冻存或缺乏载体蛋白引起。
  • 活性丧失:核实储存条件,确认冻融次数已降至最低。确保复溶缓冲液适当且新鲜配制。
  • 结合实验信号偏低:优化蛋白包被浓度、孵育温度和时间。确认检测试剂和实验方案与所用蛋白标签或天然形式相容。
  • 污染:如怀疑微生物污染,请丢弃该小瓶并联系Aladdin Scientific技术支持。

如需进一步技术支持,请联系Aladdin Scientific客户支持,并提供货号rp368052及CoA上的批次号。

常见问题

重组人GPR158蛋白(rp368052)采用何种表达系统生产?

rp368052所使用的具体表达系统应通过查阅质量检验报告(CoA,absea#PQ-843)或联系Aladdin Scientific技术支持进行确认。膜相关GPCR常用的表达系统包括哺乳动物细胞表达(如HEK293)或昆虫细胞系统(如Sf9),这些系统能更好地保留与GPCR功能相关的翻译后修饰。

重组人GPR158蛋白能否用于细胞功能实验?

可溶性或部分纯化形式的重组GPR158蛋白主要用于生化实验,如配体结合、蛋白质相互作用研究和免疫分析。对于检测下游信号传导(如cAMP、钙流量)的细胞功能实验,通常优先选择在适当细胞系中过表达GPR158。请联系Aladdin Scientific技术支持,确认rp368052的形式及其对特定实验方案的适用性。

如何处理重组人GPR158蛋白以防止活性丧失?

为保持活性,请在开瓶前将小瓶平衡至室温,轻柔复溶勿涡旋,并立即分装为单次用量储存于-80°C。避免反复冻融,低浓度操作时考虑添加0.1% BSA作为载体蛋白。请务必遵循rp368052 CoA中提供的具体操作说明。

重组人GPR158蛋白(rp368052)是否适合用作ELISA标准品?

重组蛋白可用作ELISA实验中的标准品或阳性对照,前提是该蛋白能被实验中使用的检测抗体识别。请通过查阅CoA确认rp368052与您的抗体对的相容性,如有需要,可联系Aladdin Scientific技术支持获取抗原-抗体相容性方面的指导。

参考文献

  1. Orlandi C, et al. GPR158 mediates RGS7 function and interacts with RGS7-Gβ5 complexes. Research describing GPR158's interaction with RGS7 scaffolding complexes and its role in neuronal signaling.
  2. Hauser AS, et al. Pharmacogenomics of GPCR Drug Targets. Cell. 2017. Review covering the landscape of GPCR targets including orphan receptors such as GPR158.
  3. Aladdin Scientific Product Page: Recombinant Human GPR158 Protein, SKU rp368052. Certificate of Analysis absea#PQ-843.

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

目录: 实验方案(Protocols)

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《重组人GPR158蛋白:制备与使用实验方案》. 阿拉丁知识库,更新于 2026年10月31日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/recombinant-human-gpr158-protein-protocol.html
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